广州市育龄人群地中海贫血和G6PD活性检测结果分析

刘丽红，屈艳霞，余建群，陈桂兰

(1.广州市白云区中医医院妇产科，广东 广州 510470；2.广州市人口和计划生育科学研究所优生遗传科，广东 广州 510410)

广州市育龄人群地中海贫血和G6PD活性检测结果分析

刘丽红1，屈艳霞2，余建群1，陈桂兰2

(1.广州市白云区中医医院妇产科，广东 广州 510470；2.广州市人口和计划生育科学研究所优生遗传科，广东 广州 510410)

目的 了解广州市育龄人群地中海贫血(地贫)和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症的检出率、地贫患者的G6PD活性、地贫与G6PD活性检测的相互影响。方法抽取21 628例受检者的静脉血，采用平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)进行地贫初筛，对初筛阳性者进行基因检测；采用酶速率法检测G6PD活性。结果①地贫的检出率为9.94%(2 149/21628)；② G6PD缺乏症的检出率为7.96%(1 721/21 628)，男、女性别比例为1.96:1；③地贫组(除α-地贫2组)与非地贫组比较，G6PD活性均有不同程度的升高；各种类型地贫组之间G6PD活性增高水平比较，差异有统计学意义(P＜0.05)；④地贫基因携带合并G6PD缺乏者的MCV、M CH高于地贫基因携带G6PD正常者，差异有统计学意义(P＜0.05)。结论本地区是地贫和G6PD缺乏症的高发区；G6PD活性增高的程度不同可作为不同类型地贫的辅助诊断参考指标；G6PD缺乏可影响MCV、MCH筛查地贫的敏感性。

广州；地中海贫血；G6PD缺乏症；G6PD活性

地中海贫血(简称地贫)是由于珠蛋白基因缺失或缺陷使珠蛋白链合成受到部分或完全抑制而引起的一组遗传性溶血性贫血，主要包括α-地贫和β-地贫两大类。葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症(简称G6PD缺乏症)是由于G6PD基因发生突变而引起的一种X连锁不完全显性遗传性溶血性酶缺陷性疾病。广东省是地贫和G6PD缺乏症高发区，发生率分别为15.83%[1]和10%[2]，这两类基因携带者之间婚配即存在出生G6PD缺乏症合并地贫后代的可能性。为了了解广州市地贫和G6PD缺乏症的检出率、地贫患者的G6PD活性及两者之间的关系，探讨临床检测中地贫和G6PD活性检测的相互影响，笔者总结了近几年来在本院行孕期检查或优生遗传咨询者的地贫和G6PD活性检测结果，分析如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2012年1月至2015年1月在我院门诊行孕期检查或优生遗传咨询的孕妇及其配偶，共筛查21 628例，女性平均年龄(23.35±3.28)岁，男性平均年龄(25.46±3.69)岁。

1.2 方法

1.2.1 地贫初筛 取外周血2～4 ml，乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝，应用五分类全自动血常规分析仪进行血液学检测，检测血红蛋白(Hb)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)等，MCV≤82 fl和/或MCH≤26 pg为筛查阳性。

1.2.2 地贫基因检测 将地贫初筛阳性的血样送上级医疗机构进一步检查确诊，主要检测3种缺失型α-地贫基因突变类型(--SEA，-α3.7，-α4.2)、3种常见非缺失型α-地贫基因突变类型(αCS，αQS和αWS)和17种β-地贫常见突变类型(CD41-42、CD71-72、CD17、-28、CD26、IVS-II-654、IVS-I-1、IVS-I-5、CD43、CD31、CD27/28、-32、-29、CD30、CD14-15、CAP和Int)。

1.2.3 G6PD活性测定 应用全自动生化分析仪采用酶速率法检测，G6PD活性成人参考值为1 300～3 600 U/L，＜1 300 U/L为G6PD缺乏，＞3 600 U/L为活性增高。

1.3 统计学方法 应用SPSS16.0统计软件进行数据分析，计量数据以均数±标准差(±s)表示，多组间均数比较采用单因素方差分析，两组间均数比较采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 地贫基因检测结果 21 628例受检者中经MCV和MCH筛查表型阳性者2 578例，阳性率为11.92%。2 578例地贫表型阳性个体经基因检测确诊地贫携带者2 149例，其中α-地贫携带者1 508例，β-地贫携带者552例，αβ复合型地贫携带者89例，携带率分别为6.97%、2.55%、0.41%。

