住院孕妇感染无乳链球菌的药物敏感性分析

住院孕妇感染无乳链球菌的药物敏感性分析

刘晶，赵娟*

(首都医科大学附属北京妇产医院 检验科，北京100026)

无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)是一种寄居于人类下消化道及泌尿生殖道的革兰氏阳性链球菌，常引起妊娠妇女生殖道感染，尤其是在围产期的孕妇，GBS可通过垂直传播，引起新生儿早发型感染，如败血症、脑膜炎、新生儿肺炎等，死亡率较高[1]。因此，产时给予抗生素治疗是预防新生儿早发型感染最有效的办法[1]。现将北京妇产医院住院孕妇分离到的GBS菌株进行药敏试验，以期指导临床合理、及时选用抗生素。

1材料与方法

1.1菌株来源2011年11月到2013年10月来自北京妇产医院有感染症状待分娩的孕妇和已经分娩的孕妇各类临床标本，其主要类型为生殖道分泌物，胎盘分泌物及血液等标本(同一患者不同部位标本考虑为同源，故只取一个部位计入),共计80株。

1.2仪器及试剂采用德国西门子公司的MicroScan WalkAway 40S1全自动细菌鉴定药敏仪及配套的鉴定药敏复合板。5%哥伦比亚血琼脂平板，3号麦康凯平板和含万古霉素巧克力平板及MH血平板均购于oxoid公司。质控菌株为金黄色葡萄球菌(ATCC29213、ATCC25923)购于卫生部临检中心。

1.3药敏纸片青霉素(penicillin )，氨苄西林(ampicillin),红霉素(erythromycin),克林霉素(clindamycin),万古霉素(vancomycin)，利奈唑烷(linezolid),左氧氟沙星(levofloxacin)，四环素(tetracycline)，以上纸片全部购自oxoid公司。

1.4试验方法将临床采集的各类标本直接接种于血琼脂平板、3号麦康凯平板和含万古霉素巧克力平板，在CO2环境下37℃孵育18-24 h，观察培养基生长情况，可疑菌落初步鉴定，革兰阳性球菌，灰白色，中等大小，β溶血，触酶阴性。CAMP试验阳性，其所用菌株为金黄色葡萄球菌ATCC25923。血培养阳性标本，需接种血琼脂平板及3号麦康凯平板，孵育等其他步骤同上。

1.5细菌鉴定挑取于经初步鉴定生长良好的纯菌落，在MicroScan WalkAway 40S1全自动细菌鉴定药敏仪上进行菌株鉴定。实验过程严格按照操作说明进行。判断标准遵循美国临床实验室标准委员会(NCCLS)的规定。用金黄色葡萄球菌ATCC29213作为阳性鉴定质控菌株。

1.6药敏试验标准K-B纸片扩散法，37℃培养18-24 h生长良好的无乳链球菌，挑取单个菌落溶于3 ml无菌生理盐

水中，将菌液浓度调至0.5麦氏单位，菌液接种于MH血平板，37℃培养18-24 h后测量抑菌环直径，按2010年美国临床和实验室标准协会(CLSI)药物敏感性判定标准判定药敏结果。

1.7统计处理数据采用WHONET5.6软件进行分析。

2结果

药敏结果显示80株无乳链球菌对利奈唑胺均敏感；对青霉素、氨苄西林及万古霉素除1株耐药外均敏感，对红霉素、克林霉素、四环素和左氧氟沙星耐药率分别为67.5%，53.75%，88.75%，47.5%，其中四环素的耐药率最高。药敏结果见表1。

表1　80株无乳链球菌对8种抗生素药敏结果　例数(%)

3讨论

无乳链球菌主要通过产道上行扩散感染子宫和胎膜，使带菌孕妇易发生早产、晚期流产、胎膜早破、死胎，也可引起子宫内膜炎、肾盂肾炎等[2]，另外，GBS可垂直传播，分娩期时易感染新生儿，引起新生儿肺炎、新生儿败血症及脑膜炎等[1]。本试验送检标本以生殖道分泌物和胎盘分泌物居多，考虑住院产妇有感染症状，常规筛查生殖道分泌物，因GBS垂直传播，胎膜早破等感染症状的产妇会送检胎盘分泌物，故其分离率较高，通过胎盘极易引起新生儿感染，应引起临床重视。

目前CLSI推荐临床无需进行药敏试验，可经验性用青霉素类抗生素治疗，因其对孕妇及新生儿为安全有效的药物，故常作为一线药物。对青霉素、氨苄西林敏感，依据CLSI指南，可判定头孢唑林、头孢曲松，头孢吡肟、阿莫西林/克拉维酸及美洛培南敏感。从本次试验的药敏结果分析，GBS对青霉素及氨苄青霉素、万古霉素的敏感率为98.75%，说明这些药物可作为经验用药，同时，随着无乳链球菌分离率的增加，已经出现了耐药菌株，并导致死胎，我们实验室分离到1株对青霉素，氨苄西林及万古霉素均耐药的菌株，这位产妇的孕育情况为死胎。《围产期GBS预防指南》[3]建议临床对孕35周-37周的孕妇进行阴道分泌物和直肠分泌物的无乳链球菌常规筛查，并对阳性者在产时给予抗生素预防，以避免GBS感染给母婴带来严重后果。利奈唑烷属于新型抗生素，目前因应用较少，耐药率为0，左氧氟沙星，红霉素，克林霉素和四环素都存在不同程度的耐药，与10年前北京地区GBS菌株药敏结果比较[4]，耐药率明显升高。

当孕妇青霉素轻度过敏时，可考虑选择头孢菌素类抗生素作为首选替代药物；如果过敏严重，可考虑使用红霉素和克林霉素；但是，随着这两种抗生素耐药率的增加，我们必须依靠实验室体外药敏实验结果选择敏感抗生素。对于GBS菌株为何如此高的耐药率，我们下一步会探讨其耐药基因及其类型。

总之，无乳链球菌在临床中分离率不断增加，新的耐药菌株不断出现，临床医生在进行抗感染治疗时，需要依据菌株体外药敏试验，合理使用抗生素，使患者得到又经济又快捷的治疗，同时提高新生儿的出生质量。

参考文献：

[1] Shore EM,Yudin MH.Choice of Antibiotic for Group B Streptococcus in Women in Labour Based on Antibiotic Sensitivity Testing[J].J Obstet Gynaecol Can,2012,34(3):230.

[2]Allen VM,Yudin MH,Bouchard C，et al.Management of group B streptococcal bacteriuria in pregnancy[J].J Obstet Gynaecol Can,2012,34(5):482.

[3]Recommendations for the Prevention of Perinatal Group B Streptococcal (GBS).Committee on Infectious Diseases and Committee on Fetus and Newborn Pediatrics,2011,128;611.

[4]王咏红,申阿东,佟月娟,等.12种抗生素对B族链球菌体外抗菌活性研究[J].中华儿科杂志,2001,39(2):85.

(收稿日期：2014-10-13)

作者简介：刘晶(1976-)，女，主管检验师，硕士研究生，主要从事细菌耐药机制的研究。

文章编号：1007-4287(2015)12-2110-02

*通讯作者