ERCC1基因19007C/T多态性与上皮性卵巢癌铂类联合化疗反应关系的M eta分析

蔡祖艾 张玮

作者单位：530021 南宁 广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科

循证医学

ERCC1基因19007C/T多态性与上皮性卵巢癌铂类联合化疗反应关系的M eta分析

蔡祖艾 张玮

作者单位：530021 南宁 广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科

目的 探讨ERCC1基因19007C/T多态性与上皮性卵巢癌铂类联合化疗反应的关系。方法 全面检索Pubmed、HuGENet及万方数据库，按照纳入、排除标准选取文献并提取相关数据进行Meta分析，采用Stata 11.0软件分析ERCC1不同基因型与化疗反应的关系。结果 纳入7篇文献共711例患者，ERCC1基因19007C/T多态性与上皮性卵巢癌铂类联合化疗反应性之间的差异无统计学意义（P＞0.05）。进一步对每种模型按照种族、标本来源、是否哈温平衡及基因型检测方法进行分层分析，发现其结果亦均无统计学意义（P＞0.05）。结论 未发现ERCC1 19007C/T基因型与上皮性卵巢癌患者对铂类联合化疗敏感性之间的联系，未来需要设计良好的大样本试验以进一步研究。

卵巢肿瘤；ERCC1；单核苷酸多态性；多药耐药；铂类；联合化疗；Meta分析

上皮性卵巢癌治疗标准方案为减瘤术及以铂类为基础的联合化疗。晚期患者大部分对初次化疗敏感，但最终常常发展为对多种化疗药物耐药，进而导致化疗失败甚至死亡［1］。卵巢癌为异质性疾病，分子水平研究证实其多药耐药涉及药物外排、损伤修复异常等机制。ERCC1基因作为核苷酸切除修复途径（nucleotideexcision repair，NER）的重要成员，已有报道其19007C/T多态性与卵巢癌以铂类为基础的联合化疗耐药相关，但是诸多研究结果不一致。本文拟全面检索ERCC1基因19007C/T变异与上皮性卵巢癌化疗反应相关文献，采取Meta分析的方法，探讨ERCC1不同基因型与化疗反应的关系。

1 材料与方法

1.1 检索策略

采用“ERCC1”or“excision repair cross-complementation group 1”，“ovarian neoplasm”or“ovarian cancer”，“polymorphism”or“genetic variation”组合方式检索Pubmed数据库，采用“ovarian neoplasm”，“ERCC1”组合方式检索HuGENet数据库。采用“ERCC1”or“交叉互补1”，“卵巢癌”，“基因多态性”组合方式检索万方数据库。检索截止时间为2014年10月20日。对检出的论文再次搜索相关文献并纳入后续处理，中英文不限。

1.2 纳入及排除标准

纳入标准：⑴经病理检查证实为上皮性卵巢癌的初治患者；⑵术后接受以铂类为基础的联合化疗；⑶采用肿瘤组织或外周血液白细胞提取的基因组DNA检测基因型；⑷若多篇文献采用了相同标本，选择病例数较多的研究；⑸研究的基因型为19007C/T或rs11615或第118号编码子C/T多态性。排除标准：⑴综述、学位论文、通讯、letter和会议摘要等概述性论文；⑵不能获得相关数据的文献。

1.3 数据提取

所有文献检索由两人独立完成，若有争议通过讨论协商解决。对每篇纳入的文献提取以下数据：作者、论文发表年份、第一作者国别、患者种族、年龄、总病例数、满意减瘤术残存瘤直径（residual diameter，RD）标准、标本来源、FIGO分期、细胞分化程度、组织病理、基因型检测方法及各基因型敏感和耐药患者的例数等，并计算哈温平衡的P值。

1.4 统计学方法

采用风险比（odds ratio，OR）及其95%可信区间（confidential interval，CI）评估各基因型或遗传模式与化疗反应敏感性的关系。以Stata（11.0版）计算组合OR值，Z检验计算差异P值。Cochran Q检验计算各研究之间的异质性，若Q检验P＜0.05或异质性I2值＞50%，则采用随机效应模型。Begger漏斗图和Egger线性回归评估发表偏倚。分别对种族、标本来源、是否哈温平衡及基因型检测方法进行分层分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 提取的文献信息