2.2 G6PD活性测定结果 21 628例受检者中，G6PD活性低于1 300 U/L者1721例，检出率为7.96%，其中男性1139例，女性582例，男、女性别比例为1.96:1。

2.3 地贫复合G6PD缺乏症检测结果 在2 149例地贫患者中共检出G6PD缺乏症167例，地贫合并G6PD缺乏症者的发生率为0.77%(167/21 628)，占地贫携带者的7.77%(167/2 149)。167例地贫合并G6PD缺乏症患者的基因突变类型及G6PD活性检测结果见表1。

表1 167例地贫合并G6PD缺乏症患者的基因突变类型及G6PD活性检测结果(例，±s)

表1 167例地贫合并G6PD缺乏症患者的基因突变类型及G6PD活性检测结果(例，±s)

组别α-地贫1α-地贫2β-地贫杂合子αβ复合型地贫男性67 19 22 4女性31 10 12 2合计98 29 34 6构成比(%) 58.68 17.37 20.36 3.59 G6PD活性(U/L) 335±326 113±58 197±366 162±179

2.4 地贫对G6PD活性检测的影响 根据地贫基因诊断结果分为4组，经单因素方差分析，α-地贫1、α-地贫2、β-地贫杂合子、αβ复合型地贫的G6PD活性进行比较，差异有统计学意义(P＜0.05)；各种类型地贫组与非地贫组比较，除α-地贫2组外，其余三组的G6PD活性均有不同程度的升高，差异有统计学意义(P＜0.05)，见表2。

表2 地贫组与非地贫组G6PD活性比较(±s)

表2 地贫组与非地贫组G6PD活性比较(±s)

注：ta，e=21.81，P＜0.05；tb,e=0.72，P＞0.05；tc,e=23.65，P＜0.05；td,e=11.67，P＜0.05；Fa,b,c,d=221.74，P＜0.05。

组别α-地贫1aα-地贫2bβ-地贫杂合子cαβ复合型地贫d非地贫组eG6PD活性(U/L) 3135.27±432.16 2516.43±501.33 3589.23±542.21 3208.68±493.66 2396.47±323.17例数1010 299 350 62 200构成比(%) 58.69 17.37 20.34 3.60

2.5 G6PD缺乏症对地贫检测结果的影响 分别在单纯地贫携带者、单纯G6PD缺乏症者及正常人中随机抽取167例，与地贫合并G6PD缺乏组进行比较。167例地贫合并G6PD缺乏症患者与单纯地贫携带者比较，MCV和MCH高于无合并G6PD缺乏症者的地贫携带者(P＜0.05)；单纯G6PD缺乏症者血液学参数与非地贫且G6PD正常组，MCV和MCH比较差异无统计学意义(P＞0.05)。G6PD缺乏组与G6PD正常组的地贫携带者的MCV、MCH比较见表3。

表3 G6PD缺乏组与G6PD正常组的地贫携带者的MCV、MCH比较(±s)

表3 G6PD缺乏组与G6PD正常组的地贫携带者的MCV、MCH比较(±s)

注：tA(a,b)=8.28，P＜0.05；tB(a,b)=12.31，P＜0.05；tA(c,d)=5.83，P＞0.05；tB(c,d)=3.19，P＞0.05。

MCH(pg)B24.54±3.06 21.69±3.15 30.05±1.17 29.30±1.09组别地贫合并G6PD缺乏组a单纯地贫组b单纯G6PD缺乏组c非地贫且G6PD正常组d例数167 167 167 167 MCV(fl)A75.99±6.39 65.95±2.43 91.23±2.64 89.28±2.19

3 讨 论

地贫是世界上最常见和发病率最高的单基因遗传病，全球携带该突变基因的人约1.8亿[3]。迄今，地贫尚无理想的根治方法，开展地贫产前筛查和产前基因诊断，可以防止新的受累胎儿出生，也是目前控制地贫最为有效的措施。G6PD缺乏症平时一般无症状，对生命无影响，但在吃蚕豆或伯氨喹啉等药物后可发生急性溶血，表现为贫血、黄疸、血色尿等，该病对优生的危害在于易发生新生儿病理性黄疸，重者发展为核黄疸，导致死亡或者终身智力残疾[4]。

