银鲳鱼脂肪酸的气相色谱-质谱分析

刁全平，郭 华，吕琳琳，李铁纯，侯冬岩

(鞍山师范学院 化学与生命科学学院,辽宁 鞍山 114007)

银鲳鱼脂肪酸的气相色谱-质谱分析

刁全平，郭 华，吕琳琳，李铁纯，侯冬岩*

(鞍山师范学院 化学与生命科学学院,辽宁 鞍山 114007)

为了解银鲳鱼中脂肪酸的组成，采用Bligh-Dyer提取法对样品中脂肪油进行提取，甲酯化后利用气相色谱-质谱联用仪进行分析测定.结果发现从银鲳鱼中鉴定出21种脂肪酸，饱和脂肪酸9种，相对百分含量占总检出量的36.92%,不饱和脂肪酸12种，相对百分含量占总检出量的63.08%，其中EPA和DHA的相对百分含量分别为3.45%和13.18%.

银鲳鱼；脂肪酸；气相色谱-质谱联用

银鲳鱼(Pampusargenteus)属于鲈形目，鲳科，别名镜鱼、鮀鱼，体短而高，极侧扁，略呈菱形，头较小，吻圆，口小，牙细，以甲壳类等动物为食，是我国沿海重要的经济鱼类之一，广泛分布于黄海、渤海、东海和南海各海区[1]，其肉质细嫩、味道鲜美，含有丰富的蛋白质、微量元素等营养物质[2]，具有很高的营养价值和经济价值，深受人们的喜爱，在中国海洋渔业中占重要地位.

目前关于银鲳鱼养殖、加工等方面的研究较多，而有效化学活性成分的研究较少.本文采用Bligh-Dyer提取法提取银鲳鱼肉的脂肪油，然后进行甲酯化处理，再利用GC-MS对其进行分析测定[3]，分离鉴定其中的脂肪酸成分，并测定其含量，寻求其成分与功效之间的关系，为银鲳鱼的进一步深度开发提供一定的支持.

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

银鲳鱼购自鞍山市水产品市场，三氯甲烷、甲醇、氢氧化钾、正己烷、无水硫酸钠等化学试剂均为分析纯，水为自制二次蒸馏水.

1.2 仪器与设备

HP6890/5973型气相色谱-质谱联用仪(美国惠普公司)；N-1000D-W微型旋转蒸发器(日本东京理化器械株式会社)；85-1型恒温磁力搅拌器(常州国华电器有限公司)；80-2B台式离心机(上海安亭科学仪器厂)；KQ-250B型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司).

1.3 方法

1.3.1 脂肪油的提取 取银鲳鱼一条，用剪刀将皮剥离，取背部肌肉，用四分法称取样品14.00 g，置于250 mL锥形瓶中，加入140 mL甲醇，70 mL三氯甲烷和42 mL蒸馏水，胶塞盖紧，室温下电磁搅拌20 h后，加入70 mL三氯甲烷和70 mL蒸馏水，摇匀后过滤，分液取下层有机相，旋转蒸发回收溶剂，得脂肪油2.48 g.

1.3.2 脂肪油的甲酯化 用12 mL正己烷将鱼油溶解，加入3 mL浓度为0.5 mol/L的氢氧化钾-甲醇溶液在70 ℃水浴中回流20 min，冷却后加入15 mL蒸馏水，超声振荡5 min，然后以3 000 r/min离心10 min，取上层正己烷溶液用无水硫酸钠干燥后，待GC/MS分析备用.1.3.3 脂肪酸的分析鉴定 色谱条件：色谱柱为HP-5弹性石英毛细管柱(25 m×0.20 mm×0.33 μm)；进样口温度300 ℃；程序升温：100 ℃→200 ℃,升温速率为10 ℃/min，200 ℃→280 ℃升温速率为5 ℃/min，280 ℃保持5 min；分流比100∶1，溶剂延迟3 min．

质谱条件：全扫描，四级杆质量分析器，扫描范围为20～500 m/z；离子源为电子轰击源，离子源温度为230 ℃；电离电压为70 eV；电子倍增器电压为1 988 V；发射电流为34.6 μA；接口温度为230 ℃．

定性分析:取经1.3.2项处理过的样品0.4 μL，用GC/MS进行分析鉴定．通过G1701BA化学工作站数据处理系统，检索NIST98谱图库，确定样品中各个化学成分．

定量分析:通过G1701 BA化学工作站数据处理系统，按峰面积归一化法进行定量分析，分别求得各化学成分的相对百分含量

X=Ai/∑Ai×100%.

