昆虫蛋白的价值、应用及提取工艺

赵国玉，曹 莉，陈镜华，韩日畴

(广东省昆虫研究所，广东省野生动物保护与利用公共实验室，广东省农业害虫综合治理重点实验室，广州 510260)

随着21 世纪世界经济高速发展、社会人口激增和人民生活水平提高，人们对优质蛋白质的需求量也愈来愈大，蛋白质资源不足是当今世界存在的四大危机之一。据报道，世界上缺乏蛋白质的人口约占总人口的1/5，尤其是缺乏动物性蛋白质，寻求新的蛋白质资源已是摆在我们面前的一项迫切任务 (胡荣学，2009;Makkar et al.，2014)。

昆虫是地球上最大的生物类群，全世界现存昆虫可能超过1000 万种，目前已定名的昆虫约100 万种，遍布所有的生态系统，具有种类多、周期短、繁殖快、易于饲养且可利用废弃物进行大规模饲养等优点(ˇCiˇcková et al.，2012)，其蛋白质含量高，可达干重的50%-82% (Schabel，2010)，是一类巨大的生物资源，被认为是目前最大且最具开发应用潜力的动物蛋白源，将成为21 世纪人类蛋白质的主要来源之一 (Makkar et al.，2014)。

1 昆虫蛋白的价值

1.1 昆虫蛋白的营养价值

昆虫蛋白是一种高质量的动物蛋白质资源，富含各种氨基酸 (李奕冉等，2010;祝海娟，2013;Barroso et al.，2014)，氨基酸种类和含量比例符合联合国粮农组织/世界卫生组织(FAO/WHO)提出的氨基酸模式(冯颖，2005)。

昆虫中蛋白质含量优于猪肉、大豆以及风干牛肉，可与鱼粉相媲美(Ran and Zhao，2014)。常见干物质基础昆虫如黑水虻幼虫粗蛋白含量达40%-44% (Newton et al.，1977;安新城和吕欣，2007;St-Hilaire et al.，2007 a，2007 b;Sealey et al.，2011)，黄粉虫粗蛋白质含量达47.70%-64.70% (谢保令，1994)，蝗虫蛋白质含量达50.00%-60.00%，其中7种必需氨基酸含量与氨基酸总量的比值在35%左右，水溶性蛋白的比例超过40% (段玉峰，2005);蚕蛹中蛋白质含量占60% 左右，18种氨基酸的含量均占1.5% 以上，其中必需氨基酸占总氨基酸量42.20%-60.00% (王伟等，2006);家蝇幼虫(蝇蛆)风干物中粗蛋白质含量为40.00%-65.00% (Adesina et al.，2011;Odesanya et al.，2011;Okah and Onwujiariri，2012)，赖氨酸、蛋氨酸和必需氨基酸总量分别是鱼粉的2.6、2.7 倍和2.3 倍，氨基酸质量接近鱼粉(白钢和张翼翔，2010)。

另外，昆虫氨基酸的消化利用率非常高，可达70.00%-98.93%，接近或超过肉、鱼的消化率(Newton et al.，1977;Hwangbo et al.，2009;Pretorius，2011)，高于植物性蛋白的消化利用率(Finke，2008)。因此，将昆虫蛋白粉加入到主食品中混合食用，可以相互补充，为机体提供合理、全面、丰富的蛋白质。

