系统性红斑狼疮患者血清白细胞介素-37水平的变化及其临床意义

杨旭伟, 张　旸, 郑祥雄, 李　频, 林　芬, 邹式文

系统性红斑狼疮患者血清白细胞介素-37水平的变化及其临床意义

杨旭伟1, 张旸2, 郑祥雄1, 李频1, 林芬1, 邹式文1

摘要:目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血清白细胞介素-37(IL-37) 水平的变化及其相应的临床意义。方法采用ELISA方法测定74例SLE患者和51例健康者(对照组)血清IL-37水平，比较SLE患者和对照组IL-37水平，分析SLE患者IL-37水平与白细胞介素-6(IL-6)水平、α干扰素(INF-α)水平、补体C3、补体C4、SLE疾病活动度指数(SLEDAI)的相关关系，检测糖皮质激素治疗前后14例SLE患者血清IL-37水平。结果与对照组比较，SLE患者血清IL-37水平明显升高，差别有统计学意义；SLE患者血清IL-37、IL-6及INF-α水平存在正相关关系，但与C3、C4、SLEDAI无显著相关；14例SLE患者经过糖皮质激素治疗后，其IL-37水平显著降低。结论SLE患者血清IL-37水平高于健康人；经过糖皮质激素治疗后，SLE患者的血清IL-37水平下降。

关键词:红斑狼疮，系统性； 白细胞介素-1； 细胞因子类

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)是一种多器官、多系统受累的自身免疫性炎症性疾病。SLE患者体内的免疫调节功能出现异常，T调节细胞(T regulatory cells, Tregs)与Th17细胞的比例失去平衡, 细胞因子之间失去平衡[1-2]。白细胞介素-37(interleukin-37, IL-37)是一种抗炎性细胞因子，是固有免疫应答的天然抑制物[3]。本研究检测SLE患者血清IL-37的水平，观察其与白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)、α干扰素(interferon-α, IFN-α)、补体C3、补体C4和SLE疾病活动度指数(SLE activity index, SLEDAI)的关系，并探讨糖皮质激素治疗前后SLE患者血清IL-37水平的变化。

1对象与方法

1.1对象选择2013年1-12月在笔者医院住院的74例SLE患者，均符合1982年美国风湿病学院修订的诊断标准，其中女性71例，男性3例，年龄(31.2±11.9)岁(13～60岁)，病程1月～12年。入院时SLEDAI积分0～4分者4例，5～9分者19例，10～14分者25例，≥15分者26例。所有病例无合并感染性疾病、恶性肿瘤或其他风湿性疾病。选择同期健康体检者51例作为对照组，其中女性48例，男性3例，年龄(35.5±13.4)岁(12～69岁)。2组之间性别、年龄的差别无统计学意义，具有可比性。所有入选对象均知情并同意。

1.2方法

1.2.1标本采集收集74例SLE患者入院时的血清及糖皮质激素治疗后的14例患者的血清。所有待检测的对象均在清晨空腹采集静脉血3 mL，室温放置30 min后，1 000 r/min离心5 min，收集血清，-70 ℃保存待测。

1.2.2血清IL-37、IL-6、IFN-α的检测采用ELISA法，所有标本均采用同一批号试剂(人血清IL-37、IL-6、IFN-α ELISA试剂批号均为201404，美国TSZ公司)同时测定。严格按试剂盒说明书操作。

1.2.3补体C3、C4的测定采用速率散射比浊法测定(补体C3检测试剂批号：M309352；补体C4检测试剂批号：M308279，均为美国Beckman-Coulter公司)。

2结果

2.1血清IL-37水平对照组血清IL-37水平为(25.945 2±7.489 4)pg/mL，SLE组为(50.737 6±63.791 1)pg/mL，差别具有统计学意义(P=0.000)。

2.2IL-6和IFN-α水平对照组血清IL-6水平为(20.050 1±7.367 1)ng/L，SLE组为(36.826 4±32.164 8)ng/L，差别具有统计学意义(P=0.000)。对照组血清IFN-α水平为(28.357 3±9.251 4)μg/L，SLE组为(48.555 0±58.796 8)μg/L，差别无统计学意义(P=0.126)。

