宜宾地区女性感染人乳头瘤病毒状况分析

张立营 陈朴 龙琴 沈伟

宫颈癌是一种女性常见的生殖系统恶性疾病，且发病率高。目前普遍认为人乳头瘤病毒(human papilloma virus，HPV)是宫颈癌发生的主要危险因素之一［1］。HPV DNA检测早已被欧洲生殖道感染和肿瘤研究组织作为筛查宫颈癌的首选方法。HPV具有严格的组织特异性，主要感染人的皮肤或黏膜上皮细胞，引起相应部位发生病变。它主要通过性传播、母婴传播、直接皮肤接触等方式感染。现在HPV已有100多种基因型被人们所熟知，且不同型别导致宫颈上皮的病变不同。依据宫颈癌与HPV型别的关系高低将它分为低危型和高危型。低危型HPV常引起尖锐湿疣等良性病变;高危型HPV与宫颈癌前病变及宫颈癌有关。流行病学资料显示HPV亚型在不同地区、不同人群、不同年龄阶段分布具有一定的差异［2］。宜宾位于四川西南地区，为多民族聚集地，其生活方式、受教育水平及文化背景有显著的地域性特点，且目前对于该地区女性感染HPV的相关研究比较少。本研究通过对宜宾地区女性感染HPV亚型分布调查分析，希望为该地区HPV感染的诊治和宫颈癌的预防提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2013年3月至2014年9月来我院妇科、泌尿外科、皮肤性病科就诊的疑似HPV感染的4053名女性，进行宫颈脱落细胞标本HPV基因型别检测(多次检查者只取首次结果)，年龄18～65岁，平均年龄39.5岁。

1.2 仪器与试剂 基因扩增仪:QIAGEN Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪;核酸分子导流杂交仪、HPV-DNA提取试剂盒和HPV分型检测试剂盒均购自广东凯普生物科技有限公司。

1.3 方法

1.3.1 标本采集与保存:用HPV专用的宫颈刷采集宫颈脱落细胞标本，然后将宫颈刷放入专用细胞保存液的取样管中，拧紧管盖，尽快送检，若不能及时检测需置于－4℃冰箱保存，严格按照标准化操作说明进行。

1.3.2 标本检测:采用凯普公司的HPV-DNA提取与分子杂交系统对常见的21种HPV基因型［6、11、16、18、31、33、35、39、42、43、44、45、51、52、53、56、58、59、66、68、CP8304(81)］进行检测，严格按照仪器与试剂说明书操作。

1.3.3 判断标准:杂交膜上Biotin对照点与内控点同时出现蓝紫色圆点判断为实验有效。若杂交膜其它检测位点无蓝紫色圆点，则表示未出现感染;若杂交膜上其它检测位点出现一个蓝紫色圆点则表示HPV单一感染;若膜上出现两个或多个蓝紫色圆点，则表示HPV双重或多重感染。

1.4 统计学分析 应用SPSS 13.0统计软件，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HPV感染率及亚型分布情况 在4053例送检样本中检出阳性标本806例，阳性率为19.89%。在21种HPV基因型别中共检出18种HPV亚型，其中检出单一HPV亚型感染515例(12.71%)，其中低危型283 例(6.98%)，HPV6、11、42、43、44、CP8034 在单一HPV亚型感染中的检出率分别为21.91%、19.08%、12.72%、15.90%、17.31%、13.07%;高危型 232 例(5.72%)，HPV16、1 8、31、35、45、51、52、53、56、58、59、66在单一 HPV亚型感染中的检出率分别为18.10%、7.33%、6.47%、7.76%、9.05%、5.60%、14.66%、4.74%、7.33%、6.90%、7.76%、4.31%。感染两种及以上HPV亚型占7.18%(291/4053)。见表1。

2.2 HPV亚型混合感染分布情况 在806例HPV阳性标本中，HPV亚型混合感染标本291例，占总感染率的7.18%(291/4053)。其中双重感染者占混合感染的 53.61%(156/291)、三重感染占 31.96%(93/291)、四重感染占14.43%(42/291)。见表1。

表1 HPV亚型在单一感染和混合感染中的分布情况

2.3 女性感染HPV的年龄分布 将4053例女性患者分成5个年龄段加以分析，女性HPV筛查人群年龄多在36～45岁，45岁以后筛查人数逐渐减少。感染的人群分布以18～35岁年龄组为主，26～35岁年龄段HPV感染率达到高峰，45岁以后开始减少。35岁以下女性HPV感染率明显高于35岁以上女性，差异有统计学意义(χ2=63.95，P＜0.05)。见表2。

