布鲁氏菌病患者实验室检查结果分析

布鲁氏菌病患者实验室检查结果分析

王克迪，苏建荣*

(首都医科大学附属北京友谊医院 临床检验中心，北京100050)

布鲁氏菌病(Brucellosis)又称地中海弛张热，马尔他热，波浪热或波状热，简称布病，是由布鲁氏菌引起的人畜共患性全身传染病，主要传播途径是经皮肤黏膜和消化道进入人体而感染发病，并在局部淋巴结内增殖形成病灶，繁殖到一定数量后破溃入血，并被带到肝、脾、骨髓等处形成病灶。这些病灶中的病菌又可以多次入血，引起临床症状的反复加重，形成波浪式热型。其临床特点为长期发热、多汗、关节痛及肝脾肿大等[1]。近年来，养畜户增多，牲畜交易活跃，而食品的检疫管理和布病的防治工作相对滞后，使该病的发病率显著升高。最近，我院布鲁氏菌病检出率也有所增加，为使临床实验室人员了解该病临床及实验室检查特点，现将我院近3年来10例布病的实验室检查结果进行总结。

1材料与方法

1.1一般资料选自2012年5月至2015年5月就诊于北京友谊医院感染内科，并被明确诊断为布鲁氏菌病的患者。共10例，均为男性，年龄在21-64岁，7例有明确牛羊接触史，3例无明确接触史。

1.2仪器与试剂Sysmex XE-5000血细胞分析仪(日本Sysmex公司)；VITEC-COMPACT II全自动微生物分析系统(法国生物梅里埃公司)；BD9120全自动血培养仪(美国BD公司)；血琼脂平板培养基购自法国生物梅里埃公司。

1.3方法取入组者晨起空腹静脉血2-3 ml，EDTA-K抗凝，进行血常规测定并记录数据。另取患者外周静脉血8-10 ml注入血培养瓶(需氧瓶和厌氧瓶1瓶)，即刻进行血培养。阳性报警后立即转种血琼脂平板培养基孵育，每8h观察一次菌落生长情况并记录。

2结果

2.1血常规白细胞均值为(5.6±2.3)×109/L，最高值9.21×109/L，最低值2.00×109/L，正常或轻度减少，淋巴细胞百分比为(44.6±8.5)%，相对或绝对增多，最高可达60%以上。病程较长者可有轻或中度贫血，血小板多正常。血沉均增速，均值为(19.1±7.9)mm/h，血浆C反应蛋白升高，均值为(13.8±5.1)mg/L，见表1和图1。

表1　10例布鲁氏菌病的实验室检查结果

+：有相应临床症状或阳性，-：无相应临床症状或阴性，N：检测结果在正常参考范围内。WBC：白细胞计数；GR%：中性粒细胞百分比；LY%%淋巴细胞百分比；RBC：红细胞计数；PLT：血小板计数；CRP：C反应蛋白；ESR：红细胞沉降率

-3-+3：代表每例样本检测值与相应指标均值的距离。WBC：白细胞计数；GR%：中性粒细胞百分比；LY%：淋巴细胞百分比；RBC：红细胞计数；ESR：红细胞沉降率；CRP：C反应蛋白

图110例布鲁氏菌病的实验室结果分布图

2.2免疫学检查常用布氏杆菌虎红试验，其原理是用布氏杆菌制备凝集抗原，与不同稀释度的患者血清混合，在玻片上做凝集实验，发生凝集为阳性，能够有效去除血清中非特异性凝集素，有较好的敏感性和特异性[2]。

2.3细菌学检查诊断布鲁氏菌病的金标准。患者血液、骨髓、乳汁、子宫分泌物均可做细菌培养。血和骨髓培养是最容易分离出布鲁氏菌的，后者较前者阳性率高。布鲁菌为专性需氧菌，生长缓慢是其特点，血培养阳性报警时间最短为82.6 h，最长为110 h，均值为(85.9±27.8) h，阳性血培养瓶转种平皿形成肉眼可见的菌落时间最短为48 h，最长为96 h，均值为(64.0±19.2) h。因此，怀疑布鲁氏菌的血标本应保留2周以上。血琼脂平板上孵育2-5天，可形成直径0.5-1 mm的光滑菌落，比临床实验室其他革兰阴性菌小，无色，凸起，边缘整齐(图2)。涂片为革兰阴性短小球杆菌，呈“细沙状”(图3)，氧化酶试验阳性，过氧化氢酶试验阳性。因此，临床上怀疑布鲁氏杆菌病的标本应延长培养时间，避免漏诊。此外，布鲁菌对人有极强的致病性，所有标本均应在生物安全2级以上水平实验室中处理，并在生物安全柜内进行[3]。

3讨论

布鲁氏菌病的易感人群包括在农牧区有病畜接触史人员、饮用过未经消毒灭菌乳品人群及与含菌培养标本接触的实验室工作人员。多数患者存在接触史，也有一部分患者无明确接触史[4]。本研究中5例患者从事牛羊养殖业，2例患者食用过不洁羊肉。发热是布病的特点之一，本文中10例患者均有发热，体温波动于37.5-40.0℃，波动大于1℃，热前多伴寒战畏寒。本文中患者都曾经在外院就诊，但由于该病是少见病，临床表现多样、缺乏特异性，容易被临床医生忽视，此外，细菌生长极其缓慢，血培养容易假阴性，造成漏诊，延误治疗。因此，临床医生对于不明原因发热的患者应仔细询问病史，了解有无牛羊接触史，结合临床表现和体征，确定诊断方向，对于临床考虑布病的患者，应提高血培养和骨髓培养的送检率[5]。

图2　马耳他布鲁菌镜下形态(×1000倍)

图3　血琼脂平板上马耳他布鲁菌菌落形态

实验室对于临床怀疑布病的血培养标本应延长培养时间至2周，以提高阳性率。血培养对布氏杆菌病的诊断和治疗起着极其重要的作用；实验室应积极与临床联系，加强技术人员对不常见疑难菌的培训，扩展细菌鉴定思路。由于菌血症是临床医学急症，准确鉴定病原菌至关重要。临床尽早采集血培养，实验室尽快培养出病原菌，对危重患者感染的诊断，治疗和预后有着极其重要的意义。

参考文献：

[1]唐志坚.布鲁氏菌病的流行病学调查及分析[J].中国卫生产业,2015,3:7.

[2]Díaz R,Casanova A,Ariza J.The Rose Bengal Test in human brucellosis:a neglected test for the diagnosis of a neglected disease[J].PLos Negl Trop Dis,2011,5:950.

[3]谢秀丽,徐英春,王辉.血培养对布氏杆菌病诊治的意义[J].中国处方药，2005,6(39):62.

[4]王艳玲,蔡静明,刘颖,等.我国布氏菌病危险因素的Meta分析[J].医学信息,2015,9:121.

[5]史艳玲,张翠花,赵红九,等.血培养检出马耳他布鲁氏菌1例报道分析[J].临床医学,2015,4:125.

(收稿日期：2015-07-14)

*通讯作者

文章编号：1007-4287(2015)12-2122-03