2 结果与讨论

2.1 银鲳鱼脂肪酸甲酯总离子流谱图

按照步骤1.3.3进行实验，得银鲳鱼脂肪酸甲酯总离子流谱图如图1所示，并将样品中的脂肪酸种类及其相对百分含量列于表1.

对表1进行分析，从银鲳鱼中鉴定出21种脂肪酸，饱和脂肪酸9种，相对百分含量占总检出量的36.92%，不饱和脂肪酸12种，相对百分含量占总检出量的63.08%.

9-十六碳烯酸(棕榈油酸)和9-十八碳烯酸(油酸)能降低胆固醇和低密度脂蛋白，具有治疗老年人心脑血管疾病等功能[4～5]，银鲳鱼中含量分别为5.69%和26.90%.5,8,11,14,17-二十碳五烯酸(EPA)和4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸(DHA)被称为“脑黄金”，能够对心脑血管疾病起到预防作用[6]，银鲳鱼中含量分别为3.45%和13.18%，其中，DHA的相对百分含量是海参中DHA的相对百分含量的5倍[7].

2.2 讨论

本文采用Bligh-Dyer法在室温下对银鲳鱼中脂肪油进行提取，尽量避免脂肪酸在提取过程中的损失和多不饱和脂肪酸的变性，提高其脂肪酸分析的准确度.银鲳鱼中的脂肪酸组成丰富，不饱和脂肪酸含量高，对于预防心血管病等疾病具有很高的药用价值，本文的研究为银鲳鱼资源的进一步开发提供一定的依据.

表1 银鲳鱼脂肪油中脂肪酸(以酯表示)的组成及相对含量

[1] 许玉甫，周军，张国胜，等.河北沿海银鲳渔业资源现状分析[J].河北渔业，2009，15(6)：4-6，15.

[2] 徐善良，王丹丽，徐继林，等.东海银鲳(Pampusargenteus)、灰鲳(P.cinereus)和中国鲳(P.sinensis)肌肉主要营养成分分析与评价[J].海洋与湖沼，2012，43(4)：775-782.

[3] 刁全平，侯冬岩，回瑞华，等.青石斑鱼脂肪酸的分析及其营养价值评价[J].营养学报，2012，34(4)：411-413.

[4] 王维群．营养学[M]．北京：高等教育出版社，2005：76-258．

[5] 徐华顺，罗玉萍，李思光.产棕榈油酸酵母发酵条件的研究[J].中国油脂，1999，24(6)：53-55.

[6] 陈丽花，肖作兵，周培根.中国对虾的脂肪酸分析及其营养价值评价[J].上海海洋大学学报,2010,19(1)：125-129.

[7] 刁全平，侯冬岩，回瑞华，等.海参脂肪酸的气相色谱-质谱分析[J].鞍山师范学院学报，2008，10(4)：33-35.

DIAO Quanping,GUO Hua,LÜ Linlin,LI Tiechun,HOU Dongyan*

(SchoolofChemistryandLifeScience,AnshanNormalUniversity,AnshanLiaoning114007,China)

(责任编辑：陈 欣)

Study on fatty acid inPampusargenteus

Composition and contents of fatty acid inPampusargenteuswas analyzed.The fatty oil was extracted by Bligh-Dyer method and esterified by sodium hydroxide-methanol,and the fatty acids methanol esters were separated and identified by gas chromatography-mass spectrometry.The results showed that 9 kinds of saturated fatty acids (36.92 %) and 12 kinds of unsaturated fatty acids (63.08%) were identified inPampusargenteus,and the contents of EPA and DHA were 3.45% and 13.18% respectively. Key wordsPampusargenteus；fatty acid；Gas Chromatography-Mass Spectrometry

2015-10-03

刁全平(1980-)，男，山东潍坊人，鞍山师范学院化学与生命科学学院副教授，主要从事天然产物有效成分分析.

O656.31

A

1008-2441(2015)06-0051-03