阿奇霉素对立克次体性心肌炎患者血清HMGB1和IFN—γ的影响

蒋连保 廖运学 黄小都 谢峰云 李立军 龙新山

【摘 要】 目的 探讨阿奇霉素对立克次体性心肌炎患者血清HMGB1、IFN-γ水平变化的影响，阐述其临床意义。方法 选用阿奇霉素治疗立克次体性心肌炎患者，实验分组：A组（对照组）：0.9%氯化钠250 ml 静滴，B组：每日口服阿奇霉素分散片0.5，C组：每日静滴阿奇霉素注射液0.5；治疗后第1、3、5、7天用ELISA测定血清HMGB1、IFN-γ水平，并进行相关分析。结果 A组患者血清HMGB1、IFN-γ水平变化不明显，C组较B组逐渐减弱（p<0.05），两者呈正相关（r=0.91，P<0.01）。结论 阿奇霉素可降低立克次体性心肌炎患者血清HMGB1、IFN-γ水平，其结果为临床治疗立克次体性心肌炎患者提供了理论依据。

【关键词】 阿奇霉素；立克次体性心肌炎；HMGB1；IFN-γ

【中图分类号】 R978.1+5 【文献标识码】 A

立克次氏体病是由感染立克次氏体引起，主要有恙虫病、流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒、立克次氏痘等，是一种人畜共患性急性发热性疾病[1]。这类疾病存在于世界各地，在热带和亚热带一些国家，尤其是第三世界国家比较常见，国内长江以南发病率较高。易导致器官功能障碍，如并发心肌炎、肺炎、脑膜脑炎、肾功能衰竭等，死亡率较高[2]。国内外对立克次氏体病及其并发症的报道较多，但从细胞因子角度研究其临床及发病机制的报道较少。本实验用阿奇霉素治疗立克次体性心肌炎患者，观察其疗效，并检测血清HMGB1、IFN-γ水平变化，探讨其发病机制，为临床治疗提供新依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取我院 2012年6月—2014 年9月符合立克次体性心肌炎诊断标准的住院患者且年龄在18岁以上的120例进行临床研究，其中男性80例，女性40例。

1.2 方法

1.2.1 患者行实验室检查（如血象、血清学及病原学检查），结合流行病学资料确定诊断[2]。根据同条件诊断结果进行统计分析。

1.2.2 患者从入院第一日始静滴0.9%氯化钠250ml和口服或静滴阿奇霉素0.5g（每日一次）。实验随机分三组：A组（对照组）：0.9%氯化钠250ml 静滴；B组：口服阿奇霉素分散片0.5g；C组：0.9%氯化钠250ml加阿奇霉素注射液0.5g静滴。

1.2.3 酶联免疫吸附法（ELISA）测定患者血清HMGB1、IFN-γ水平：于治疗后的第1、3、5、7天次日清晨采用抗凝管空腹抽取四组患者外周静脉血4ml，静置1.5小时，待上层血清析出，立即以2000转/分钟速度离心10分钟，将血浆与血细胞快速分离，取上层血浆，装入编号EP管中，置入-80℃冰箱冻存。采用ELISA法检测患者血清HMGB1、IFN-γ水平。试剂盒购于德国IBL公司，操作按试剂盒说明书严格进行，采用美国Bio Rad 550全自动酶标仪在波长于450nm处读取吸光度值，绘制标准曲线，以标准品浓度作横坐标，光密度（ optical density，OD）值作为纵坐标，通过标本的 OD值在标准曲线上得到标本HMGB1 、IL-6浓度，并进行相关分析。

1.3 统计学方法 使用SPSS 18.0统计软件进行数据分析，计量资料数据用均数±标准差（x±s）表示，计数资料比较采用率表示，组间两两比较采用q检验及t检验，P<0.05有统计学意义，P<0.01有显著统计学意义。

2 结果

2.1 立克次体性心肌炎病因统计 对120例患者资料进行统计与分析，其中姜虫病85例，占疾病案例总数70.8%；流行性斑疹伤寒15例，占疾病案例总数12.5%；地方性斑疹伤寒20例，占16%；其中男性80例，占66.7%，女性40例，占33.3%。

