清咽滴丸中薄荷脑含量测定

彭振宇，隋思博

（吉林省药品检验所，吉林 长春 130000）

1 含量测定方法研究

1.1 仪器与试药

超声仪、岛津GC-2010plus 气相色谱仪，FID检测器，工作站。无水乙醇、乙酸乙酯（均为分析纯）。

对照品：（1）龙脑：中国药品生物制品检定所，批号110881-201107，供含量测定用。（2）薄荷脑：中国药品生物制品检定所，批号110728-200506，供含量测定用。（3）异龙脑（中国药品生物制品检定所）购置，批号：111512-200802。

样品：清咽滴丸（批号627009，627010、627011）。

1.2 色谱条件确定

1.2.1 色谱柱选择

根据文献报道和实验，确定以Agilent DB-WAXETR，毛细管柱（柱长30 m，内径0.25 mm，膜厚0.25 μm）。为色谱柱。

1.2.2 柱温的选择

比较130℃和140℃的柱温，结果在130℃的条件下，薄荷脑、异龙脑、龙脑的分离度比较好。

1.2.3 色谱条件

色谱柱：Agilent DB-WAXETR，毛细管柱（柱长30 m，内径0.25 mm，膜厚0.25 μm）。进样口温度200℃，柱温130℃，检测器温度210℃，载气流速：0.8 ml/min。理论板数按龙脑计应不低于5000。

1.2.4 提取溶剂的选择

取样品（批号627010）适量，研细，取约0.5 g，制备两份，置25 mL容量瓶中分别精密加入无水乙醇、乙酸乙酯定容，超声20分钟。结果样品在无水乙醇中溶解较好。所以选择无水乙醇为溶剂。

1.2.5 超声时间的考察

取样品（批号627010）适量，研细，取约0.5 g至25 mL容量瓶中，加入无水乙醇适量，分别超声20、30、40分钟放冷，定容至刻度，摇匀后用0.45 μm微孔滤膜过滤，即得。按薄荷脑、异龙脑+龙脑的峰面积与取样量比值计算结果，考察、选择超声时间。（结果见表1）

表1 超声时间考察结果

结果，超声20、30、40分钟，两种比值无明显差异，考虑到节省时间，选择超声20分钟。

2 溶液的配制

2.1 对照溶液的配制

取薄荷脑对照品适量，精密称定，加无水乙醇制成每1 mL含薄荷脑1.5 mg，摇匀，即得。

2.2 供试品的溶液配制

取清咽滴丸适量，研细，取约0.5 g，精密称定，置25 mL容量瓶中，加入无水乙醇适量，超声处理20分钟取出放冷，用无水乙醇定容到刻度，摇均，用0.45 μm微孔滤膜滤过，即得。

3 测定方法试验

精密吸取各对照品溶液与供试品溶液各1 μL，注入气相色谱仪，测定即得。

3.1 标准曲线的制备

薄荷脑标准曲线：取薄荷脑对照品适量，精密称定，加入无水乙醇制成每1 mL中含薄荷脑0.1503、0.2513、1.5026、3.0053、7.5132、15.0264 mg的对照品溶液，分别精密吸取1 μl，注入气相色谱仪中，按“2.3”色谱条件分析，分别测得各浓度对照品的峰面积，以对照品的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标求回归方程：

薄荷脑Y=185112.69X-34764，r=0.9998。结果表明薄荷脑在0.1503～15.0264 μg范围内线性良好。（薄荷脑标准曲线结果见表2）

表2 薄荷脑的标准曲线

3.2 进样重复性

取同一批样品（627010）适量研细，取约0.5 g，精密称定，按照上述供试品的溶液配制操作，按上述色谱条件分析，连续进样6次，测定样品中薄荷脑、龙脑、异龙脑的峰面积，以样品中的薄荷脑、异龙脑、龙脑的峰面积值计算，RSD分别为0.75%、0.85%、0.86%，符合要求。（重复性试验结果见表3）。

表3 进样重复性

3.3 重现性实验

取同一批样品适量（627010）研细，取0.5 g，精密称定，共6份，按照“上述供试液配制操作和色谱条件进行分析，样品中薄荷脑含量的平均为78.56 mg/gRSD为0.54%。样品中龙脑含量的平均为12.85 mg/g，RSD为1.99%，异龙脑含量平均为7.69 mg/g，RSD为1.94%。RSD为0.60% ，符合要求。（重现性结果见表4）。

3.4 回收率实验

薄荷脑回收实验：取同一批样品（627010），研细，取约0.25 g，精密称定，共6份，分别精密加入每1 mL含薄荷脑15.0264 mg的对照品溶液1.3 mL，按照溶液配制操作，制得回收率的供试品溶液，按上述色谱条件分析，计算回收率，结果薄荷脑的回收率平均为101.03%。RSD为1.85%。（结果见表5）。

表4 重现性实验

表5 薄荷脑的回收实验

4 限度制定

本品每1 g含薄荷脑（C10H20O）不得少于54. 0 mg。