小儿薄荷酚洗剂的薄层色谱及HPLC鉴别研究

范永春，孙 晶，曾白林，何丹丹

(1.江苏省中医药研究院，南京 210028； 2江苏海智生物医药有限公司，南京 210061)

1.樟脑

1-3.样品 4-5.薄荷脑对照品 6.阴性对照

1-3.样品 4.阴性对照 5.苯酚对照品



小儿薄荷酚洗剂的薄层色谱及HPLC鉴别研究

范永春1，孙 晶2，曾白林1，何丹丹1

(1.江苏省中医药研究院，南京 210028； 2江苏海智生物医药有限公司，南京 210061)

目的：建立小儿薄荷酚洗剂的薄层色谱及HPLC鉴别方法，为制定其质量控制标准提供依据。方法：采用薄层色谱法鉴别制剂中薄荷脑、苯酚，采用HPLC鉴别制剂中樟脑。结果：薄荷脑、苯酚的薄层色谱具有鉴别特征，斑点清晰，阴性无干扰，樟脑的HPLC图谱分离度好，阴性无干扰。结论：本方法操作简单，具有良好的重现性和专属性，可用于该制剂的质量控制。

小儿薄荷酚洗剂，薄层色谱鉴别，HPLC鉴别，质量控制

小儿薄荷酚洗剂是本院自制的医院制剂，由樟脑、薄荷脑和苯酚组成，具有清凉止痒作用，临床上用于小儿痱子及汗疹。原制剂标准中仅有简单的理化鉴别，且重现性不是太好，为了更好地控制该制剂质量，笔者采用薄层色谱和HPLC法对其中的薄荷脑、苯酚和樟脑进行定性鉴别。现报道如下。

1 仪器与试药

202-O型电热恒温干燥箱(上海浦东跃欣科学仪器厂)；BS 124S万分之一电子分析天平(Sartorius,德国)；waters高效液相色谱仪(Waters2996型PDA检测器，美国Waters公司)；玻璃点样毛细管(华西医科大学仪器厂)。硅胶G(薄层层析用，青岛海洋化工有限公司)；薄荷脑对照品(含量测定用，批号110728-200508)、苯酚对照品(含量测定用，批号100509-201203)、樟脑对照品(含量测定用，批号110747-201409)，均购自中国食品药品检定研究院；小儿薄荷酚洗剂(江苏省中医药研究院制剂室生产，批号14029)；薄层色谱所用试剂均为分析纯，HPLC所用试剂均为色谱纯，水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 樟脑的鉴别[1]

2.1.1 液相色谱条件 仪器：waters2996型高效液相色谱仪，PDA检测器，色谱柱：waters symmetry C18(150 mm×3.9 mm，5 μm),甲醇-水(70∶30)为流动相，检测波长为288 nm，流速：1 ml/min，柱温：30 ℃。

2.1.2 供试品溶液的制备 取本品1 ml，加入10 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45 μm)滤过，取续滤液作为供试品溶液。

2.1.3 阴性对照液的制备 取未加樟脑的阴性制剂，按“2.1.2”项下方法制成阴性对照溶液。

2.1.4 对照品溶液的制备 取樟脑对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 ml含0.6 mg的溶液， 作为对照品溶液。

2.1.5 HPLC法鉴别 照高效液相色谱法[《中国药典》2010年版(二部)附录ⅤD]试验，分别吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各10 μl，注入液相色谱仪。供试品呈现与对照品保留时间相同的色谱峰。阴性对照无干扰。见图1。

1.樟脑

图1 对照品(A)

供试品(B)阴性对照(C)HPLC色谱图

2.2 薄荷脑鉴别[2-3]

2.2.1 供试品溶液的制备 取本品40 ml，放入500 ml圆底烧瓶中，加水100 ml，连接挥发油提取器，自提取器上端加水至刻度，再加入石油醚(60～90 ℃)4 ml，连接冷凝管回流40 min，放冷，取挥发油提取器中石油醚上清液，作为供试品溶液。