2.3糖皮质激素治疗前后血清IL-37水平变化SLE患者接受糖皮质激素治疗前的血清IL-37水平为(40.243 8 ±26.892 1)pg/mL，治疗后为(27.435 1±10.706 8)pg/mL，差别具有统计学意义(P=0.001)。14例SLE患者临床资料及治疗前后血清IL-37水平见表1。

表1　14例SLE患者临床资料及接受甲基强的松龙治疗前后比较

SLE：系统性红斑狼疮； SLEDAI：SLE疾病活动度指数.

2.4SLE患者血清IL-37水平与IL-6、IFN-α、补体C3、补体C4、SLEDAI的相关性分析SLE患者血清IL-37与IL-6、IFN-α成正相关的关系(图1，2),与补体C3无相关关系(R=-0.135，P=0.253),与C4无相关关系(R=-0.078，P=0.507),与SLEDAI无相关关系(R=-0.016，P=0.891)。

3讨论

SLE是常见的自身免疫性疾病。促炎性细胞因子、抗炎性细胞因子在SLE的发生、发展中起重要作用。促炎性细胞因子IL-6和IFN-α均参与了SLE的发病。SLE患者血中含有高滴度的IL-6和IFN-α[4]。Lyn缺陷的小鼠的B淋巴细胞产生大量的IL-6，IL-6促进B淋巴细胞和T淋巴细胞过度活

SLE：系统性红斑狼疮； IL-6：白细胞介素-6； IL-37：白细胞介素-37.　R=0.884，P=0.000.图1　Spearman相关分析SLE患者血清IL-37水平与IL-6水平的相关Fig 1　Correlation between IL-37 levels and IL-6 levels in SLE patients by Spearman analysis

SLE：系统性红斑狼疮； IFN-α：α干扰素； IL-37：白细胞介素-37.　R=0.74，P=0.000.图2　Spearman相关分析SLE患者血清IL-37水平与IFN-α水平的相关性Fig 2　Correlation between IL-37 levels and IFN-α levels in SLE patients by Spearman analysis

化，小鼠在这种高水平的IL-6的细胞因子环境中易发展成SLE或其他自身免疫性疾病[5]。IFN-α促进单核细胞分化为树突状细胞(dendritic cells,DC)，并促进不成熟的DC变为成熟的DC。IFN-α促进活化的B淋巴细胞转化为分泌抗体的浆细胞。抗原抗体复合物被浆细胞样DC摄取后，通过TLR 7/9通路，又产生更多的IFN-α。IFN-α参与Treg与效应T细胞的平衡。增多的IFN-α会增强效应T细胞的功能，抑制Treg的功能[6]。本研究中，SLE患者血清IL-6水平高于对照组。

IL-37是一种抗炎性细胞因子[7]。其亚型IL-37b的成熟体与IL-18BP和IL-18Rα的Fc段结合，抑制IL-18信号传导通路，导致NF-κB通路受抑制，从而抑制炎症反应；IL-37b的成熟体进入细胞核，与Smad3结合，抑制p38MAPK的磷酸化，最终导致Toll样受体(TLR)诱导的促炎性细胞因子的mRNA的转录被阻止。转IL-37基因的小鼠能避免出现LPS诱发的休克，也能避免出现右旋糖苷诱发的结肠炎。在上皮细胞或巨噬细胞中表达的IL-37，能完全抑制促炎性细胞因子的合成[8]。在体外，重组人IL-37能抑制SLE患者血单个核细胞生产IL-6、TNF-α、和IL-1β[9]。用siRNA干扰外周血单个核细胞表达IL-37b,导致IL-6、TNF-α、和IL-1β等促炎性细胞因子的合成大幅增加[8]。