2.2 ELISA测定血清HMGB1、IFN-γ水平变化 ELISA检测结果显示，A、B、C三组患者血清HMGB1、IL-6浓度B组较A组弱（P<0.05），C组比B组弱（P<0.05）、D组弱于C组（P<0.05）；且于治疗后1、3、5、7天抽血测定的结果有显著差异（P<0.05）。（见表1）

2.3 将以上患者治疗后第7天血清HMGB1、IFN-γ水平进行相关性分析： 结果呈显著正相关（r=0.91，P<0.01）。

3 讨论

立克次氏体是由美国病理学家H.T.立克次首先描述，故名。立克次氏体病以鼠类为储存宿主，由某些节肢动物如虱、蚤、蜱或螨为媒介传给人类。表现有高热、头痛、精神症状（如谵妄、狂躁、昏迷等）、皮疹（Q热无皮疹）和肝、脾肿大等，有的有皮肤溃疡及焦痂。诊断主要依据典型临床表现。确诊可作立克次氏体分离及血清学检查[3]。其病原体在自然界主要存在于啮齿动物（家鼠、田鼠、沟鼠等）和家畜（犬、牛、羊）体内。传染源主要是病人和鼠类。感染后病情进展快，易并发心肌炎、肺炎等并发症。阿奇霉素或四环素族抗生素治疗有特效。

HMGB1 是一个具有显著促炎效应的细胞因子。研究发现， HMGB1可通过作用一些炎症介质来干預IFN-γ、IL-6 、VEGF等的调节；另有报道，HMGB1还可引起炎症的级联放大效应，形成复杂的网络体系[34]，表现为一种正反馈效应[4]。IFN-γ也是一种强有力的致炎症因子，可以刺激血管内皮细胞表达粘附子，并上调其它致炎症细胞因子如IL-1等表达[4]。立克次氏体侵入人体后，常在小血管内皮细胞及单核吞噬细胞系统中繁殖，引起细胞肿胀、坏死以及造成血管炎等。立克次氏体亦可在实质器官中（如肝、脾、肾、脑、心等）的血管内皮细胞中繁殖，导致细胞代谢障碍、坏死及间质性炎症，引致相应症状[5]。

阿奇霉素是一类时间依赖性大环内酯类抗菌药物，对立克次体、衣原体、支原体等有抗菌作用，具有较长的PAE及半衰期（14.9-76.8小时）。本实验证实，在立克次体性心肌炎患者中，可以检测到HMGB1、IFN-γ因子，说明HMGB1、IFN-γ参与其发病过程；立克次体性心肌炎可能诱导HMGB1、IFN-γ的分泌，加重立克次体性心肌炎全身炎症的病情进展。研究证明，HMGB1、IFN-γ也可作为判断立克次体性心肌炎患者免疫功能状态的指标之一。抑制或减少HMGB1、IFN-γ的分泌可作为立克次体性心肌炎的预防和治疗措施之一。

另外，實验过程中分别检测A、B、C三组HMGB1、IFN-γ水平，发现HMGB1、IFN-γ浓度逐渐减弱，说明静滴阿奇霉素较口服使用可以更有效抑制其炎症反应，同时为使用阿奇霉素治疗立克次体性心肌炎提供了新证据，其理论依据为临床治疗立克次体性炎性并发症提供了新思路。

参考文献

[1] Kar A，Dhanaraj M，Dedeepiya D，et al. Acute encephalitis syndrome following scrub typhus infection [J].Indian J Crit Care Med，2014，18（7）：453-455.

[2] 陈灏珠，钟南山，陆再英，等.内科学[M].第8版.北京：人民卫生出版社，2013：282-284.

[3] Griffith M，Peter JV，Karthik G，et al.Profile of organ dysfunction and predictors of mortality in severe scrub typhus infection requiring intensive care admission.[J].Indian J Crit Care Med，2014，18（8）：497-502.

[4] Keller CA，Hauptmann M，Kolbaum J，et al.Dissemination of Orientia tsutsugamushi and Inflammatory Responses in a Murine Model of Scrub Typhus.[J].PLoS Negl Trop Dis，2014，8（8）：30-64.

[5] Singh R，Singh SP，Ahmad N.et al.A Study of Etiological Pattern in an Epidemic of Acute Febrile Illness during Monsoon in a Tertiary Health Care Institute of Uttarakhand，India[J]. J Clin Diagn Res，2014，8（6）：1-3.