吉林省朝鲜族人群Diego血型系统抗原频率调查

吉林省朝鲜族人群Diego血型系统抗原频率调查

焦立新1,陈琳1,韩瑜1,杨帆1,林乾飞1,金成日1,刘铁梅2*

(1.吉林省血液中心，吉林 长春130033；2.吉林大学中日联谊医院，吉林 长春130033)

目前已经发现了30个人类血型系统，除了ABO和Rh外，还有其他一些血型系统，例如MNS、Diego、Duffy、Kidd等。这些血型系统抗原在吉林地区人群中的分布特征还不清楚，而临床输血实践中遇到的疑难问题又常与这些血型系统有关，掌握除ABO系统以外的其他抗原分布情况，有利于相配合供者的寻找及新生儿溶血病的预防。由于Dia主要分布于蒙古族人种中，因此Diego血型系统除了具有上述临床意义外,还具有重要的人类学意义，本文调查了本地区朝鲜族人群Diego血型系统Dia、Dib抗原分布情况。

1资料与方法

1.1对象随机抽取2013年1月-2014年12月无血缘关系的吉林省延吉市朝鲜族体检健康人1000名，包括男性542人，女性458人，ABO血型分布为A型286人，B型321人，O型281人，AB型112人。采取每位待检者静脉血5 ml,EDTA抗凝，置于4℃保存。

1.2序列特异性引物PCR(sequence-specific primer polymerase chain reaction,PCR-SSP)筛选Diego血型系统基因型采用天津秀鹏生物技术有限公司生产的特异性引物(引物包被在扩增板上，批号 201501011)。该试剂盒根据Genebank公布的Dia、Dib基因特异性序列设计；参照试剂盒说明书加入反应混合液和模板DNA；启动PCR循环程序，在Bio-Rad iCycler DNA扩增仪96℃2 min 1Cycle， 96℃20 s、68℃60 s 5Cycles，96℃20 s、65℃45 s、72℃30 s 10Cycles，96℃ 20 s、62℃45 s、72℃30 s 15Cycles，72℃3 min，4℃min～；扩增产物采用2.0%琼脂糖凝胶140-150 V,电泳15-20 min。

1.3血清学实验献血者红细胞用生理盐水洗涤3次，配成3%-5%红细胞悬液。采用间接抗球蛋白法进行Dia、Dib抗原检测，抗-Dia和-Dib血清为美国Bio-Rad公司试剂(批号 2216050)。

1.4数据分析计数资料采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1吉林省朝鲜族人Diego血型抗原分布

在1000例朝鲜族人样本中，经统计Dia抗原频率为0.112，Dib抗原频率1.0；Di(a+b+)112例，Di(a-b+)888例，未检测到Di(a+b-)和Di(a-b-)样本。经Hardy-Weinberg平衡检验，吉林省朝鲜族的Diego血型抗原分布符合Hardy-Weinberg平衡检验(表1)。Dia和Dib基因分型结果见图1。

图1　Diego血型抗原基因的电泳结果

2.2吉林地区朝鲜族人与其他人种的Dia基因频率比较

经与下表中各人种进行两组之间率的比较[1]，χ2检验P<0.05，均有显著性差异(见表2)。Dia频率在南美洲人群中较高(委内瑞拉、巴西)，而在欧洲、非洲、澳洲血统人群中较罕见，吉林地区朝鲜族中的频率高于大多数东南亚人群。

表1　吉林地区朝鲜族人群Diego血型抗原分布情况

表2　不同地区Dia频率研究结果

3讨论

编码人类红细胞Diego血型系统抗原的基因位于17号染色体17q12-q21上，名为SLC4K1。该基因编码的22个抗原都位于带3蛋白上，它是主要的细胞膜糖蛋白，在HCO3-和Cl-快速交换及CO2转运中起重要作用，Dia和Dib是Diego血型系统的两个常见表型。是由带3蛋白的第854位氨基酸替换形成，Dia为Leu854而Dib为Pro854。

1965年Layriss 和Arends首次在发生新生儿溶血病的委内瑞拉家庭中检出Dia抗原，1967年Thompson等检出了Dib，Dia和Dib两个抗原均为显性遗传[2]，Dia和Dib能引起新生儿溶血病和溶血性输血反应。由于Dia存在于东南亚人群中，因此东方人应特别注意抗-Dia抗体的存在。

Dia的频率在不同人种分布差异较大，在南美的委内瑞拉和巴西人群中分别为35.54%和54.16%，在北美的加拿大因纽特人中很罕见，而在白人和澳洲土著人中极为罕见，Dia似乎不存在于澳洲原住民及许多大西洋人群中，在非洲人群中不存在或极少存在，Dia在东南亚人群中频率2%-12%不等。至今未发现Di(a-b-)红细胞。中国汉族人的Dia抗原频率(antigen frequency)为5%左右，本文调查说明吉林地区朝鲜族人群中Dia频率(11.2%)高于汉族人，Dib频率则是100%。由于Dia在欧洲人群中罕见，进口谱细胞中经常不含有Di(a+)的细胞，是我们在临床输血工作中应该注意的，吉林地区朝鲜族是 Dia抗原频率较高的人群，应防止抗-Dia的漏检；本调查没有检测到Di(b-)细胞，抗-Dib抗体又没有天然产生的报道，因此抗-Dib在朝鲜族人中引起输血反应和新生儿溶血病的几率极低。吉林地区朝鲜族人群的Diego血型系统抗原分布有其自身特点，这部分人群输血治疗遇到的问题需要考虑其血型抗原分布特征，因此有必要继续筛查其他主要血型系统抗原分布，以便指导临床输血。

由于基因分型方法稳定可靠且费用较低，适合大样本筛查，可以鉴定血清学方法无法检测的血型系统；另外作为红细胞其他血型系统的一项辅助技术，也有助于提高谱红细胞定型的准确性。

参考文献：

[1]Daniel J.人类血型[M].北京：科学出版社,2007:119-120.

[2]胡丽华.临床输血检验[M].北京：中国医药科技出版社,2004:80-82.

(收稿日期：2015-07-14)

文章编号：1007-4287(2015)12-2129-02

*通讯作者

基金项目：吉林省卫生科研计划课题，项目编号“2013Z029”，“2012ZC028”