1.2 昆虫蛋白的保健价值

昆虫蛋白具免疫增强作用，可通过促进淋巴细胞增殖，刺激抗体分泌，调节特异性免疫应答或促进巨噬细胞的吞噬作用，调节非特异性免疫，提高机体对外界的抵御能力。

研究表明，蚕蛹氨基酸能提高免疫功能低下小鼠的细胞免疫和体液免疫功能(尹武英和彭力，1998)。黄粉虫具有一定的促进生长、益智、抗疲劳和抗组织缺氧作用，不仅能降低血脂及促进胆固醇代谢，还能提高小鼠外周淋巴细胞转化和降低骨髓微核率(杨兆芬等，1999)，提高饲料利用率，增加小鼠主要免疫器官的脏器系数，提高机体免疫力(李汉臣等，2007)。蝇蛆蛋白粉可显著提高正常小鼠半数溶血值(HC50)，增强其体液免疫功能，对免疫功能低下小鼠HC50 无影响，但可显著提高其吞噬指数(a)值，并使体液免疫功能恢复至正常水平(覃容贵等，2007)。蚕蛹蛋白能显著提高小鼠生成抗体脾细胞数，同时，明显增加IL-2 分泌，促进淋巴细胞的增殖(昌友权等，2007)。蚕蛹蛋白多肽可增强小鼠网状内皮系统的吞噬功能(杨安树等，2008)，显著增加小鼠胸腺指数、小鼠足跖肿胀度、小鼠抗体细胞生成数量以及单核-巨噬细胞吞噬能力(戚颖欣等，2009)，具明显的免疫调节作用。

1.3 昆虫蛋白的药用价值

昆虫作为传统的中药材资源在我国已有2000多年历史(李奕冉等，2010)，昆虫蛋白具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤作用，是筛选药物、制备疫苗等的天然资源宝库。

研究表明，栗蚕蛹经大肠埃希菌诱导后体液中产生的新蛋白对大肠埃希菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球茵及柞蚕链球菌均表现出一定的抑菌作用(李亚洁等，2009)。黄粉虫防御性分泌蛋白物对不同菌的抑制强度为桔青霉 ＞大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌 ＞ 白色假丝酵母 ＞ 黑曲霉(强承魁等，2006)。源于蝇蛆体内的抗菌肽对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽胞杆菌、肺炎克氏菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、白色念珠菌等细菌均有抑制作用 (郭海萍等，2006)。

蜂毒素和天蚕素在亚毒性浓度下可抑制艾滋病病毒HIV-1 基因的表达，降低其增殖(Wachinger et al.，1998)。宫霞等(2004)从蝇蛆经沸水热变性过程中分离纯化得到一种抗菌肽MDL-1，不仅具有抗热性，还有很强的抗病毒活性。烟蚜夜蛾幼虫的血液淋巴细胞对多种DNA、RNA 病毒具有明显的抑制作用，可使病毒的感染力降低(杨瑞丽等，2003)。

研究还发现，柞蚕蛹抗菌肽可明显降低小鼠大肠癌发生率，对大肠癌细胞的抑制率达46%(李奕冉等，2010);在蚕蛹中含有少量干扰素，也具备一定的抑制肿瘤的作用，尤其是对肺癌效果明显(李琴韵和胡蓓莉，1996)。蝇蛆抗菌肽能有效抑制人胃癌细胞MGC80-3 和BGC-823、人肺癌细胞SPC-A-1、人乳腺癌细胞MCF-7、黑色素瘤A375 细胞、肝癌SMMC-7721 细胞以及白血病细胞K562 的体外增殖(邱晓燕等，2003;文彩虹等，2004;曹小红等，2006;贺莉芳等，2006)，工程蝇蛆体内分离的凝集素在体外对K562细胞也具有抑制生长作用(曹小红等，2009)，这表明可通过生物工程技术大量表达并提取某种昆虫蛋白以用于临床试验研究。

2 昆虫蛋白的开发应用

2.1 昆虫蛋白食品

将昆虫作为美味食品，在世界上许多国家和地区早已开始了，并且各自具有独特的食用种类、方法和习俗(Bodenheimer and Junk，1951)。昆虫食品加工效益很高，生产全过程不用化学药物、添加剂等，属于绿色食品(尹凯，2008)。我国食用昆虫资源的调查结果显示，目前已报道的283种及亚种的昆虫，涉及13 个目、71 个科(Hu and Zha，2009)。为人们所接受的已商业化的可食用昆虫主要有蝉、蝇蛆、蝗虫、蚂蚁、黄粉虫、蚕蛹等，这些昆虫除可直接烹制食用外，也已被加工成各种休闲零食如罐头或以原料的形式添加入各种食品如饼干、蛋糕中商业化应用(赵大军，2000;潘怡欧，2005;崔叶洁，2009;祝海娟，2013)。

