复方瓜子金苦味物质矫味研究

★ 何华山 刘旭海 余银芳 (.国家知识产权局专利局专利审查协作江苏中心 江苏 苏州5000;.江中药业股份有限公司 南昌330096)

复方瓜子金含片是由瓜子金、大青叶、白花蛇舌草、野菊花、紫花地丁及海金沙六味中药所制成的复方制剂。具有清热利咽，散结止痛，祛痰止咳之功效;用于风热袭肺或痰热雍肺所致的咽部红肿、咽痛、发热、咳嗽，急性咽炎、慢性咽炎急性发作及上呼吸道感染见上述证侯者［1］。原制剂味苦、口感差，不利于口含服用，致使患者依从性差。本课题运用现代制药技术，对本品的制剂工艺进行了改进，确定了最佳矫味工艺。

1 仪器与试药

Agilent 1200/1100高效液相色谱仪(自动进样器，DAD检测器);UV-1206紫外分光光度计(日本SHIMADZU);瓜子金、大青叶、白花蛇舌草等六味药材(安徽省亳州市中信中药饮片厂)，经江西中医药大学中药鉴定教研室范崔生教授鉴定其来源，经检测符合《中华人民共和国药典》2010年版一部有关各项规定)。

2 方法与结果

2.1 苦味溯源研究 复方瓜子金含片由瓜子金、大青叶、白花蛇舌草、野菊花、紫花地丁及海金沙6味药组成，味道极苦，采用单纯的矫味方法并不能掩去苦味。因此，本实验首先对复方苦味来源进行追踪，以明确苦味来源，从而对苦味药材采用有针对性方法进行矫味。

按复方处方量分别称取瓜子金37.5g、大青叶87.5g、白花蛇舌草62.5g、野菊花62.5g、紫花地丁50g及海金沙50g，分别置于6个圆底烧瓶中，加8倍量60%乙醇回流提取2次，每次1.5h，合并提取液，过滤，回收乙醇，按处方比例进行浓缩，静置冷却至室温。由于人类对香、甜、淡、苦等口感的分辨力极强，仅需对提取液进行简单口尝即能分辨各药物的口感，因此将各药物提取液经10名志愿者口尝即可鉴定苦味来源。结果见表1。

表1 苦味溯源考察结果表

从考察结果中可看出，复方瓜子金含片的苦味主要来自野菊花。其他5味药材单提液，则味淡，苦味轻。因此，可将野菊花单独提取，对野菊花提取物进行掩味［2］，另将瓜子金、大青叶、白花蛇舌草、紫花地丁及海金沙5味药材合提。

2.2 野菊花提取物矫味工艺研究

2.2.1 矫味方法的选择 目前，苦味抑制方法多样，但就其矫味机理，主要有以下几点:1、对苦味进行掩盖，如加入甜味剂等;2、对味蕾进行麻痹，如加入薄荷脑，柠檬酸等;3、降低苦味物质在唾液中的溶解度，如对苦味物质进行包衣，或者制成微囊等;4、改变苦味物质的物理化学形态，如包合法利用苦味物质进入β-环糊精的空穴结构内，从而掩盖苦味［2］。由于复方瓜子金含片是一类用于局部治疗咽炎的制剂，要求药物能够在口腔内部释放，从而发挥药效，而包衣法制备的片剂在溶化完包衣层之后，苦味依然存在，因此不采用包衣法矫味。

由于人们对苦味的分离阈是极低的，即使微摩尔也可被感觉到，为使矫味实验更为精准，将口感指标分为4级，“-”表示口感较差，苦味较浓，难以忍受;“+”表示口感一般，感受到苦味，不想忍受;“++”表示口感较好，感受到苦味，可以忍受;“+++”表示口感好，没有任何苦味。

本实验以口感为考察指标，对矫味剂法、麻醉味蕾法、包合法进行筛选，方法如下:

(1)矫味剂法:取药粉适量(过100目筛)，选用常用的矫味剂蔗糖、蛋白糖、三氯蔗糖、乳糖、安赛蜜、阿斯巴甜进行筛选。试验方法:分别按常量加入以上六种矫味剂，经10名志愿者口尝，反复调节用量，进行筛选。

(2)麻痹味蕾法:取药粉适量(过100目筛)，选用薄荷脑、柠檬酸作为麻痹剂，分别按常量加入2种麻痹剂，经10名志愿者口尝，反复调节用量，进行筛选。

(3)包合法:取药粉适量(过100目筛)，按一定方法制备总黄酮含量确切的包合物，经10名志愿者口尝，反复调节用量，进行筛选。

试验结果见表2。

表2 野菊花提取物矫味方法考察结果表

结果表明，包合法对野菊花提取物的矫味作用效果较好，这是因为野菊花提取物进入β-环糊精的空穴结构内，改变了其物理化学形态，苦味得到很好的改善;相比于口含包衣制剂由于包衣层溶化而直接暴露药物成分，导致矫味效果差的缺点，包合法由于能够改变野菊花提取物的物理化学形态，从而能够达到改善苦味和使有效成分在口腔内部进行吸收的双重效果。而矫味剂及味蕾麻痹剂对野菊花的矫味作用并不明显，原因是人们对苦味的分离阈是极低的，即使微摩尔也可被感觉到，而且苦味的感觉也比甜味持续的时间长，单纯的矫味剂并不能掩盖野菊花提取物的苦味。因此，本研究采用包合法对野菊花提取物苦味进行掩盖。

2.2.2 包合物制备方法考察 包合物的制备方法有饱和水溶液法、超声法、胶体磨法、冷冻干燥法、喷雾干燥法等。本研究根据现有生产设备及实验条件，对饱和水溶液法和胶体磨法进行比较。

