血清IL-17与MMP-9在过敏性紫癜中的临床意义

曾嵘

血清IL-17与MMP-9在过敏性紫癜中的临床意义

曾嵘

【摘要】目的观察过敏性紫癜(HSP)患儿血清白介素-17(IL-17)与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平的变化，探讨其在HSP发病机制中的作用。方法30例健康儿童为对照组，92例初发HSP患儿按尿常规结果分为HSP组(68例)和HSPN组(24例)，将68例HSP患儿依据临床表现分为单纯型、关节型、腹型及混合型。采用酶联免疫法检测两组患儿血清IL-17和MMP-9的水平，采用透射免疫比浊法检测胱抑素C(CysC)，分析血清IL-17与MMP-9相关性，及其IL-17、MMP-9与CysC的相关性。结果2组患儿急性期IL-17、MMP-9和CysC高于对照组(P＜0.05) ; HSPN组急性期患儿IL-17、MMP-9和CysC高于HSP组(P＜0.05) ; HSP组各型之间IL-17水平差异无统计学意义(P＞0.05) ; HSP组中混合型MMP-9水平高于单纯型、关节型和腹型(P＜0.05) ;单纯型、关节型、腹型MMP-9水平差异无统计学意义(P＞0.05) ;经相关分析，HSP急性期患儿IL-17、MMP-9水平分别与CysC呈显著正相关(P＜0.01) ; HSP急性期患儿IL-17水平与MMP-9水平呈显著正相关(P＜0.05) ; 2组患儿恢复期IL-17和MMP-9水平仍然高于对照组(P＜0.05) ; HSPN组患儿恢复期IL-17和MMP-9水平仍然高于HSP组(P＜0.05)。结论IL-17和MMP-9可能参与HSP急性期血管内皮细胞炎性以及肾脏损伤的机制，对HSP早期诊断具有良好的临床价值。

【关键词】过敏性紫癜;白介素-17;基质金属蛋白酶-9;儿童

作者单位: 644000四川省宜宾市第一人民医院儿科

过敏性紫癜(HSP)是儿童时期常见的一种免疫介导的全身性血管炎性疾病，是否合并肾脏受累，直接影响HSP的预后。其发病机制目前尚不明确，大量研究显示HSP的发病机制主要为体液及细胞免疫的异常，凝血与纤溶紊乱，基因多态性改变，炎性介质的参与，同时细胞因子也发挥着重要作用。白细胞介素-17 (IL-17)是一种前炎性细胞因子，在多种免疫性血管炎性疾病中发挥着重要作用。基质金属蛋白酶(MMPs)是一组钙、锌离子依赖性蛋白水解酶，MMP-9是其中一员，MMP-9是降解Ⅳ型胶原最主要的酶，在调节基质降解方面发挥着重要作用。本研究探讨HSP急性期患儿血清IL-17、MMP-9变化，分析两者相关性，了解IL-17、MMP-9在HSP中的发病机制，从而为HSP患儿肾损害的诊断、及时治疗和预后提供理论依据。

1　资料与方法

1.1一般资料2011年8月至2014年7月我院儿科收治的HSP患儿92例，均符合HSP诊断标准［1］。男52例，女40例;年龄3～15岁，平均年龄(7.69±2.82)岁。均为初次发病，并且在1周内未用过糖皮质激素及免疫抑制剂，并排除其他自身免疫性疾病及过敏性疾病史。将92例初发HSP患儿按尿常规结果分为HSP组68例和HSPN组(尿蛋白含量＞150 mg/d 或100 mg/L，定性试验阳性;尿镜检红细胞＞3个/HP) 24例。将68例无肾损害的HSP患儿依据临床表现分为单纯型15例、关节型16例、腹型19例和混合型18例。对照组为同期健康查体的儿童30例。2组患儿年龄、性别比与分布差异无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

1.2治疗方法2组患儿入院后均予以维生素C 1～2 g/d静脉滴注7 d;西咪替丁每次10 mg/kg，2次/d静脉滴注7 d;芦丁片20 mg/d，分3次口服; 10%葡萄糖酸钙1 ml·kg－1·d－1静脉滴注7 d;低分子肝素钙60～80 μg·kg－1·d－1皮下注射，连续2周。另给予口服孟鲁司特抗过敏，有临床感染症状表现者予以抗感染治疗，关节肿痛严重者加用琥珀氢化可的松5～10 mg·kg－1·d－1静脉滴注7 d。