然而，并不是所有昆虫都可以直接食用，例如剧毒昆虫如斑蝥、豆芜脊、青胺虫等不能直接食用，微毒昆虫则需适当处理后方可食用。由此可见，选择食用昆虫时要慎重、准确，一方面可以参考民间传统文化，另一方可以通过大量试验进一步验证研究。

由于昆虫蛋白含有丰富的营养成分，具有某些特殊功效，经加工提取后的昆虫蛋白作为功能食品备受关注。日本从蚕蛹制取优质蛋白，生产氨基酸系列产品已获多项专利(罗赞，2009)，德国、美国、法国及澳大利亚等国家的昆虫加工公司也在蓬勃发展。在我国，以蝇蛆血淋巴为原料研制出了“力诺健之素”，以及以蝇蛆几丁糖为原料的“力诺活力素”(潘怡欧，2005)。膜翅目、蚁科的鼎突多翅蚁因具有抗炎、抗风湿、抗癌等多种药效已被精加工为口服液、饮料、冲剂等保健食品(崔叶洁，2009)。以黄粉虫为主要原料制作成的黄粉虫酒、黄粉虫蛋白功能饮料、氨基酸口服液等产品也已推向市场(赵大军，2000)。

2.2 昆虫蛋白饲料

昆虫蛋白富含天然抗菌肽等有益物质，是优质的蛋白质饲料来源，作为饲料添加剂用于动物饲养，可促进动物生长、提高各种动物的抗病能力、减少抗生素的使用、降低饲料成本，提高养殖效益。目前，在畜禽及水产动物等养殖中应用较多的主要是蚕蛹粉、黄粉虫、蝇蛆粉等。

研究表明，利用蚕蛹粉喂猪后，猪平均日增重比不加蚕蛹粉的要高23.6%，且可缩短育肥期，提高出栏率(张建红和周恩芳，2002)。用黄粉虫粉等昆虫粉代替基础饲料蛋白原料2.5%、5.0%、7.5%饲喂猪，可使猪平均日增重较对照组分别提高15.4%、37.2%、40.1%，料肉比分别下降4.8%、9.7%、11.3% (陈晓伟，2012)。在没有氨基酸补充的情况下，将50%的黑水虻预蛹粉代替常规饲料中的血浆蛋白粉饲喂断奶小猪，可以显著提高4%的收益和9%的饲料转化率(Newton et al.，2005)。

用黄粉虫蛋白饲料饲喂蛋鸡较普通饲料产蛋率提高5.06%，蛋重提高12.4%，料蛋比下降低6.9%，净增效益提高32.12% (邓青云等，2008)。在饲料中添加蝇蛆粉饲喂肉鸡，可显著提高肉鸡饲料转化率、日增重、胸肌和腿肌的重量，提高生长指标和经济效益 (贾生福和马彦彪，2007;Hwangbo et al.，2009;Pretorius，2011;Okah and Onwujiariri，2012)，基础饲料中蝇蛆粉添加的最佳配比为10%-15% (Hwangbo et al.，2009)。用黑水虻虫粉代替的豆粉饲喂鸡可显著提高饲料转化率，利于鸡的生长 (Newton et al.，2005)。

同样，在水产养殖中昆虫蛋白粉的应用甚广。用16%的柞蚕免疫活性蛋白替代鱼粉饲喂鲍鱼，增长率可提高31.2%-32.9%，并有望缩短鲍鱼的育成时间(祁芳和李岗生，2001)。将蝇蛆粉添加到凡纳滨对虾饲料中，可显著提高对虾体长、体质量、特定生长率和成活率(郑伟等，2010)，并在一定程度上提高对虾抵抗弧菌的能力(陈乃松等，2007);凡纳滨对虾饲料中添加蝇蛆抗菌肽可促进对虾生长，并能提高对虾的免疫相关指标(陈冰等，2010)。蝇蛆粉代替鱼粉饲喂罗非鱼，有利于罗非鱼的生长，且代替34%的鱼粉时，罗非鱼的生长指标和存活率最高 (Ogunji et al.，2007);与肉骨粉、豆粉饲喂异鳃胡鲶鱼相比，蝇蛆粉能提高其生长指标(Ossey et al.，2012);蝇蛆粉部分取代鱼粉能促进鲫鱼生长，提高饲料利用效率，增强鲫鱼白细胞吞噬功能和呼吸爆发能力，并可增强鱼体抗氧化能力，从而增强其非特异性免疫功能，且对鱼肉品质无不良影响(李小波，2013)。