本研究中，IL-37在健康人血清中呈低度表达，在SLE患者体内的表达却显著升高，并且与促炎性细胞因子IL-6和IFN-α的水平呈正相关。因此，体内的IL-37可能通过负反馈的机制来抑制SLE过度的炎症反应，在SLE的发病过程中起到保护作用。升高的IL-37可能对抑制体内促炎性细胞因子的生成有一定的作用，以尽可能把炎症反应控制在一定的范围，减少过度的炎症反应对正常的组织或器官所造成的损害。

Song等报道，糖皮质激素能下调SLE患者体内促炎性细胞因子水平、血清IL-37水平和外周血单个核细胞IL-37 mRNA的表达[10]。本研究中，14例SLE患者经过甲基强的松龙治疗后，血清IL-37水平也显著下降。由于糖皮质激素抑制了SLE的炎症反应，导致促炎性细胞因子水平下降，随后机体可能通过负反馈调节机制，SLE患者的IL-37水平随着下调。

本研究中，IL-37水平与补体C3、C4、SLEDAI之间不存在相关关系，与其他报道不同[9]，这可能与测量技术不同有关，或与本研究病例数太少有关。SLEDAI评分标准中不涉及肺动脉高压和肺间质性病变，表明SLEDAI评分标准有一定的局限性。表1中序号为3的SLE患者出现严重的全身多发性弥漫性大疱性皮疹。由于皮疹在SLEDAI评分标准中仅占1分，该患者SLEDAI积分只为5分，但其IL-37水平显著升高，为36.591 5 pg/mL。因此，如果能综合应用补体C3、C4、SLEDAI、抗ds-DNA、血常规、尿常规、IL-37等多种指标，就可能更准确地判断SLE的炎症程度，从而指导SLE的临床治疗。

参考文献：

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[9]Ye L,Ji L,Wen Z,etal. IL-37 inhibits the production of inflammatory cytokines in peripheral blood mononuclear cells of patients with systemic lupus erythematosus: its correlation with disease activity[J].JTranslMed,2014,12(69):1-8.

[10]Song L, Qiu F, Fan Y,etal. Glucocorticoid regulates interleukin-37 in systemic lupus erythematosus[J].JClinImmunol,2013,33(1):111-117.

(编辑:张慧茹)

Serum IL-37 Levels in Patients with SLE and its Association with Clinical Characteristics

YANG Xuwei1, ZHANG Yang2, ZHENG Xiangxiong1, LI Pin1, LIN Fen1, ZOU Shiwen1

1.Department of Rheumatology, 2.Department of Laboratory,Fujian Medical University Union Hospital, Fuzhou 350001, China

ABSTRACT:ObjectiveTo explore the change of serum IL-37 levels in patients with systemic lupus erythematosus (SLE) and its association with clinical characteristics.MethodsThe serum IL-37 levels in 74 patients with SLE and 51 healthy people were measured by way of ELISA, and then IL-37 levels of both groups were compared; the correlation between IL-37 levels and α-interferon (IFN-α) levels, interleukin 6(IL-6) levels, complement 3(C3), complement 4(C4), SLE disease activity index (SLEDAI) were analyzed.Also IL-37 levels in 14 patients were measured before and after glucocorticoid therapy.ResultsCompared with healthy subjects, serum IL-37 levels in SLE patients is higher with a statistical significance.A significantly positive correlation was observed between serum IL-37 levels and serum IL-6 levels or serum INF-α levels.There were no significant correlations between serum IL-37 levels and C3, C4, SLEDAI; the serum IL-37 levels in 14 patients with SLE dropped significantly after the glucocorticoid therapy.ConclusionSerum IL-37 levels in patients with SLE were higher than those in healthy subjects.Serum IL-37 levels in patients with SLE dropped after the administration of glucocorticoid and this change was statistically significant.

KEY WORDS:lupus erythematosus, systemic； interleukin-1； cytokines

作者简介:杨旭伟(1968-)，副主任医师，医学博士. Email:yangxwla@126.com

收稿日期:2014-10-16

中图分类号:R392.11； R392.12； R593.24； R593.241； R977.6

文献标志码:A

文章编号:1672-4194(2015)01-0020-04

作者单位: 福建医科大学 附属协和医院,福州3500011.风湿科；2.检验科