石河子部分地区规模化奶牛场奶牛球虫感染调查

蒋业慧，王正荣，张艳艳，薄新文

（新疆农垦科学院新疆生产建设兵团绵羊繁育生物技术重点实验室，新疆 石河子832000）

奶牛球虫病是艾美耳属（Eimeria）的多种球虫寄生于奶牛肠道上皮细胞内引起的以出血性肠炎为特征的寄生虫病。艾美耳属的球虫种类丰富，Levies报道有22种[1]，Pallerdy报道有25种[2]。邱氏艾美耳球虫和牛艾美耳球虫的致病性最为严重。该病主要危害21～180日龄以内的犊牛，轻微感染影响犊牛的生长发育，但病情严重时，可导致严重腹泻，甚至死亡。石河子垦区奶牛养殖业蓬勃发展，但奶牛球虫病的防治却没有相应的调查数据作为理论依据。为了解石河子地区奶牛球虫感染与流行现状，于2013年10-11月对石河子地区的6个规模化奶牛场奶牛球虫病的流行现状进行了调查。

1 材料与方法

1.1 样品来源 采自石河子6个规模化奶牛养殖场，采样奶牛的年龄为：0～3月龄、5～6月龄、1～2岁、2～3岁、3～5岁。直肠采集粪便50 g，置于一次性塑料手套中，并标记地区、场名、奶牛标号、年龄、体况，置于4℃冰箱中待检。

1.2 样品的处理 每份样品取5 g，加入适量的饱和蔗糖水，以3 000 r/min离心5min，用4mm的吊环蘸取表面液膜并抖落于载玻片中央，覆盖盖玻片，显微镜下观察，记录结果。

1.3 球虫卵囊的孢子化培养及虫种鉴定 取5 g阳性粪便于适量的饱和蔗糖水中，以3 000 r/min离心10min，用直径为1 cm的漏网，蘸取表面水膜，抖于另一个装有适量自来水的离心管中，重复5次，以3 500 r/min离心10min，去上清。在沉淀物中加入适量2.5%重铬酸钾溶液，溶液高度不超过2mm，放置于28℃下培养，培养24 h之后，每6 h观察镜检1次。根据孢子化所用的时间，卵囊的大小、形态、颜色等，参照图谱进行虫种鉴定[3]。

1.4 感染强度的确定 采用麦克马斯特法进行感染强度的检测[4]，取1 g粪便于离心管中，加入29 mL的饱和食盐水，混匀，在计数室内加满液体，静置2～3min，显微镜下观察，记10×10方格内的卵囊数，记两次，取平均值乘以200，即为每克粪便中的卵囊数（OPG值）。

2 结果与分析

2.1 不同奶牛场的球虫感染率与平均感染强度

被调查的6个规模化奶牛养殖场均存在球虫感染（见表1），由此可见石河子地区存在奶牛球虫感染，广大养殖户应给予足够的重视。

表1 不同奶牛场的球虫感染率与感染强度

2.2 不同年龄奶牛球虫感染率与感染强度 被调查的5个年龄段的奶牛均存在球虫感染，但差异不显著（P＞0.05）（见表2）。且5～6月龄、1～2岁的犊牛球虫感染率最高。

表2 不同年龄奶牛球虫感染率与感染强度

2.3 奶牛感染球虫的疑似种类及形态描述

2.3.1 奥博艾美耳球虫（Eimeria auburnensis） 卵囊为卵形，大小为（32～46）μm×（20～25）μm，平均大小为38.4μm×23.1μm。4个孢子囊呈长卵圆形，无外残体，斯氏体不明显。卵囊壁光滑、均匀、透明，浅灰棕色。孢子化时间，48～72 h（见图1：a、b）。

2.3.2 牛艾美耳球虫（Eimeria bovis） 卵囊为卵形，大小为（23～34）μm×（17～23）μm，平均大小为27.7μm×20.3μm。4个孢子囊呈长卵圆形，有内残体，斯氏体明显，无外残体和极粒，每个孢子囊内含有两个子孢子。卵囊壁光滑、均匀、透明，呈褐绿色。有卵膜孔。孢子化时间：48～72 h（见图1：c、d）。

2.3.3 亚球艾美耳球虫（Eimeria subspherica） 卵囊为亚球形，大小为（9～11）μm×（8～11）μm，平均大小为8.5μm×11μm。4个孢子囊呈椭圆形，无外残体，斯氏体明显。卵囊壁光滑、透明，无卵膜孔。孢子化时间，4～5 d（见图1：e、f）。

2.3.4 邱氏艾美耳球虫（Eimeria zuernii） 卵囊为椭圆形，大小为（15～22）μm×（13～18）μm，平均大小为17.8μm×15.6μm。4个孢子囊呈长卵圆形，无内残体，有斯氏体，无外残体和极粒。卵囊壁薄、均匀、无色、无卵膜孔。孢子化时间24 h～48 h（见图1：g、h）。

2.3.5 椭圆艾美耳球虫（Eimeria ellipsoidalli） 卵囊为椭圆形，大小为（12～27）μm×（11～21）μm，平均大小16.9μm×13μm。4个孢子囊呈长卵圆形，有内残体和明显的斯氏体，无外残体和极粒。卵囊壁薄、均匀、透明，无卵膜孔。孢子化时间：48～72 h（见图1：i、j）。