用蚕蛹粉饲养水貂，100 g 蚕蛹可代替200-500 g 肉类蛋白质;100 g 蚕蛹粉的可消化蛋白质可代替312 g 淡水鱼的可消化蛋白质，同时还可以增强貂皮毛绒的光泽，提高毛绒的品质(李静等，2007)。用黑水虻蛹粉饲喂美洲鳄，结果证明黑水虻有利于美洲鳄的生长(Bodri and Cole，2007)。

2.3 昆虫蛋白药物

随着生物技术及生产工艺的飞速发展，昆虫蛋白药物的研发已进入更深层次。从多种昆虫体内免疫血淋巴中提纯的凝集素、免疫蛋白、免疫肽、酚氧化酶、抗菌肽已被用于广谱性抗细菌、抗病毒、抗肿瘤细胞的药品开发 (Yu and Li，2005;王毅力等，2009)，抗菌肽应用研究已进入临床试验(王毅力等，2009)，蚂蚁提取物临床上已用于治疗类风湿关节炎、风湿性关节炎、治疗慢性肝炎，降低谷丙转氨酶，起到保肝护肝作用(沈立荣和任玉翠，1999)。

浙江省中医药研究院以蚕蛹复合氨基酸为主要原料制成的“复方营养要素”制剂能显著抑制肝癌、肉瘤S180荷瘤小鼠的瘤体生长，延长艾氏腹水瘤小鼠的生存期，该制剂对包括胃癌、食管癌、大肠癌等120 例恶性肿瘤临床试验结果显效88 例，有效24 例，无效8 例，总有效率为93.33% (楼锦新，1995)。

昆虫抗菌肽作为药物成分的产品已大量上市。蜂毒肽作为一种可应用于制备杀灭细菌和治疗脓毒症的药物小分子多肽已被申请专利(郭毅斌等，2005)，多种蜂毒制剂如蜂毒素、蜂散痛、蜂特灵和蜂毒注射液等已被广泛应用于临床(刘红云和童富淡，2003)。此外昆虫抗冻蛋白可用于人和动物的卵、精子、胚胎、心脏或肝脏等器官的超低温保存以改善冷冻质量(Amir et al.，2004)。昆虫细胞培养技术也已用来工业化大规模生产重组蛋白如凝集素等用于医药行业(Hink，1991;曹小红等，2006;Spiros，2008)。

2.4 其他

利用特定昆虫蛋白的性质，可将昆虫蛋白基因通过基因工程技术转入到目标生物中表达使其发挥作用，如将抗菌肽MB39 基因转入到苹果中可得到抗病力增强的转基因株系 (刘庆忠等，2001)，昆虫神经毒素与杆状病毒重组后可改善苜蓿夜蛾的杀虫效果(Jinn et al.，2006)，在转入Bt伴孢晶体蛋白基因等毒素基因的同时转入增效蛋白基因，既可增强转基因植物的抗虫能力，又能防止昆虫对单一有效成分产生抗性 (胡蓉等，2002)。

昆虫蛋白还可用作化妆品原料如蚕丝素蛋白制成的化妆品，制造高级医用材料，如生物膜、生物反应器、人造皮肤、人造血管、免拆除手术逢合线等(杨金兰和阎杰，2011)。

3 昆虫蛋白提取工艺

3.1 前处理

昆虫蛋白提取时需进行前处理获得下一步蛋白抽提所需基质:鲜虫或去脂干虫。方法为(ⅰ)鲜虫，即将鲜虫清洗干净，晾干备用;(ⅱ)去脂干虫，即挑选新鲜无腐烂的虫体为原料禁止饲喂24-48 h 自然排空，清洗除杂后在烘箱中50-60℃烘干(潘怡欧，2005;马林林，2013)，用高速粉碎机粉碎虫体后进行采用索氏抽提法进行脱脂处理(李帅等，2008)，将虫粉用滤纸包好后置于索氏提取器的提取筒中，倒入有机溶剂，设定水浴温度及抽提时间，待滤纸包至恒重即抽提结束，不同昆虫的最适脱脂溶剂不同，蚕蛹、黄粉虫、蝇蛆的最适脱脂溶剂分别为正己烷(杨梅琳和成玉粱，2006)、石油醚(王文亮等，2008;窦珍伟，2009)与无水乙醚(胡荣学，2009)、无水乙醚(李帅等，2008)。

