丹芪脑血康胶囊制剂工艺及薄层鉴别研究

刘 威 张洪娟

（黑龙江科伦制药有限公司·庆安 152400）

丹芪脑血康胶囊是在多年临床应用基础上开发而成的现代中药制剂，处方由丹参、黄芪、人工牛黄、三七、川芎、大黄等十余味中药组成，具有补气、活血、通络功效，用于气虚血瘀型中风后半身不遂，口眼歪斜，语言蹇涩，口角流涎；或截瘫，下半身痿废等症候。按照中药新药研究技术要求，在原有的部分药效学和临床初步研究基础上，进行了制剂和质量标准等药学研究，现将其研究内容报告如下：

1 仪器与药品

多功能粉碎机；中试多功能提取罐；旋转蒸发仪；药用胶囊；KQ-300DB型超声仪；十万分之一电子天平；恒温水浴。试剂均为分析纯；大黄、川芎对照药材，大黄素、黄芪甲苷、丹参酮ⅡA、猪去氧胆酸、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1对照品购自中国药品生物制品检定所；药品：自制中试样品。

2 试验方法与结果

2.1 制剂工艺

处方药味，黄芪、三七、人工牛黄粉碎成细粉，备用；丹参、川芎、大黄等酌予碎断加五倍量90%乙醇于25～30℃浸提48小时，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.22～1.25（60℃测）的浸膏。药渣再加水煎煮两次，分别为2小时和1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.22－1.25（60℃测）的清膏。上述浸膏与清膏与黄芪、三七及人工牛黄细粉混匀，加适量淀粉，制粒、干燥，装胶囊，即得。

2.2 质量标准薄层鉴别

2.2.1 丹参的鉴别 取本品内容物3g，加乙酸乙酯20ml，超声处理10分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液。另取丹参酮ⅡA对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。将制剂处方药味去掉丹参，按照制剂工艺制成丹参空白样品，以下操作同供试品处理方法制成丹参空白对照液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VIB）试验，吸取上述三种溶液各10ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯（19：1）为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，空白对照液色谱则无对应斑点。

2.2.2 黄芪的薄层鉴别 取本品内容物2.5g，加甲醇40ml，索氏提取器回流提取4小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml溶解，加水饱和正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用氨试液洗2次，每次15ml，弃去氨试液，再用正丁醇饱和水洗2次，每次15ml，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。将制剂处方药味去掉黄芪，按照制剂工艺制成黄芪空白样品，以下操作同供试品处理方法制成黄芪空白对照液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VIB）试验，吸取上述三种溶液各10ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水（13：6：2）10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点，空白对照液色谱则无对应斑点。

2.2.3 川芎的鉴别 取本品内容物2.5g，加乙醚30ml，超声处理5分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液。另取川芎对照药材，加乙醚20ml，同法制成对照药材溶液。将制剂处方药味去掉川芎，按照制剂工艺制成川芎空白样品，以下操作供试品处理方法制成川芎空白对照液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VIB）试验，吸取上述三种溶液各4ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（9：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，空白对照液色谱则无对应斑点。

2.2.4 人工牛黄的鉴别 取本品内容物3g，加甲醇30ml，超声处理10分钟，静置，取上清液作为供试品溶液。另取猪去氧胆酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。将制剂处方药味去掉人工牛黄，按照制剂工艺制成人工牛黄空白样品，以下操作同供试品处理方法制成人工牛黄空白对照液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VI B）试验，吸取上述供试品、人工牛黄空白各溶液10～15μl，对照品溶液2～5μl分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-醋酸-甲醇（20：25：2：3）上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，空白对照液色谱则无对应斑点。

2.2.5 三七的鉴别 取本品内容物8g，加水饱和的正丁醇60ml，超声处理20分钟，滤过，滤液用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次20ml，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取人参皂苷对照品Rg1及三七皂苷R1对照品，加甲醇分别制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。将制剂处方药味去掉三七，按照制剂工艺制成三七空白样品，以下操作同供试品处理方法制成三七空白对照液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VIB）试验，吸取上述三种溶液各4ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水（15：40：22：10）10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点，空白对照液色谱则无对应斑点。

2.2.6 大黄的鉴别 取本品内容物5g，加甲醇30ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，加水10ml使溶解，再加盐酸1ml，置水浴上加热30分钟，立即冷却，用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加氯仿1ml使溶解，作为供试品溶液。另取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液。再取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。将制剂处方药味去掉大黄，按照制剂工艺制成大黄空白样品，以下操作同供试品处理方法制成大黄空白对照液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取对照品溶液及对照药材溶液各4μl，供试品、空白溶液10～15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（30～60℃）-甲酸乙酯-甲酸(15：5：1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏后，日光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的红色斑点；在与对照药材色谱相应的位置上，相同的五个红色主斑点，空白对照液色谱则无对应斑点。

3 结果与讨论

（1）制剂工艺研究中，处方中三七、人工牛黄为贵细药材不适于提取，而黄芪粉性较强可以充当一部分赋形剂，考虑以生药形式入药；丹参、川芎等药材为兼顾脂溶性和水溶粉性成分，考虑设计以90%乙醇提取后药渣再进行水煎处理，以保证药材的全成分，更好的发挥药效。通过药效学验证以及稳定性考核该工艺稳定、可行。

（2）上述丹参等六味药的薄层鉴别方法，通过空白对照试验，阴性液无干扰，具备专属性，可作为该制剂的质量标准鉴别方法。

[1] 国家药典委员会编.中国医药科技出版社出版，《中华人民共和国药典》2010年版一部.

[2] 韦文俊，罗远. 救尔心胶囊质量标准研究[J].中成药，2009，31(11)：1801-1803.

[3] 王晓飞，金向群，等. 紫丹银屑胶囊质量标准研究 [J].中成药，2007，29(12)：1872-1874.