液相色谱法高效测定新型杀菌剂咯菌腈原药的方法

谷 兵，肖慧明

（1.国家农药质检中心，辽宁沈阳 110000； 2.辽宁轨道交通职业学院，沈阳 110036）

咯菌腈 (Fludioxonil)是一种新型的高效、低毒、低残留的仿生杀菌剂。它被广泛地应用于防治农业生产中的真菌性病害，对棉花、花生、水稻、蔬莱等作物的雪腐病、青枯病、茎基腐病等疾病具有显著的效果，不易产生药害。由于现在咯菌腈制剂种类繁多，每种制剂咯菌腈含量是否准确，就直接决定着相应剂型的采用是否能产生足够的药效，是否会产生药害。而这些也直接取决于我们用于配制剂型的咯菌腈原药的有效成分咯菌腈含量是否能较好地在短时间内被确定出来。

该文介绍一种高效液相色谱法可快速的将有效成分咯菌腈与杂质有效分离，对优化咯菌腈原药的制备工艺，简化检测过程提供很好的借鉴。

1 实验部分

1.1 试剂及试验设备

试验设备：液相色谱仪 （Waters2489美国Waters公司）；紫外-可见分光光度计 （UV-2201，日本岛津科技有限公司）。

试剂：乙腈 （色谱级），丙酮，新蒸二次蒸馏水，咯菌腈标准品 （含量99.5%）。

1.2 色谱操作条件

色谱柱：150mm×4.6mmC18不锈钢柱，粒径5μm填充物；流动相：ψ （乙腈∶水）=55∶45；流速：1.0ml/min；检测波长：215nm；进样体积：5.0μm；保留时间约7.0min。

1.3 溶液配制

标样溶液的制备：称取咯菌腈标样0.01 g（精确至0.000 2 g），置于50ml容量瓶中，加乙腈使之溶解并稀释至刻度，摇匀，冷却至室温。样品溶液的制备：称取试样0.01 g（精确至0.000 2 g），置于50mL容量瓶中，加乙腈使之溶解并稀释至刻度，摇匀，冷却至室温。

1.4 测定及计算

在上述色谱操作条件下，待仪器稳定后，连续进数针标准溶液，直至相邻两针的响应值的变化不大于1.5%时，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。试样中咯菌腈的质量分数X1(%)，按下公式计算：

式中：A1—标样溶液中，咯菌腈的峰面积；A2—试样溶液中，咯菌腈的峰面积；m1—标样的质量，g；m2—试样的质量，g；p—标样中咯菌腈的质量分数，%；f—校正因子。

2 结果与讨论

2.1 色谱条件的选择

通过对五批咯菌腈原药的光谱数据进行采集，获得其紫外最大吸收波长平均值为215 nm，紫外吸收光谱图谱特征符合咯菌腈的结构。标样及样品的高效液相色谱图 1，图 2。

表1 咯菌腈线性关系测定结果 (标样含量99.5%)

图1 咯菌腈标样的高效液相色谱

图2 咯菌腈原药的高效液相色谱

2.2 方法的线性相关性测定

按咯菌腈测定时标样浓度的0.6～6.8倍配制6个标样溶液，进行液相色谱测定，经计算得峰面积值，其结果见表1。

以质量浓度为横坐标，其响应值为纵坐标，测试方法的线性相关性，得到咯菌腈原药的线性方程为A=247.13X*106，R2=1，呈良好的线性关系。

2.3 方法的精密度测定

对同一批咯菌腈原药试样中咯菌腈成分进行了6次平行测定，精密度分析变异系数为0.61%。

2.4 方法的准确度测定

准确称取已知咯菌腈含量的原药样品若干，分别加入一定量的咯菌腈标样，配成5个已知样，测定每个样品的咯菌腈总质量并计算回收率，其值在100.08%～101.94%之间。

3 结论

该次试验用上述方法对5批咯菌腈原药试样进行了两次平行测定，由试验结果可以看出，当咯菌腈测定的范围为 0.006～0.068 g时，峰面积比与质量呈良好的线性关系；精密度分析变异系数为0.61%；准确度测定回收率在100.08%～101.94%之间，保留时间7.031 min，保留时间相对偏差0.01%。该文的分析方法快速简便且分离效果好，具有较高的精密度和准确度，线性关系良好，保留时间较短，是比较理想的测定咯菌腈含量方法。

[1]闫潇敏,宁斌科,王列平,张媛媛,新型杀菌剂氟咯菌腈及其研究开发进展.世界农药,2010～03

[2]吴进龙,胡琴,陈铁春,50g/L咯菌腈·苯醚甲环唑悬浮剂高效液相色谱分析.农药,2008～11