昆虫经不同处理方式处理后蛋白提取效果不同。研究发现原料经脱脂后蛋白水解率较未脱脂的蛋白水解率提高了27.43%，可能是因内部的蛋白质不再受脂肪的包裹，减少了脂肪对它的束缚因而易被酶解，使蛋白质水解率得以提高。而潘怡欧(2005)的研究发现以鲜虫作为提取原料效果明显优于使用去脂干虫提取昆虫蛋白质。目前研究多采用去脂干虫作为蛋白提取基质。

3.2 蛋白提取

蛋白提取主要分为两大类:发酵法和抽提法。发酵法提取蛋白是选用一些合适的菌种对原料进行发酵培养，然后用水将其洗到中性，干燥(程倩等，2012)。用发酵法提取昆虫蛋白的具体菌种选择及提取工艺条件未见报道。

抽提法是目前提取昆虫蛋白的主要方法。抽提通常是指采用适当的溶剂和方法，从原料中把有效成份分离出来。依溶剂不同抽提法主要有五种:碱法、盐法、酶法、有机溶剂法以及Tris-HCl 法，其中，碱法效率高，能耗和成本较低，但蛋白损失较高，且过程中易产生苦味物质，酶法可更多的保留蛋白的营养价值，但成本较高，盐法介于二者之间，有机溶剂法适用于提取与脂结合较紧密或分子中非极性侧链较多的蛋白质，但易造成溶剂残留 (穆利霞等，2014;杨田，2014)，Tris-HCl 法效率较盐法高，蛋白品质好，但成本较高(仲义等，2009)。

昆虫蛋白提取的主要影响因素有液固比、提取液pH、离子种类、提取时间、提取液浓度、温度等。不同昆虫提取工艺不同，且因褪色、除臭等问题，加上纯化过程繁琐，昆虫蛋白并没有进行广泛的工厂化生产，目前许多学者仍致力于对昆虫蛋白提取工艺的研究，供试昆虫主要为蚕蛹、黄粉虫、蝇蛆等，由于研究者所用的材料和处理方法不同，其结论不尽相同。

3.2.1 蚕蛹蛋白提取工艺

蚕蛹蛋白的提取多采用碱法和酶法。有机溶剂法制备蚕蛹蛋白得率低，不能广泛应用(陈芳艳等，2003)。邱英华等(2012)采用碱法对蚕蛹蛋白的提取工艺进行研究，得到的最佳工艺条件为:反应温度70℃，NaOH 浓度2%，液固比(V/m)为6∶1，反应时间6 h，蚕蛹蛋白得率为27.6%。穆利霞等(2014)研究超声处理对碱法制备蚕蛹蛋白得率的影响发现，超声处理可提高碱法制备蚕蛹蛋白得率，优化的蚕蛹碱法提取工艺条件为:室温(16-20℃)，NaOH 浓度0.3%，浸提液固比(V/m)60∶1，超声功率400 W，超声时间20 min，蚕蛹蛋白得率为88.14%，高于醇提法的8.47% (陈芳艳等，2003)和普通碱提法的78.69% (孙雁等，2009)。