(1)饱和水溶液法［3］取β-环糊精8g加100mL蒸馏水，水浴加热使其溶解，降至50℃时，加入1g野菊花提取物(野菊花提取物溶于适量60%乙醇中)，用磁力搅拌器搅拌3h，冷藏24h，抽滤，沉淀物于60℃干燥，收集包合物。

(2)胶体磨法［4］取β-环糊精8g加10mL蒸馏水，研磨使之成糊状物，称取1g野菊花提取物，于胶体磨中研磨30min，冷藏24h，抽滤，沉淀物于60℃干燥，收集包合物。

将上述两种方法制得的包合物进行比较，测定其包合物收得率、总黄酮包合率，结果见表3。结果表明:胶体磨法法制备包合物，包合物得率与包合率均比饱和水溶液法高，这主要是因为在饱和水溶液包合过程中，由于用水量较大，野菊花提取物的水溶性较大，导致总黄酮不易进入β-环糊精的环状中空圆筒型的结构中，使得包合率及包合物收得率低于胶体磨法。因此，本研究确定采用胶体磨法法对野菊花提取物进行包合。

表3 两种野菊花提取物包合方法的比较

2.2.3 胶体磨法包合工艺条件的优化 (1)β-环糊精与野菊花提取物的比例

分别称取β-环糊精6，8，10，12g四份，置研钵中，分别加入等量蒸馏水，即6，8，10，12mL，研磨使之成糊状物。精密加入1g野菊花提取物，继续研磨40min，冷藏放置24h，抽滤，抽干，再分别用5mL蒸馏水洗涤包合物，收集滤渣，置60℃烘箱中烘干，称重并按测定法测定总黄酮含量。分别计算总黄酮收得率和包合物收得率，结果见表4。结果表明:随着β-环糊精与野菊花提取物的配比的升高，总黄酮的包合率及包合物收得率变化呈现出抛物线走向，原因是随着β-环糊精的量的增加，野菊花提取物包合越完全，但当β-环糊精与野菊花提取物的配比到达8倍时，基本包合完全，再随着β-环糊精的增加，已经没有野菊花提取物进入β-环糊精空腔中。因此，本研究确定β-环糊精与野菊花提取物的配比为8∶1。

表4 β-环糊精与野菊花提取物的配比的考察

(2)加水量的考察

称取β-环糊精8g四份置研钵中，按配比为0.8，1，1.2，1.5，分别加入6.4，8，9.6，12mL蒸馏水，研磨使之成糊状物。精密加入1g野菊花提取物，继续研磨40min，5℃冰箱中放置24h，抽滤，抽干，再分别用5mL蒸馏水洗涤包合物，收集滤渣，置60℃烘箱中烘干，称重并按测定法进行紫外-可见分光光度法测定总黄酮含量。分别计算总黄酮收得率和包合物收得率，结果见表5。结果表明:包合物收得率随着加水量的增加而缓慢降低，原因是加水量的增加使更多的包合物溶解于水中;而总黄酮包合率呈现出抛物线走向，到β-环糊精:水为1∶1时，包合率最高，达到77.31%，因此本研究确定β-环糊精与水比例为1∶1。

表5 包合加水量的考察

(3)包合时间考察

称取β-环糊精8g四份，加8mL蒸馏水，研磨使之成糊状物，分别称取1g野菊花提取物，于胶体磨中分别研磨40，50，60，70min，冷藏放置24h，抽滤，抽干，再分别用5mL蒸馏水洗涤包合物，收集滤渣，置60℃烘箱中烘干，称重并按测定法进行紫外-可见分光光度法测定总黄酮含量。分别计算总黄酮收得率和包合物收得率。结果见表6。结果表明:随着包合时间的增加，野菊花提取物包合率和包合物收得率两项指标都有一定的提高，但当包合时间达到60min后，包合率和包合物收得率基本趋于稳定。因此，确定野菊花提取物包合工艺包合时间为60min。

(4)结论

通过对野菊花提取物包合工艺的主要影响因素β-环糊精与野菊花提取物的配比、包合温度以及包合时间三者进行单因素考察，确定野菊花提取物包合工艺最佳条件为:β-环糊精:野菊花提取物(g∶g)=8∶1、β-环糊精:水(g∶mL)=1∶1、包合时间为60min。

表6 包合时间的考察

2.2.4 野菊花提取物包合工艺验证试验 为考察该野菊花提取物包合工艺的稳定性，进行3次平行试验，结果见表7。结果表明:由上表可知，野菊花提取物包合率和包合物收得率两项指标都较稳定，两者RSD＜3%。因此，表明该野菊花提取物包合工艺稳定可行。所得野菊花包合物口感好，完全去除了原野菊花的苦味。

表7 包合工艺验证试验(n=3)

2.3 含片制剂 以甘露醇为填充剂、阿斯巴甜为甜味剂、薄荷脑为清凉剂、硬脂酸镁为润滑剂、30%乙醇溶液为润湿剂，混以野菊花包合物和其余五味药物浸膏粉，制备得到的复方瓜子金含片很好的掩盖了含片中的苦味，具有口感好，便于服用的特点。

3 讨论

本研究首先对处方中六味药材进行苦味溯源，发现其苦味主要来自野菊花，因此将野菊花另提处理，提取物经精制后，采用β-环糊精对野菊花提取物进行包合，野菊花提取物经包合后，能够掩盖野菊花浓烈的苦味，使矫味工艺易于进行，改善含片口感，提升产品品质。

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