从Pubmed和HuGENeT检索出的原始文献经剔除重复后共39篇，从万方数据库检索出2篇。经上述排除及纳入标准筛查后最终7篇文献包括711例患者纳入分析。具体流程见图1。中位年龄50～65岁，病例数范围为41～220例。除1个研究采用RD＜2 cm定义满意手术外，其余全部采用RD≤1 cm。标本来源有4篇采用肿瘤组织，另外3篇采用外周血液白细胞。FIGO分期方面，除1个研究为晚期外，其余均包括Ⅰ～Ⅳ期。病理类型方面除1篇为高级别浆液性腺癌（HGSOC）外，其他均为以浆液性为主体，包括其他上皮类型的混合。基因型检测方面4篇文献采用RT-PCR技术，另外3篇采用Snapshot法。除2篇外，其他研究的基因型分布均符合哈温平衡。耐药判断标准均为化疗期间疾病复发或进展，或者化疗完毕6个月以内疾病复发/进展。复发/进展的依据1篇未具体说明［2］，另有1篇以单纯测量CA125的RUSTIN判断为标准［3］，其余包括WHO、实体瘤化疗评价标准（RECIST）［4］以及体检、影像学检查或结合CA125来判断。在采用客观反应（OR）研究中以完全反应（CR）和部分反应（PR）为敏感，以稳定（SD）和进展（PD）为耐药。以RUSTIN标准判断敏感为CA125反应者，耐药为CA125不反应者。评价细胞分化程度以Ⅰ～Ⅲ级分别代表低、中和高分化，7篇文献在细胞分化方面均包括Ⅰ～Ⅲ级。见表1。

2.2 ERCC1 19007C/T不同基因型与化疗反应组合分析结果

由于C为次要等位基因且研究报道其与化疗敏感有关，我们采用CC vs TT、CT vs TT以及CC+CT vs TT 3种模型来分别组合分析其与化疗敏感之间的关系。采用固定效应分析，发现各模型异质性均较大（I2分别为75.7%、77.2%和78.8%）。采用随机效应分析，结果表明3种模型与化疗敏感反应之间的差异均无统计学意义。进而分别对每种模型按照种族、标本来源、是否哈温平衡及基因型检测方法进行分层分析，发现其结果均无统计学意义。见图2、表2。7篇文献在不同模型下分析均未发现存在发表偏倚。

图1 文献检索和筛选流程图

图2 ERCC1基因19007C/T多态性与上皮性卵巢癌铂类联合化疗反应关系的M eta分析森林图（CC vs TT基因模型）

表1 纳入研究的基本特征

表2 ERCC1 19007C/T基因型不同模型与化疗敏感性之间的组合及分层分析结果

（续表）

3 讨论

碱基切除修复（base excision repair，BER）是参与卵巢癌多药耐药的经典途径之一。作为该途径的重要成员，ERCC1基因表达产物在修复初期发挥DNA损伤识别功能。铂类化疗药物主要通过使癌细胞DNA交联而发挥抗癌作用。既往研究表明，ERCC1基因第4个外显子的第3个碱基（19007C/T）发生改变后可导致其基因转录活性降低50%，从而可能导致其蛋白/mRNA的表达降低而影响化疗敏感性［11］。因此ERCC1基因19007C/T多态性理论上与以铂类为基础的联合化疗敏感性有关。

但是既往对包括19007C/T和8092C/A等在内的ERCC1基因多态性热点研究的结果却不尽一致。Marsh等［12］和Moxley等［5］认为上述两种基因多态性与卵巢癌耐药均无关联。Kim等［8］也认为8092C/A多态性与化疗耐药无关。而Yan等［13］研究则认为19007T/C TT型较CC型耐药，而8092C/A与化疗敏感性无关。Steffensen等［6］分析结果表明19007T/C的 TT型比 T/C+CC型反应好，Kang等［2］认为19007T/CCT+TT型较CC型敏感。Qi等［9］通过分析发现19007T/C TT型较CC型耐药，此外在ERCC1其余5个标签单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）（rs3212986、rs735482、rs3212955、rs12610134和rs3212958）均与卵巢癌联合化疗敏感性无关。本次纳入的7个研究在不同模型下进行整体及分层研究均未发现有意义的阳性结果，该结果可能与多种因素相关。

