罗格列酮对脓毒症大鼠凝血功能的影响

周灵芝，康婷，高顺利(南华大学附属第一医院，湖南衡阳421001)

罗格列酮对脓毒症大鼠凝血功能的影响

周灵芝，康婷，高顺利
(南华大学附属第一医院，湖南衡阳421001)

摘要:目的观察脓毒症大鼠应用罗格列酮后凝血功能指标的变化，为脓毒症的药物治疗提供新的思路。方法将48只SD大鼠随机分为A、B、C组各16只，A、B组行盲肠结扎穿孔术建立脓毒症大鼠模型，C组开腹仅暴露盲肠、不行盲肠结扎穿孔术。术后B组大鼠尾静脉注射罗格列酮，其余两组注射等量生理盐水，观察各组术后不同时间点的凝血功能指标变化。结果术后24、48 h，A、B组PT、APTT、TT均较C组延长，A组较B组延长更明显(P均＜0.05) ; A、B组FIB、凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)较C组降低，以A组降低最为显著(P均＜0.05) ; A、B组纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)较C组明显升高，A组升高最为显著(P均＜0.05)。结论罗格列酮能够改善脓毒症大鼠凝血功能障碍。

关键词:脓毒症;罗格列酮;凝血功能;大鼠

脓毒症患者因炎症介质的“瀑布样”释放导致其凝血系统被激活，纤溶系统被不同程度抑制，血液出现高凝状态，导致微循环障碍［1，2］。研究发现，罗格列酮可通过抑制炎症介质的表达而减轻炎症反应，在脓毒症及缺血再灌注损伤发生过程中发挥抗炎作用［3，4］。2013年7月～2014年8月，本研究采用盲肠结扎穿孔法制造大鼠脓毒症模型，观察罗格列酮对脓毒症大鼠凝血功能的影响。现报告如下。

1　材料与方法

1.1动物分组及模型建立SD大鼠48只(南华大学实验动物部提供)，雌雄不拘，体质量250～300 g，均自由摄食、饮水;将其随机分为A、B、C组各16只。A、B组行盲肠结扎穿孔术，建立脓毒症大鼠模型; C组开腹，仅暴露盲肠，不行盲肠结扎穿孔术。术后B组大鼠于造模后0、12 h两次尾静脉注射罗格列酮(美国Cayman公司) 0.3 mg/kg。A、C组均注射等量生理盐水。

1.2凝血功能检测各组分别计划于造模后即刻(术后0 h)及罗格列酮或生理盐水注射后(术后) 12、24、48 h各取大鼠4只，取其颈动脉血，采用STA-R多功能凝血分析仪(法国思达高公司)检测凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、凝血酶时间(TT)、血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)及抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)。

1.3统计学方法采用SPSS17.0统计软件。计量资料用珋x±s表示，组间比较采用重复测量方差分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1脓毒症大鼠造模情况参照Remick［5］关于盲肠结扎穿孔术的手术方式及诊断标准，A、B组各16只大鼠术后12 h均出现摄食减少、发热症状，肛温平均增加1.5℃，呼吸频率较术前增加1倍，心率较术前增加50%，白细胞升高1倍以上，脓毒症大鼠模型均制作成功。C组术后12 h摄食基本正常，体温、心率、呼吸变化不明显，白细胞稍有上升，但较术前增加不到1倍。

2.2各组术后凝血指标比较术后0、12 h三组大鼠凝血功能指标比较差异无统计学意义(P＞0.05)。术后24、48 h，A、B组PT、APTT、TT均较C组延长，A组较B组延长更明显(P均＜0.05) ; A、B 组FIB水平较C组降低(P均＜0.05)，其中以B组降低明显(P＜0.05) ; A、B组PAI-1水平较C组升高(P均＜0.05)，其中A组升高明显(P＜0.05) ; A、B组AT-Ⅲ较C组降低(P＜0.05)，以A组降低明显(P＜0.05)。见表1。

表1　三组大鼠术后不同时间点凝血功能指标比较(±s)

