系统性红斑狼疮合并血栓形成患者狼疮抗凝物水平分析

饶 绘 李智山 赵建忠 童允洁 润袁敏，＊

系统性红斑狼疮（Systemic Lupus Erythematosus，SLE）患者存在血栓前状态，许多临床并发症与血栓形成密切相关。血栓事件发生机制涉及除血管内皮损伤、凝血、抗凝、纤溶系统平衡失调等多个血栓形成因素外，最近研究发现狼疮抗凝物（LA）在SLE患者的检出率较高，而且与血栓事件发生率相关［1］。本文检测分析合并血栓形成SLE患者的LA水平变化。

1 资料与方法

1.1 对象和分组

2012－06－2015－04在本院风湿免疫科住院的SLE患者78例（SLE组），其中男8例，女70例，年龄13－61岁，平均37±9岁，SLE诊断符合2010年中华医学会风湿病学分会SLE诊断标准［2］。SLE组患者入院时病情均处于活动期，住院期间使用甲基强的松龙或联合应用环磷酰胺冲击治疗。按是否合并血栓事件将SLE组分为SLE－血栓组（n＝8）和SLE－非血栓组（n＝70）两个亚组。SLE－血栓组与SLE－非血栓组年龄、性别组间差异无统计学意义（P＞0.05）。其中SLE－血栓组8例（8／78）共发生11次血栓事件，血栓类型包括下肢深静脉血栓（6／11）、上肢静脉血栓（1／11）、缺血性脑卒中（2／11）、脑静脉窦血栓形成（1／11）和胎盘血栓（1／11）。对照组为本院同期体检健康者（n＝40），男6例，女34例，年龄14－60岁，平均36±8岁。对照组性别、年龄与SLE组相匹配，差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 血样采集和LA检测

所有受检者取血前一周均未使用抗凝药物。清晨空腹取静脉血2.7ml于枸橼酸钠抗凝管中，混匀后离心（1200g，10min）。为去除血小板，取离心后的上层血浆进行二次离心（1200g，10min）［3］。将上层乏血小板血浆于－80℃冰箱保存、批检。LA检测采用改良稀释蝰蛇毒磷脂时间法，试剂和质控物购自美国沃芬医疗设备国际贸易（上海）有限公司（筛 选 试 剂 Lot：NO249101；确 诊 试 剂 Lot：NO349312；阳性质控Lot：NO440025；阴性质控Lot：EO942625），按照试剂说明书，采用血凝分析仪（STAGO－Evolution，法国）检测。筛选试验：分别取患者和同批对照血浆100μl，37℃预热240s，加100μl筛选试剂（试剂主要成分为蝰蛇蛇毒和钙离子混合液），记录血浆凝固时间，计算筛选试验比值（＝患者凝固时间／对照凝固时间）；确诊试验：分别取患者和同批对照血浆100μl，37℃ 预热240s，加100μl确诊试剂（试剂主要成分为蝰蛇蛇毒、钙离子混合液和血小板溶解液），记录血浆凝固时间，计算确诊试验比值（＝患者凝固时间／对照凝固时间）。同批完成质控并计算LA比值（＝筛选试验比值／确诊试验比值）。

1.3 临床血栓事件的确定

深静脉血栓形成经多普勒超声扫描、血管造影证实；缺血性脑卒中经CT及临床表现证实；脑静脉窦血栓形成经头颅磁共振成像联合磁共振静脉成像、全脑数字减影血管造影并结合临床表现证实；胎盘血栓经病理证实。

1.4 统计学处理

采用SPSS 14.0统计学软件。计量资料用均数±标准差（±s）表示，Shapiro－wilk检验判定符合正态分布。两组间LA比值比较采用t检验；计数资料用百分率表示，组间比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

与对照组比较，SLE组LA比值明显升高，差异有统计学意义（1.04±0.07vs 1.30±0.36，t＝6.139，P＜0.01）。

与SLE－非血栓组比较，SLE－血栓组LA比值明显升高，差异有统计学意义（1.25±0.30vs 1.80±0.44，t＝－4.659，P＜0.01）。

3 讨 论

SLE是一种多系统、多器官组织损害的慢性、自身免疫性疾病，发病机制涉及体内免疫、激素和神经调节失衡。血栓形成是SLE患者的重要表现之一。除因广泛血管损伤导致凝血增强外，LA水平升高对SLE血栓形成可能也有一定的作用［4，5］。本文结果不仅显示SLE患者LA比值明显高于健康对照组（P＜0.05），而且SLE－血栓组LA比值显著高于SLE－非血栓组（P＜0.05），提示LA在SLE血栓事件中起重要作用。

作为抗磷脂抗体之一，LA在体外试验中表现为延长磷脂依赖的凝血过程，但在体内，LA反而具有促血栓形成的作用。LA促进SLE患者发生血栓事件的可能机制包括：（1）LA与血管内皮细胞膜磷脂作用，干扰内皮细胞释放纤溶酶原激活物而抑制纤溶；（2）LA与血小板膜磷脂作用，干扰花生四烯酸代谢，促进血小板活化；（3）LA可抑制与磷脂相关的内源性抗凝物质，使血液凝固性增强，如LA通过竞争磷脂酰乙醇胺，抑制蛋白C途径，引起获得性活化蛋白C抵抗，使之减少或丧失对FⅤa和FⅧa的快速水解作用。LA的上述多途径促血栓作用的持续存在，有助于处于血栓前状态SLE患者的血栓形成［6］。因此临床有必要对SLE患者进行LA水平检测，一方面用于评估患者血栓形成风险，另一方面还可对LA持续中、高滴度SLE患者使用羟氯喹的疗效进行监测［7］，也能通过LA水平的升降变化预测治疗后血栓的转归［8］，从而为SLE血栓事件的防治起到积极作用。