首先，ERCC1基因表达产物（蛋白/mRNA）与卵巢癌铂类联合化疗敏感性的关系尚未确定。有多项研究认为ERCC1蛋白的高表达或阳性表达与耐药相关［14～18］，而Stadlmann等［19］和Bösmüller等［10］则认为ERCC1蛋白的表达与耐药无关。另一方面，Dabholkar等［15，20］研究结果显示ERCC1mRNA高表达与耐药相关，而Deloia［21］和Smith等［7］认为其与耐药无关。标本数量少、分子抗体不同以及对表达水平的判断存在较大误差等因素均可能与之有关。

其次，ERCC1基因表达产物蛋白、mRNA与基因多态性三者之间的关系也尚未明确。如Steffensen等［6］认为其蛋白水平与基因型无关。Bösmüller等［10］研究认为ERCC1蛋白的表达与mRNA的表达无关。Smith等［7］认为ERCC1 mRNA的表达与19007T/C基因型无关。但Yu等［11］认为19007T/C多态性与ERCC1 mRNA的表达下降相关。

本次纳入标本数量较少，可能达不到足够的检验效能。另外各研究之间差异性较大，如在判断耐药、敏感的方法上存在WHO、RECIST、RECIST联合CA125以及RUSTIN等多个标准，虽然Bridgewater等［22］研究表明各方法在判断卵巢癌耐药性方面的差异不具有统计学意义，但是对于较小样本的荟萃分析来说其影响可能很大，甚至有可能导致结果完全相反。

目前临床研究表明，卵巢癌多药耐药与组织病理、细胞分化、FIGO分期和年龄等因素相关，涉及药物吸收、运输、代谢转换、胞内药物外排增加等多个药理机制，包括ABCB转运体、乳腺癌耐药蛋白、肺耐药蛋白等多个基因家族，此外还证实多药耐药与miRNA、基因突变、甲基化调控等相关。ERCC1基因的SNP只是其中可能影响卵巢癌耐药性的一种方式。

目前有研究认为上皮性卵巢癌是一种多基因性疾病，多个低显性基因的协作可发挥相当于高显性基因的作用。采用高通量SNP芯片技术检测大样本量的卵巢癌敏感/耐药标本基因组DNA后再进行统计学分析，有望发现更多低显效的基因SNP位点，从而为最终揭示卵巢癌多药耐药提供帮助［23］。事实上，利用发现的SNP差异位点开发的靶向药物如吉非替尼在卵巢癌治疗中已显示一定的应用前景。随着更多治疗靶点的发现，有望研发出能使卵巢癌患者获益更多、毒副反应更少的靶向药物［24］。

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［2014-07-17收稿］［2015-01-23修回］［编辑 阮萃才］

M eta-analysis of the association between ERCC1 gene 19007C/T polym orphism and response of patientsw ith epithelial ovarian cancer to platinum-based combination chemotherapy

CAI Zu′ai，ZHANG Wei（Department of Gynecology Oncology，Affiliated Tumor Hospital of Guangxi Medical Universit，Nanning 530021，P.R.China）

ZHANGWei.E-mail：zw1125@126.com

Objective To explore the relationship between the 19007C/T polymorphism in the excision repair cross-complementation group 1（ERCC1）gene and response of patientswith epithelial ovarian cancer to platinum-based combination chemotherapy.Methods Pubmed,HuGENetandWanfang databaseswere systematically searched,and Stata11.0meta-analysiswasused to explore relationshipsof different genotypes of the 19007C/T polymorphism and chemotherapy response.Results 7 eligible studies involving 711 patientswere retrieved.No significant associations were found in meta-analyses of ERCC1 gene 19007C/T polymorphism and chemosensitivity to Cisplatin.Race，Specimen source，whether the hardy Weinberg equilibrium and gene detection method were stratified analysis in each model，but there was no statistical significance.Conclusion This meta-analysis did not identify any significant relationships between the ERCC1 19007C/T polymorphism and response of patients with epithelial ovarian cancer to platinum-based combination chemotherapy.Large，well-designed studies are needed to verify these findings.

Ovarian neoplasms；Excision repair cross-complementation group 1；Single nucleotide polymorphism；Multidrug resistance; Platinum-based drugs；Combined chemotherapy；Meta-analysis

R737.31

A

1674-5671（2015）04-06

10.3969/j.issn.1674-5671.2015.04.09

广西自然科学基金资助项目（桂财教2014-118号）

张玮。E-mail：zw1125@126.com