1.3检测方法2组患儿于入院第1天和恢复期分别采集外周静脉血3 ml注入干净试管，室温凝固20 min，离心1 000 r 15 min，收集血清，分装后－20℃冷冻保存。采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测IL-17和MMP-9;采用乳胶颗粒增强透射免疫比浊法检测CysC，试剂盒均购自上海恒远公司。

1.4统计学分析应用SPSS 19.0统计软件，计量资料以±s表示，采用t检验，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.12组IL-17、MMP-9和CysC检测结果比较2组患儿急性期血清IL-17、MMP-9和CysC高于对照组，2组差异有统计学意义(P＜0.05) ; HSPN组急性期患儿血清IL-17、MMP-9和CysC高于HSP组，2组差异有计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1　3组IL-17、MMP-9和CysC检测结果比较　±s

表1　3组IL-17、MMP-9和CysC检测结果比较　±s

组别　IL-17(pg/ml)　MMP-9(ng/ml)　CysC(mg/L) HSP组(n=68)85±33　177±87　1.31±0.51对照组(n=30)　59±13　94±32　0.69±0.21 F值36.75　47.61　29.28 P值　＜0.05　＜0.05　＜0.05

2.2HSP组各型之间IL-17、MMP-9检测结果比较HSP组各型之间IL-17水平差异无统计学意义(P＞ 0.05) ; HSP组中混合型MMP-9水平高于单纯型、关节型和腹型，差异有统计学意义(P＜0.05) ;单纯型、关节型、腹型MMP-9水平差异无统计学意义(P＞0.05)。见表2。

表2　HSP组各型之间IL-17、MMP-9检测结果比较　±s

表2　HSP组各型之间IL-17、MMP-9检测结果比较　±s

类别　IL-17(pg/ml)　MMP-9(ng/ml)单纯型(n=15)79±23　163±61腹型(n=19)　85±29　174±67关节型(n=16)　82±25　173±79混合型(n=18)　88±32　190±81 F值1.98　5.68 P值　＞0.05　＜0.05

2.3HSP急性期患儿血清IL-17、MMP-9与胱抑素相关性分析HSP急性期患儿血清IL-17水平与胱抑素呈显著正相关(r=0.68，P＜0.01) ; HSP急性期患儿血清MMP-9水平与胱抑素呈显著正相关(r=0.57，P＜0.01)。

2.4HSP急性期患儿血清IL-17与MMP-9相关性分析HSP急性期患儿血清IL-17水平与血清MMP-9水平呈显著正相关(r=0.76，P＜0.05)。

2.52组患儿治疗前后血清IL-17和MMP-9水平比较2组患儿经过抗炎、抗凝等综合治疗后，患儿病情好转出院，进入恢复期。2组患儿IL-17和MMP-9水平仍然高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05) ;两组患儿恢复期IL-17和MMP-9水平低于急性期，差异有统计学意义(P＜0.05) ; HSPN组患儿恢复期IL-17和MMP-9水平仍然高于HSP组，差异有统计学意义(P＜0.05)。见表3。

表3　2组患儿治疗前后血清IL-17、MMP-9检测结果比较±s

表3　2组患儿治疗前后血清IL-17、MMP-9检测结果比较±s

组别　IL-17(pg/ml)　MMP-9(ng/ml) HSPN急性期113±36　258±85恢复期　83±22　163±67 t值5.78　6.92 P值　＜0.05　＜0.05 HSP急性期85±33　177±87恢复期　67±10　112±46 t值4.75　5.19 P值　＜0.05　＜0.05对照组59±13　94±32

3　讨论

HSP是儿童时期常见的一种全身性小血管炎性疾病，常可累及皮肤、肌肉、关节、循环系统、神经系统、消化道和肾脏等多个脏器和系统［2］。HSPN是HSP患儿最常见的并发症，是导致终末期肾病的重要原因之一。肾脏受累的严重程度是决定HSP患儿远期预后的主要因素。目前大量的研究显示HSP及HSPN的发病机制主要为体液及细胞免疫的异常，凝血与纤溶紊乱，基因多态性改变，炎性介质的参与，同时细胞因子也发挥着重要作用，但其确切机制尚不明确，也没有有效的措施阻断HSP出现肾脏受累，因此，明确HSP发病机制，对预防HSPN的发生非常重要［3］。

