血清降钙素原检测在血液细菌感染中的作用

1 资料与方法

1.1 一般资料本院收治疑似血液细菌感染患者268例，其中男158例，女110例;血培养阳性者(阳性组)155 例，平均年龄(60.46 ±14.97)岁;血培养阴性者(阴性组)113 例，平均年龄(56.50 ±16.67)岁;正常健康查体者(对照组)51例，平均年龄(57.23±10.22)岁;3组年龄差异无统计学意义(P＞0.05)。培养阳性组均为不同部位两次或多次血培养阳性且为同一种细菌感染者，血培养阳性患者按菌种不同分为革兰阴性杆菌组(91例)和革兰阳性球菌组(64例)，根据出院诊断分为脓毒血症组(63例)和非脓毒血症组(92例)，培养阴性组为发热患者最终排除血液细菌感染者。

1.2 方法

1.2.1 标本采集:在患者高热寒战时及抗生素治疗前抽取静脉血10 ml注入血培养瓶中立刻送检，同时采集静脉血2 ml于乙二胺四乙酸K2抗凝管进行WBC计数和NLR测定，采集2 ml静脉血于干燥管，进行CRP测定，另外2 ml静脉血于干燥管静置1 h后3 000 r/min低温离心10 min(离心半径为17.5 cm)，提取血清后置－70℃冰箱保存，统一测定PCT。

1.2.2 主要试剂和仪器:所用主要试剂:全自动五分类细胞分析配套试剂购自希森美康生物科技(无锡)有限公司;血培养瓶、微生物鉴定卡片均购自法国梅里埃公司;PCT检测试剂购自广州万孚生物技术股份有限公司;CRP检测试剂购自日本关东化学株式会社。所用仪器:日本Sysemex XT-1800全自动五分类细胞分析仪;法国梅里埃公司Bace/Alert3D全自动血培养仪和VITEK-2 Compact微生物鉴定仪;广州万孚生物技术股份有限公司FS-112型免疫荧光检测仪;日立7180全自动生化分析仪。

1.2.3 血培养:放入血培养仪中的培养瓶阳性报警后转种于血平板、中国兰平板、巧克力平板，并进行涂片镜检，病原菌用VITEK-2 Compact鉴定。

1.2.4 PCT 测定:吸取 30 μl样本加入缓冲液中，将样本与缓冲液充分混匀1 min，吸取75 μl混匀后的样本，滴加到测试卡的加样孔中，在室温下放置15 min，将测试卡插入免疫荧光检测仪中的承载器中进行测试。

1.2.5 WBC和CRP检测:严格按照操作规程进行，NLR通过血常规中性粒细胞与淋巴细胞计算得出。

1.3 统计学分析应用SPSS 13.0统计软件，正态分布的计量资料以±s表示，多均数间两两比较采用q检验;偏态分布的计量资料以中位数(M)、四分位数间距(Q)表示，2组间比较采用Mann-Whitney U检验，多组间比较采用Kruskal-Wallis H检验，多组间两两比较采用Nemenyi检验;相关性采用Spearman相关分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血培养阳性患者血清中PCT、CRP、WBC及NLR水平变化与对照组比较，血培养阳性和阴性患者血清中 PCT、CRP、WBC及 NLR均明显升高(P＜0.01);与阴性组比较，血培养阳性患者血清中PCT和NLR明显升高(P＜0.05或P＜0.01)，尤以PCT升高倍数最大，CRP和WBC虽也升高但差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

表1 血培养阳性患者PCT、CRP、WBC及NLR水平变化(以M和Q表示) ±s

注:与阴性组比较，*P ＜0.01，#P ＜0.05;与对照组比较，△P ＜0.01

组别 PCT(ng/ml)M Q CRP(mg/L)M Q WBC(×109/L)M Q NLR(%)M Q阳性组(n=155)6.31 22.63 123.1 150.6 11.9 9.5 15.27 22.27阴性组(n=113) 0.54 2.54 91.4 130.0 10.30 7.75 9.55 10.18对照组(n=51) 0.17 0.07 1.2 0.9 6.1 1.50 1.53 0.79 Z值118.825 85.637 36.973 72.855 P值0.000 0.000 0.000 0.000

2.2 阴性杆菌感染患者血清中 PCT、CRP、WBC及NLR水平变化与革兰阳性球菌组比较，阴性杆菌组PCT和NLR明显升高(P＜0.05)，CRP和WBC无明显改变(P＞0.05)。见表2。

表2 阴性杆菌患者PCT、CRP、WBC及NLR水平变化(以M和Q表示)