注:与C组同时间点比较，*P＜0.05;与A组同时间点比较，△P＜0.05。

组别　n　PT(s)　APTT(s)　TT(s)　FIB(g/L)　PAI-1(ng/mL)　AT-Ⅲ(%) A 组术后0 h　4　8.12±1.13　30.21±1.29　20.12±2.31　5.13±0.71　30.23±2.39　110.71±5.51术后12 h　4　8.17±1.57　32.23±1.97　22.14±2.57　4.74±0.57　32.23±1.97　106.49±6.91术后24 h　4　15.25±2.31*　41.25±4.11*　33.25±4.11*　2.59±0.71*　57.22±4.19*　82.32±5.24*术后48 h　4　14.54±1.69*　43.63±3.27*　35.64±5.67*　2.24±0.74*　63.71±6.57*　80.70±5.37*B组术后0 h　4　8.63±1.21　31.37±1.47　21.63±2.41　5.61±0.49　31.27±2.46　112.27±5.46术后12 h　4　8.42±1.29　31.32±1.68　21.32±1.89　5.31±0.59　33.45±2.58　108.38±6.65术后24 h　4　12.29±2.04＊△　37.32±3.44＊△　28.31±3.04＊△　3.31±0.54＊△　51.32±5.61＊△　91.73±5.59＊△术后48 h　4　11.38±1.78＊△　38.73±3.56＊△　32.73±4.76＊△　3.76±0.66＊△　59.85±5.64＊△　103.85±6.48＊△C组术后0 h　4　8.39±1.35　30.91±1.83　20.39±2.15　5.30±0.55　30.27±2.43　110.27±6.93术后12 h　4　9.07±1.25　30.09±2.09　20.07±2.19　5.17±0.43　29.69±2.59　113.19±5.29术后24 h　4　8.86±1.43　30.14±1.97　20.86±1.94　5.86±0.71　31.14±2.44　113.41±5.74术后48 h　4　8.39±1.22　31.09±2.12　19.39±2.32　5.13±0.56　30.29±2.52　114.79±7.50

3　讨论

脓毒症时患者机体炎症介质和抗炎介质之间的平衡被打破，产生大量细胞因子和炎症介质且不断循环促进形成“瀑布样”释放，这些炎症介质可激活凝血系统导致凝血功能障碍［2，6］。罗格列酮属于噻唑烷二酮类，它通过与过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ结合，使PPARγ/RXRα发生空间构象改变，脱离辅抑制因子并结合辅激活因子，再通过与相应靶基因启动子上的聚对苯二甲酰对苯二胺(PPAE)结合，激活靶基因转录，启动细胞内级联信号途径发挥其作用。PPARγ活化后可以通过调控NF-κB和AP-1信号转导通路，在转录水平抑制TNF-α、IL-6的转录而发挥抗炎作用［7］。已有研究表明，罗格列酮及其类似物吡格列酮可减轻全身炎症反应症状、减少病变部位炎性细胞浸润及炎症因子的表达，从而在脓毒症、支气管哮喘、炎症性肠病等急慢性炎症反应中发挥抗炎作用［4，8～12］。

本研究中A、B组采用盲肠结扎穿孔术成功构建脓毒症大鼠模型，术后B组大鼠尾静脉注射罗格列酮，结果显示术后12 h脓毒症大鼠凝血功能尚无明显异常，术后24、48 h，A、B组PT、APTT、TT均较C组延长，但是A组较B组延长更明显; A、B组FIB、AT-Ⅲ较C组降低，以A组降低更显著; A、B组PAI-1较C组明显升高，以A组升高更显著。提示盲肠结扎穿孔导致脓毒症大鼠的凝血功能发生障碍，而罗格列酮对凝血功能障碍有改善作用。

凝血功能障碍是一个非常复杂的病理生理过程，包括炎症介质释放、血小板活化聚集、血管内皮损伤等一系列因素参与，其中炎症介质过度释放是凝血功能障碍的始动环节并贯穿整个过程［13］。本研究罗格列酮对脓毒症大鼠凝血功能障碍有改善作用，可能为罗格列酮的临床应用及脓毒症的药物治疗提供新的思路。但是，其具体作用机制还有待深入研究。

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(收稿日期:2014-11-26)

通信作者:周灵芝

文章编号:1002-266X(2015)21-0026-02

文献标志码:A

中图分类号:R631.2; R-322

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2015.21.009