赵鹏等(2005)采用中性蛋白酶结合动物蛋白酶双酶水解的方法对蚕蛹蛋白的提取工艺做了探索，确定最佳酶解工艺条件为:反应温度50℃，pH7.0，动物蛋白加酶量150 U/g (动物蛋白酶酶活/中性蛋白酶比为1∶4)，底物浓度1.0%，水解时间3 h，水解度达27.36%，酶解液为短链的活性多肽。李高扬等(2011)以丙酮脱脂后的蚕蛹蛋白为原料，以DPPH 的清除能力作为酶解过程的分析指标，分别用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶水解脱脂蚕蛹蛋白，结果表明胃蛋白酶水解蚕蛹蛋白效果最好，并对胃蛋白酶水解脱脂蚕蛹蛋白的工艺条件做了正交优化，得到最优水解条件为:反应温度50℃，pH1.5，加酶量8000 U/g，底物浓度(质量分数)4%，反应时间6 h，水解度达25%。马林林(2013)用木瓜蛋白酶、1398 中性蛋白酶和2709碱性蛋白酶对脱脂蚕蛹进行酶法提取工艺研究，发现1398 中性蛋白酶的水解效果最佳，通过对1398 中性蛋白酶水解脱脂蚕蛹蛋白的各参数进一步研究得出最适参数为:水解温度50℃，pH7.0，酶用量2%，底物浓度4%，反应时间4 h，水解度达20%。

3.2.2 黄粉虫幼虫蛋白提取工艺

仲义等(2009)采用碱法、盐法、胰蛋白酶法和Tris-HCl 法对黄粉虫幼虫蛋白提取方法进行筛选，得出最佳提取方法为胰蛋白酶法，碱法和Tris-HCl 法次之，盐法效果最差。

卢文静等(2012)采用胰蛋白酶法对黄粉虫粉的提取工艺进行研究，得到最佳工艺条件为:温度 46℃，pH8.5，加酶量 1.8%、液固比(V/m)为10∶1，反应时间4 h，水解度为13.22%。

罗赞(2009)采用了碱法和酶法两种方法提取黄粉虫幼虫蛋白，结果表明，碱法的最佳条件为:反应温度70℃，碱液浓度1.0% mol/L，液固比(V/m)12∶1，反应时间90 min，黄粉虫蛋白提取率可达70.11%，纯度为91.20%;蛋白酶法提取的最佳工艺为复合蛋白酶和复合风味蛋白酶双酶共同进行酶法提取:反应温度55℃，pH6.5，加酶量6%、复合蛋白酶与复合风味蛋白酶加量比1∶3，液固比(V/m)9∶1，反应时间8 h，在该最佳工艺条件下提取黄粉虫蛋白，提取率可以达64.83%，纯度为92.17%。黄雄伟(2010)采用盐提法研究了黄粉虫幼虫蛋白的提取工艺条件，其最佳工艺为:反应温度70℃，NaCl 浓度0.5%，液固比(V/m)8∶1，反应时间3 h，蛋白质沉淀pH 值4.8，蛋白提取率可达到71.30%，纯度为90.20%。

杨田(2014)用Na2HPO4柠檬酸缓冲液作为黄粉虫幼虫蛋白的提取液，在工艺条件:反应温度20℃，pH7.0，液固比(V/m)8∶1，反应时间50 min，得到的蛋白提取率为71.02%，蛋白纯度为90.34%。

3.2.3 蝇蛆蛋白提取工艺

李玲玲等(2008)采用多种酶混合酶解脱脂蝇蛆粉得到的最佳工艺条件为:反应温度45℃，pH7.5，酶量8000 U/g，风味酶∶木瓜酶∶胃蛋白酶∶胰蛋白酶配比为35∶50∶5∶10，反应时间为7 h。盐析法脱脂蝇蛆干粉的最佳蛋白提取工艺为反应温度4℃、pH4、硫酸铵浓度70%、反应时间7 h，获得了较高的提取率(李帅等，2008)。将家蝇幼虫脱脂干粉和含0.18 mol/L NaCI 的柠檬酸-Na2HPO4缓冲溶液，pH7.0，在4℃温度下预冷，液固比(V/m)按10∶1，进行充分溶解后取上清液用0.01 mol/L HCI 溶液调节上清液pH 值至5.8，加入65%硫酸铵进行饱和沉淀可提取家蝇幼虫清蛋白(艾辉，2008)。