2.2.2 阴性对照液的制备 取未加薄荷脑的阴性制剂40 ml，按“2.2.1”项下方法制成阴性对照溶液。

2.2.3 对照品溶液的制备 取薄荷脑对照品适量，精密称定，加石油醚制成每1 ml约含8.0 mg的溶液，作为对照品溶液。

2.2.4 薄层色谱 照薄层色谱法[《中国药典》2010年版(二部)附录ⅤB]试验，吸取上述三种溶液各5 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯(9∶2)为展开剂，预饱和20 min，展开，取出并晾干，喷以10%磷钼酸乙醇溶液显色，90 ℃加热到斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同的蓝色斑点。见图2。

1-3.样品 4-5.薄荷脑对照品 6.阴性对照

图2 薄荷脑的薄层色谱图谱

2.3 苯酚的鉴别[4]

2.3.1 供试品溶液的制备 取本品30 ml，置分液漏斗中，加石油醚(60～90 ℃)30 ml，振摇提取，取下层水液作为供试品溶液。

2.3.2 阴性对照液的制备 取未加苯酚的阴性制剂30 ml，按“2.3.1”项下方法制备阴性对照溶液。

2.3.3 对照品溶液的制备 取苯酚对照品适量，精密称定，加三氯甲烷制成每1 ml约含12.0 mg的溶液，作为对照品溶液。

2.3.4 薄层色谱 照薄层色谱法[《中国药典》2010年版(二部)附录ⅤB]试验，吸取上述供试品溶液、阴性对照溶液各10 μl，对照品溶液5 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90 ℃)-乙酸乙酯(17∶3)为展开剂，预饱和20 min，展开，取出并晾干，喷以2%对二甲氨基苯甲醛40%硫酸乙醇溶液显色，90 ℃加热到斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同的红色斑点。见图3。

1-3.样品 4.阴性对照 5.苯酚对照品

图3 苯酚的薄层色谱图

3 讨论

樟脑的鉴别中，以苯-乙酸乙酯(9∶2)为展开剂展开，用5%香草醛硫酸溶液显色，则樟脑斑点未能看到，用10%磷钼酸乙醇溶液显色，樟脑斑点呈微弱的浅黄色，几乎看不到，没有看到文献中报道的蓝色及其他颜色的斑点。而气相色谱法鉴别较为复杂[5]，故改用高效液相色谱法，方法简便可靠，有利于樟脑的定性鉴别。

薄荷脑的鉴别中，先后以苯-乙酸乙酯(9∶2)和正己烷-乙酸乙酯(85∶15)为展开剂，苯酚和薄荷脑分离度较差，后改用不同比例和不同试剂的展开剂，均未得到理想的分离效果。笔者改变提取方法，利用薄荷脑较易挥发，而苯酚沸点(182 ℃)较高的特性，采用挥发油提取器提取薄荷脑，取挥发油提取器中石油醚上清液作为供试液，从而使其得到分离。若用圆底烧瓶中的水液进行苯酚的薄层色谱鉴别，仍有部分的薄荷脑产生干扰。在进行加热显色时，加热时间较长(7～10 min)才会出现薄荷脑的斑点。

对于苯酚的鉴别，利用苯酚在水中溶解，在石油醚中几乎不溶解，而薄荷脑在石油醚中溶解，在水中不溶解的性质，以石油醚加以萃取，取下层水液作为供试液加以分离。

1 宗永辉，余佳.高效液相色谱法测定硫樟脑涂剂中樟脑含量[J].中国医院药学杂志，2008，28(15)：1316-1317

2 张锦. 复方滴鼻液中薄荷脑与樟脑的鉴别[J].中国医院药学杂志，2006,26(5)：635

3 余昶，蒋仁发，黄文进.复方软膏中薄荷脑和樟脑鉴别方法的改进[J].海峡药学，2007,19(3):55-56

4 陈祥胜，张长滨. 祛瘀止痛酊的薄层定性鉴别[J].湖北中医学院学报，2005,7(3)：30-31

5 管中玉，赵吉平.跌伤灵贴膏质量标准研究[J].湖北中医杂志，2011,33(4)：74

2015-06-23

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1006-5687(2015)05-0020-02