在筛查的21 628例个体中，经基因检测确诊地贫携带者2 149例，地贫的检出率为9.10%(2 149/21 628)，比以往的报道[1，5]略低，说明地贫在各地区之间的发生率一定差异，也可能与本地区有较多的外来人口有关；G6PD缺乏症的检出率为7.96%(1 721/21 628)，男、女性别比例为1.96:1。G6PD缺乏症男性明显多于女性，可能是因为男性只有一条X染色体，当G6PD基因突变时，酶活性表现为显著缺乏；女性有两条X染色体，当其中一条X染色体的G6PD基因突变时，而另一条X染色体正常时，就在体内形成两类红细胞的“嵌合体”，导致女性杂合子的G6PD活性从严重缺乏到正常参考值范围变动[6-8]；地贫合并G6PD缺乏症者的发生率为0.77%(167/21 628)，占地贫携带者的7.77%(167/2 149)。

地贫患者的G6PD活性均有不同程度的升高，β-地贫、αβ复合型地贫与α-地贫1的G6PD活性分别约是正常人的1.5～2.0倍、1.0～1.5倍。α-地贫1、β-地贫杂合子、αβ复合型地贫的G6PD活性与非地贫组比较差异均有统计学意义(P＜0.05)。地贫患者的G6PD活性增高可能与体内新生红细胞增多有关，地贫患者体内慢性溶血刺激机体代偿产生较多的新生年轻红细胞，而G6PD酶是红细胞年龄依赖酶，新生的红细胞中G6PD活性较高[9]。G6PD缺乏症合并地贫时，G6PD活性结果往往会受到一定的影响，从而导致漏检，特别是女性杂合子，此时需要进行家系分析或者基因检测确诊[10]。

G6PD缺乏症对地贫的检测结果亦有一定影响，地贫基因携带合并G6PD缺乏者的MCV、MCH高于地贫基因携带G6PD正常者。本研究中的167例地贫合并G6PD缺乏症患者与单纯地贫携带者比较，MCV和MCH高于无合并G6PD缺乏症的地贫患者(P＜0.05)，与覃婷等[11]的报道一致。因此，仅依靠MCV、MCH进行地贫筛查可能会造成漏诊，应参考受检者的G6PD检测结果，并联合血红蛋白电泳或高效液相色谱技术进行地贫检测，以提高地贫的检出率。

广州作为地贫和G6PD缺乏症的高发地区，地贫合并G6PD缺乏的情况并不少见，而在临床检测中两者之间存在相互影响，容易造成误诊和漏诊。做好育龄人群的筛查工作，对减少因G6PD缺陷而造成的新生儿黄疸、核黄疸甚至死亡的发生有重要意义。同时，对G6PD增高者做进一步的地贫确诊，可以提高地贫检出率。

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[11]覃 婷,赵 林,许莉莉.G6PD缺乏对地中海贫血产前筛查血液学指标的影响[J].中国临床新医学,2011,4(4):311-313.

Analysis of thalassemia and G6PD activity in people of childbearing age.

LIU Li-hong1,QU Yan-xia2,YU Jian-qun1, CHEN Gui-lan2.1.Department of Obstetrics and Gynecology,Guangzhou Baiyun Hospital of Traditional Chinese Medicine,Guangzhou 510470,Guangdong,CHINA;2.Department of Birth Health&Heredity,Guangzhou Institute of Population and Family Planning,Guangzhou 510410,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo explore the incidence of thalassemia and glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD)deficiency,the G6PD activity of patients with thalassemia,and the interaction between thalassemia and G6PD activity.MethodsA total of 21 628 people were screened for thalassemia by mean corpuscular volume(MCV) and mean corpuscular hemoglobin(MCH).The people with positive results then underwent thalassemia gene test. The G6PD activities were detected by enzyme kinetic method.ResultsThe incidence of thalassemia was 9.94% (2 149/21 628),and the incidence of G6PD deficiency was 7.96%(1 721/21 628),with male to female ratio of 1.96:1. Compared with non-thalassemia group,the G6PD activities of thalassemia groups all increased significantly,except theα-thalassemia group 2.The increase in G6PD activity showed statistically significant differences between the thalassemia groups(P＜0.05).The people of thalassemia gene complicated with G6PD deficiency had significantly higher MCV and MCH than those of thalassemia gene with normal G6PD activity(P＜0.05).ConclusionBaiyun District of Guangzhou has a high incidence of thalassemia and G6PD deficiency.The increase degree of G6PD activity can be used as reference for the auxiliary diagnosis of thalassemia.G6PD deficiency can influence the sensibility of MCV and MCH in thalassemia screening.

Guangzhou;Thalassemia;G6PD deficiency;G6PD activity

R556

A

1003—6350（2015）23—3500—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.23.1267

2015-06-17)

广东省计生委基金项目(编号：2010208、20132031、20133081)

屈艳霞。E-mail：451392492@qq.com