雷土青(2014)采用喷雾干燥法制备蝇蛆蛋白，通过检测其得率及抗菌活性，优化出了在4℃环境下的最佳提取工艺条件:提取液为PBS 缓冲溶液，液固比(V/m)4∶1，浸提时间为0。陆婕等(2007)以蝇蛆干粉为材料，发现加热-层析法较海藻酸吸附法快速简便，但是得率只有0.26%。党向利(2008)以家蝇蛹为材料，用酸过夜提取、热处理、离心、过滤、超滤处理等工艺提取分离，并用喷雾干燥法制备出得率近1.3%的产品，具有较高的抗菌活性，产品主要活性成分分子量小于20 kD，且稳定性高，利于保存，是一种可行性较高的方法。

另外，有学者用层析技术分离出具有较高抗菌活性的蛋白/肽和凝集素等物质 (Jin et al.，2005;Hou et al.，2007;Tang et al.，2009)，但是工艺复杂，产品回收率低，不利于规模化应用，且主要用于活性蛋白的鉴定研究。

3.2.4 其他

祝海娟(2013)对大麦虫的提取工艺进行了研究，结果表明，碱法的最佳工艺条件为:反应温度60℃，碱液浓度1.0 g/100 mL、液固比(V/m)10∶1，、反应时间2.0 h，蛋白提取率为81.54%，纯度为82.13%;盐法最佳工艺条件:反应温度50℃，盐浓度1.0 g/100 mL、液固比(V/m)15∶1，反应时间2.0 h，，蛋白提取率为53.74%，含量为75.01%;通过对5种酶制剂的筛选，确定碱性蛋白酶为最佳酶制剂，其最佳工艺条件:反应温度50℃，pH12.0，加酶量(E/S)5.0%，液固比(V/m)20∶1，反应时间为2.5 h，蛋白提取率为86.96%，含量为76.22%。

李淑萍等(2009)对铺道蚁蛋白提取工艺进行研究，确定碱法最佳条件为:反应温度80℃，碱液浓度1%，液固比(V/m)15∶1，浸提时间60 min;盐提最佳条件为:反应温度50℃，盐液浓度1.5%，液固比 (V/m)15∶1，浸提时间60 min;Tris-HCl 法最佳条件为:反应温度20℃，pH8.3，液固比(V/m)15∶1，浸提时间90 min;三种方法中碱提蛋白法的蛋白质得率最高，其次为盐提蛋白法，而Tris-HCl 缓冲液提蛋白法最低。

金会鑫等(2012)对蚱蝉若虫蛋白提取工艺进行了研究，结果表明，碱法的蛋白质得率最高，其次为盐法，Tris-HCl 法得率最低;碱提蛋白法的主要工艺条件为:反应温度60℃，碱液浓度0.5%、液固比(V/m)为5∶1，浸提时间60 min时蛋白质得率有最大值;盐提蛋白法的主要工艺条件为:反应温度40℃，盐浓度1.5%，液固比(V/m)10∶1，浸提时间120 min 时蛋白质得率有最大值;Tris-HCl 提蛋白法的主要工艺条件为:反应温度20℃，pH8.1，液固比(V/m)10∶1，浸提时间30 min 时蛋白质得率有最大值。

4 问题及对策

目前昆虫蛋白研究方面存在的主要问题:一是饲养技术还处于初级阶段，并未实现自动化，缺乏针对各个昆虫饲养的系统研究;二是昆虫蛋白产品的开发利用仅停留低水平层次，工业化程度不高;三是昆虫蛋白市场不成熟，质量标准、企业标准、卫生标准等规章制度并未制定，没有监管，暂时处于混乱状态;四是昆虫蛋白安全性测定，有人食用昆虫例如蝗虫有过敏现象，甚至造成休克，危害身体健康。

对策:首先，加大科研投入，各个学科相互交叉，研究资源昆虫饲养技术的同时开发自动化养殖技术;其次，加大昆虫蛋白产品的开发利用，利用高新技术生产高价值昆虫蛋白例如昆虫活性多肽筛选药物、制备疫苗、食品添加剂;再次，通过权威机构制定相关法律法规，对昆虫的生产、加工、销售进行监管，提高昆虫生产者的准入标准;最后，建立检测鉴定昆虫蛋白产品安全性的技术体系。

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