2.3 脓毒血症患者血清PCT、CRP、WBC及NLR水平变化与非脓毒血症患者比较，脓毒血症患者PCT、CRP、WBC升高且差异有统计学意义(P＜0.05)，NLR虽升高但差异无统计学意义(P＞0.05)。见表3。

表3 脓毒血症患者PCT、CRP、WBC及NLR水平变化(以M和Q表示)

2.4 血培养阳性患者PCT、CRP、WBC及NLR指标间相关分析 PCT与CRP呈正相关(r=0.227，P＜0.05)，PCT 与 NLR 呈正相关(r=0.294，P＜0.01)，WBC 与 NLR 呈正相关(r=0.482，P＜0.01)，其他指标间无相关性。

3 讨论

目前常用感染指标WBC和CRP均为非特异性，除细菌感染外，病毒感染、手术、排异反应等均可引起升高，而血培养虽然是检测患者是否存在血液细菌感染的重要手段和明确诊断的金标准，但所需时间长、分离率低，因此，寻找一种快捷有效的诊断血液细菌感染的指标尤为重要。

PCT由甲状腺C细胞分泌，正常情况下不释放入周围循环血中，在体内很稳定，但当人体合并细菌感染、脓毒症时，患者血清中PCT可迅速升高［3］。本研究结果发现，血培养阳性组与阴性组、对照组比较，PCT、CRP、WBC及NLR均升高，其中PCT增高程度最大，可能在血液细菌感染时诱导全身各种组织大量释放PCT，并可很快检测到PCT水平升高，提示PCT在血液细菌感染方面可作为一个重要的感染指标。同时我们研究也发现，革兰阴性杆菌感染患者PCT与NLR明显高于革兰阳性球菌感染者，明显升高的PCT支持革兰阴性杆菌感染的可能性更大，提示PCT在鉴别革兰阴性杆菌和革兰阳性球菌感染中也具有参考价值，这与国内外研究［4，5］一致，阴性杆菌与阳性球菌在PCT表达量的区别可能与细菌结构密切相关。此外，本研究结果还提示，与非脓毒血症患者比较，脓毒血症患者PCT增高的水平要远超出其他指标，表明在血液细菌感染时各炎性因子对机体都发挥作用，但PCT的作用可能更大，而且PCT升高程度越高，细菌感染程度可能越重，提示脓毒血症患者PCT水平升高程度与疾病的严重程度相关［6］。

值得注意的是，本研究中NLR在判别血液细菌感染以及鉴别革兰阴性杆菌和阳性球菌感染中也具有一定的价值，是目前研究的新型指标，NLR在呼吸道感染疾病中具有早期预测价值［7］。NLR升高不仅是由于中性粒细胞升高，还可能是由于淋巴细胞的降低引起，淋巴细胞在机体的免疫机制中起十分重要的作用，因此，NLR变化不仅反映了机体的炎性反应水平，还表明了疾病与免疫紊乱的关系，对疾病治疗及预后可能起到重要作用。血培养阳性组各指标相关结果显示，PCT与CRP和NLR均呈正相关，提示PCT等炎症指标的联合检测相比血培养具有早期、快速特点，对血液细菌感染的早期诊断可能价值更大。

1 Clover B.Governance.PCT non-executives to hold clusters‘to account’.Health Serv J，2011，121:4-5.

2 Chargui A，Zekri S，Jacquillet G，et al.Cadmium-induced autophagy in rat kidney:an early biomarker of subtoxic exposure.Toxicol Sci，2011，121:31-42.

3 Holub M，Rozsypal H，Chalupa P.Procalcitonin:a reliable maker for the diagnosis and monitoring of the course of bacterial infection.Klin Mikrobiol Infekc Lek，2008，14:201-208.

4 杨朵，张曼.重症监护病房细菌性血流感染监测中C反应蛋白和降钙素原的临床意义.中国感染与化疗杂志，2014，14:29-31.

5 陈国强，曹华英，姚正国，等.血清降钙素原水平区分重症监护病房患者革兰阳性菌与革兰阴性菌感染的研究.中华医院感染学杂志，2009，19:1944-1946.

6 李丽娟，陈炜，古旭云，等.血浆PCT和CRP水平的动态变化对脓毒症严重程度的评估及其相关性研究.中国实验诊断学，2013，17:1010-1013.

7 李斌，张周良，杨珍珍，等.中性粒细胞与淋巴细胞计数比值在呼吸道感染性疾病中的应用价值.中国血液流变学杂志，2012，22:522-524.