表2 4053名女性各年龄段HPV感染检出情况

2.4 HPV感染率与受教育程度关系 初中及以下学历女性HPV感染率为22.31%(593/2 658)，高中学历女性HPV感染率为16.45%(155/942)，大学及以上水平女性HPV感染率为12.80%(58/453)。受不同教育程度的女性人群的HPV感染率差异有统计学意义(χ2=31.03，P＜0.05)。

3 讨论

宫颈癌是全世界女性比较常见的恶性肿瘤之一。流行病学证实，HPV以性传播为主要传播途径，HPV感染与尖锐湿疣、乳头状瘤、宫颈癌前病变和宫颈癌等密切相关［3，4］。有文献报道，高危型HPV感染是宫颈癌前病变和宫颈癌的主要原因，99.7%的宫颈癌患者可检测出HPV病毒［5］。宫颈癌的发病要经历了一个漫长过程，有效的筛查及恰当的治疗完全有可能将其阻断在癌前病变早期阶段。HPV分型检测技术运用于临床宫颈癌的筛查，其具有灵敏度高、特异性强、可检测多重感染等优点，对于宫颈癌的早期发现、早期诊断及早期治疗具有重要的临床意义。

在女性人群中，HPV感染率在不同地区、不同人群HPV感染情况存在很大的差异。本研究发现宜宾地区受检的4053名女性人群中，HPV感染阳性人数806名，感染率为19.89%，高于世界女性人群的平均水平(10.4%)［6］，低于国内相关文献报道的感染率［7，8］。这可能与我们筛查的女性人群不同有关，因为宜宾地区为多民族聚集地，少数民族人口比例比较高，其生活方式、受教育水平及文化背景与其它地区略有不同。本实验在21种HPV亚型中共检测出18种亚型，感染类别以HPV单一型别感染为主，占12.71%(515/4053)，其中低危型占 54.95%(283/515)，主要以HPV6、11和 44为主;高危型占 45.05%(232/515)，主要以HPV16、18和52为主。感染两种及以上HPV亚型患者占7.18%(291/4053)。多亚型混合感染的增多，这主要与筛查人群健康意识比较薄弱有关。导致HPV多重感染的原因可能是同时感染不同HPV亚型，也可能是多次感染所引起。在混合感染中，以两重感染为主，常见的感染类型为 HPV6、11、16，18、52之间的混合感染。Lee等［9］研究发现单一HPV感染会使女性患宫颈癌的风险增加19.9倍，而混合感染会使该风险增加到31.8倍。

各地区女性HPV感染率不同除了与区域因素有关外，主要还与待检人群年龄段、教育程度、宿主免疫力、性生活状况和各种生活习惯等有关［10］。据相关文献报道，世界主要地区HPV感染高峰年龄段在34岁之前，35～44岁年龄段HPV的感染率逐渐降低［11］。本研究结果显示，不同年龄段HPV感染发生率明显不同，26～35岁年龄组阳性检出率最高，其次为18～25岁年龄组。35岁以下女性HPV感染率明显高于35岁以上女性，差异有统计学意义(χ2=63.95，P＜0.05)，与文献报道［12］大致相同。HPV 在年轻女性中感染率最高，这可能和年轻女性性生活状况与生活习惯有关。因此，加强女性特别是＜35岁的女性HPV普查工作，对宫颈癌的早期发现和早期治疗具有重要意义。

根据女性受教育程度的不同分类，本研究发现初中及以下学历女性人群感染率最高，高中学历女性人群次之，大学及以上文化水平女性HPV感染率最低。原因可能是文化程度越高，其居住环境、生活习惯、机体免疫力越强有关，还可能与其性行为、性伴侣数有关，引起女性HPV感染的因素很多，其中性行为是主要因素，如初次性交年龄、性伴侣个数、性交次数等。综上所述，不同地区、不同人群HPV存在感染率、感染的亚型、感染的年龄段等差异，针对不同的人群，需要了解该人群HPV感染特点。通过本次研究对于掌握本地区女性HPV感染的现状与HPV型别分布状态，预防尖锐湿疣、宫颈癌前病变和宫颈癌的发生具有重要的意义。

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