2.3.6 柱状艾美耳球虫（Eimeria cylindrce） 卵囊为狭窄的柱状。大小为（16～27）μm×（12～15）μm,平均大小为23.3μm×13.3μm。4个孢子囊呈长卵圆形，有内残体，斯氏体明显，无外残体和极粒。卵囊壁薄、无色，无卵膜孔。孢子化时间为48～72 h（见图1：k、l）。

图1 各种疑似艾美耳球虫卵囊形态

2.4 不同种类的球虫在各个年龄段奶牛中的感染率 各个年龄段奶牛的优势虫种略有差异：0～3月龄奶牛的优势虫种为牛艾美耳球虫和邱氏艾美耳球虫；5～6月龄奶牛的优势虫种为椭圆艾美耳球虫和柱状艾美耳球虫；1～2岁奶牛的优势虫种为牛艾美耳球虫和椭圆艾美耳球虫；2～3岁奶牛所感染的球虫种类仅为2种，为亚球艾美耳球虫和邱氏艾美耳球虫；3～5岁奶牛的优势虫种为亚球艾美耳球虫、椭圆艾美耳球虫和奥博艾美耳球虫（见表3）。

表3 不同种类的球虫在各个年龄段奶牛中的感染率

3 讨论

奶牛球虫感染在世界范围内十分普遍，且牛球虫种类丰富。早在1992年，黄兵等报道我国存在16种可以感染牛的艾美耳球虫[5]。在国外，Chibunda R T等早在1997年报道，在坦桑尼亚奶牛球虫的感染率为35%，发现7个虫种[6]。koutny H.报告，在澳大利亚被调查的牛场当中有97.97%的牛场中存在球虫的感染，样品的阳性率高达83.67%，共检出11种球虫[7]。Hatice Cicek报道，在土耳其所调查的504个牛粪便排泄物当中有20.04%的样品中检出11种牛球虫卵囊[8]。本次调查共涉及石河子6个规模化奶牛场，各个奶牛场均存在奶牛球虫感染，且共检出6种艾美耳球虫，这与刘继荣[9]等报道石河子某奶牛场曾暴发过奶牛球虫病，共同证明新疆北部存在奶牛球虫的感染，但各个地区、各个牛场、各个年龄段奶牛所流行的奶牛球虫种类及感染率有所差异。这可能与不同牛场的饲养管理条件差异有很大的关系。金兰梅等[10]对江苏部分地区的9个奶牛场进行了球虫感染调查，结果表明，9个奶牛场均有球虫感染，感染率最高的为1～6月龄和6～12月龄的奶牛，大部分牛场的OPG值低于1 000个。石冬梅等报道河南奶牛球虫的感染率为37.57%，共检出11种奶牛球虫[11]。对比各地区调查结果显示，虽然新疆气候干燥，昼夜温差大，但依然存在较为严重的奶牛球虫感染。为了降低奶牛球虫对奶牛业的危害，各个奶牛场应加强奶牛球虫病的防控，做好疾病监测，采用药物预防，提高整体畜群的抵抗力。当然本次调查只是对新疆石河子地区10-11月份奶牛球虫的感染情况进行调查，并未对奶牛球虫全年的感染情况进行监测，同时调查的数量不是很多，故这一结果并不能反应整个石河子地区全年奶牛球虫感染情况。鉴于此，本课题组将进一步扩大样品数量，并做全年的感染情况调查，全面掌握石河子地区奶牛球虫流行规律，为制定合理的驱虫方案提供理论依据。

[1] Levine N D.Protozoan Parasites of domestic auimals and ofman[J].1973（2）：164-233.

[2] Pallerdy L.Coccidia and coccidiosis[M].2nd，1974.

[3] 曹希亮，董辉，黄兵，等.奶牛球虫流行病学调查研究[J].中国奶牛，2012，3：29-31.

[4]张晓东，石泉，苏日那，等.呼和浩特市周边地区奶牛球虫病流行病学调查[J].中国畜牧兽医，2008，35（4）：65-67.

[5] 黄兵.中国牛球虫种类、分布及其危害[J].上海畜牧兽医通讯，1992，1：16-17.

[6]Chibunda R T，Muhairwa A P，Kambarage D M，et al.Eimeriosis indairy cattle farms in Morogoro municipality of Tanzania[J].Prev VetMed，1997 Aug，31（4）：191-197.

[7]H Koutny，A Joachim.Bovine eimeria species in Austria[J].Parasitology research，2012，110（5）：1893-1901.

[8] HaHatice Cicek，Feride Sevim li，Esma Kozan.Prevalence of coccidia in beef cattle in western Turkey[J].parasitology research，2007，101：1239-1243.

[9]王开胜，刘继荣，刘勇，等.石河子地区某奶牛场球虫病流行病学调查与防治[J].兽医科技，2010（12）：114-116.

[10]金兰梅，伍清林，马高民，等.江苏部分地区奶牛球虫病流行情况调查[J].家畜生态学报，2010，31（3）：69-74.

[11]石冬梅，陈益，王军.河南省奶牛球虫病流行病学调查[J].中国奶牛，2010（10）：51-53.