IL-17是由CD4+辅助性T细胞—Th17细胞分泌的前炎性细胞因子，具有强大的促炎作用，是T细胞诱导的炎性反应的早期启动因素［4］。IL-17能生产多种促炎趋化和细胞因子，在多种急慢性炎症和自身免疫性疾病中起重要作用［5］。在急慢性炎症中，机体中会产生大量的IL-17，促进机体局部产生单核细胞趋化蛋白-1(MCPes-l)、白介素8(IL-8)等趋化因子，使单核细胞及其中性粒细胞增多; IL-17还通过刺激上皮细胞、内皮细胞、成纤维细胞等分泌白介素6(IL-6)和IL-8，促进局部炎症; IL-17还能诱导细胞表面的细胞间粘附分子(ICAM)的生成，协同肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素1等其他炎性细胞因子诱导炎症活性的基因表达，放大炎性效应［6］。因此，IL-17在局部组织炎症的发生和发展过程中起着促进作用。本研究对2组患儿检测血清IL-17水平。结果表明，HSP组和HSPN组急性期患儿血清IL-17水平高于对照组(P＜0.05) ; HSPN组急性期患儿血清IL-17水平高于HSP组(P ＜0.05)。HSP组各型之间IL-17水平差异无统计学意义(P＞0.05) ; 2组患儿恢复期IL-17水平仍然高于对照组(P＜0.05) ; HSPN组患儿恢复期IL-17水平仍然高于HSP组(P＜0.05)。结果表明在HSP急性期IL-17在血管炎性中发挥着重要作用，HSP各型之间IL-17参与的血管炎性反应程度并无轻重之分。

MMPs是一组钙、锌离子依赖性蛋白水解酶，对细胞外基质(ECM)有特异的降解作用。血管炎的主要病理改变是内皮屏障功能障碍，内皮屏障包括基膜(ECM)和内皮细胞。内皮ECM主要成分是Ⅳ型胶原，MMPs家族中的MMP-9是降解Ⅳ型胶原最主要的酶，MMP-9在调节基质降解方面发挥着重要的作用，促进白细胞渗出和迁移;通过降解ECM来破坏血管内皮屏障;还能通过增加内皮细胞的通透性，促使免疫细胞在血管内皮的黏附，促使炎性细胞因子的分泌，促进炎性反应的作用。因此，MMP-9在血管的损害中起着重要作用［7，8］。本研究对2组患儿急性期和恢复期检测血清MMP-9水平。结果表明，2组急性期患儿血清MMP-9高于对照组(P＜0.05) ; HSPN组急性期患儿血清MMP-9高于HSP组(P＜0.05)。HSP组各型中混合型MMP-9水平高于单纯型、关节型和腹型(P＜0.05) ;单纯型、关节型、腹型MMP-9水平差异无统计学意义(P＞0.05)。2组患儿恢复期MMP-9水平仍然高于对照组(P＜0.05) ; 2组患儿恢复期MMP-9水平低于急性期(P＜0.05) ; HSPN组患儿恢复期MMP-9水平仍然高于HSP组(P＜0.05)。结果表明在HSP过程中MMP-9对ECM的损伤在疾病早期已起作用，HSP各型中混合型HSP血管损伤更严重。相关研究报道类风湿性关节炎中IL-17可诱导外周血单核细胞MMP-9的生成，二者呈相关性［9］。在本研究中通过急性期患儿血清IL-17水平与MMP-9水平进行相关分析，呈显著正相关。结果表明证实MMP-9参与HSP血管炎性损伤，且与IL-17可能有协同作用。

胱抑素C(CysC)是一种低分子量非糖基化碱性蛋白质，其水平能反应肾小球滤过功能、肾小管的重吸收和分泌功能，是HSP早期诊断肾功能受损的敏感指标之一［10］。本研究通过HSP急性期患儿血清IL-17、MMP-9与胱抑素相关性分析，经直线相关分析表明，HSP急性期患儿血清IL-17水平与胱抑素呈显著正相关(r=0.68，P＜0.01) ; HSP急性期患儿血清MMP-9水平与胱抑素呈显著正相关(r=0.57，P＜0.01)。由此可见，血清IL-17与MMP-9也是较为理想的反映HSP肾脏早期损害的重要指标，对HSP患儿肾损害的诊断、及时治疗和预后具有重要意义。

参考文献

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9Draganv J，Johanne MP，Johan A，et al.Stimulation of 92-kd gela tinase (Matrix Metalloproteinase 9 ) productiaon by interleukin-17 inhuman monocyte/macrophages.Arthritis＆Rheumatism，2000，43: 1134-1144.

10赵巍，黄伟萍，谢丽冰.血胱抑素C对儿童过敏性紫癜肾功能评价的临床意义.实用医学杂志，2013，29: 1028.

(收稿日期:2014－07－10)

doi:10.3969/j.issn.1002－7386.2015.08.014

【文章编号】1002－7386(2015) 08－1166－03

【文献标识码】A

【中图分类号】R 554.6