非小细胞肺癌患者放疗前后血清VEGF的水平变化及临床意义*

马瑾璐 金龙 韩苏夏 郭希婧 何晨琛 田美丽 吴宁丽

(1.西安交通大学第一附属医院肿瘤放疗科，陕西 西安 710061;2.西安昆仑医院，陕西 西安 710016)

非小细胞肺癌患者放疗前后血清VEGF的水平变化及临床意义*

马瑾璐1金龙1韩苏夏1郭希婧1何晨琛1田美丽1吴宁丽2

(1.西安交通大学第一附属医院肿瘤放疗科，陕西 西安 710061;2.西安昆仑医院，陕西 西安 710016)

目的 探讨非小细胞肺癌患者放疗前后血清血管内皮生长因子(VEGF)水平与近期疗效间的关系。方法 对46例非小细胞肺癌患者，采用常规三维适形照射(3D-CRT)及调强照射(IMRT)。用ELISA法检测患者放疗前1天、放疗开始后7天及1个月时的血清VEGF含量。按近期疗效分为有效组与无效组，分析比较近期疗效与血清VEGF水平之间的关系。结果 46例非小细胞肺癌患者经放疗6～7周，共30～33次，总治疗剂量为60～66Gy。近期疗效评价：46例患者中CR 2例，PR 28例，NC 10例，PD 6例，有效率(CR+PR)为65.2%，无效率(NC+PD)为34.8%。有效组放疗前后血清VEGF水平均低于无效组，差异有统计学意义(P<0.05)；放疗开始后1周VEGF水平与放疗前相当，而放疗1个月时VEGF水平明显低于放疗前，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 非小细胞肺癌患者血清VEGF水平可能是一个有前景的生物学标志物，可用来预测放疗敏感性和非小细胞肺癌患者的预后。

非小细胞肺癌; 血管内皮生长因子; 放射治疗

放射治疗是局部晚期非小细胞肺癌的主要治疗手段之一。既往研究表明，非小细胞肺癌的局控率与放疗剂量成正相关[1]。近年随着三维适形放疗(three dimensional conformal radiation ther-apy，3D-CRT) 和调强放疗(intensity modulated radiation therapy，IMRT) 技术的应用，在正常组织受到较好地保护情况下，靶区的照射剂量也能得到有效提高[2]。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)是与肿瘤生长、侵袭和转移相关的主要调控因子之一[3,4]。研究证实，肺癌VEGF表达与肿瘤组织增生及淋巴结转移关系密切，患者血清VEGF水平与临床发病特征及预后之间有着密切关系[5]。

1 资料与方法

1.1 研究对象 为西安交通大学第一附属医院肿瘤放疗科2013年2月～8月收治经病理证实确诊的病历资料完整患者46例，其中男38例，女8例，年龄45～75岁。病理分期：Ⅱ期2例，Ⅲ期40例，Ⅳ期4例；腺癌25例，鳞癌20例，大细胞癌1例。均未接受手术治疗，患者的卡氏评分≥70分；血生化检查：血红蛋白≥12g/dL，白细胞≥4.0×109/L，血小板≥100.0×109/L；肌酐≤1.0×正常值上限，总胆红素≤1.0×正常值上限，谷草转氨酶和谷丙转氨酶≤2.5×正常值上限，AKP≤5.0×正常值上限；患者放疗前6个月内未接受过放射治疗，均签署放疗知情同意书。

1.2 查体及辅助检查 治疗前2周内对患者进行详细的病史询问和全面的体格检查，包括全血细胞计数、肝肾功能检查，心电图、胸部CT，腹部B超或腹部CT检查。放疗期间为了观察放疗可能带来的不良反应，每周对患者进行体格检查，记录呼吸道症状，同时进行全血细胞计数检查。如遇特殊病例，每2～3天重复检查。

1.3 放射治疗 按照我国肺癌诊疗指南进行，17例患者采用调强放疗，29例采用三维适形放疗。放疗范围包括原发灶、同侧肺门、纵隔可见淋巴结。95% PTV剂量至60～65 Gy，三维TPS中根据放疗计划分别统计V20、V30(接受20 Gy/30 Gy照射的肺占全肺总体积的百分数)和MLD(全肺照射平均剂量)。

1.4 血清VEGF测定 放疗前1天、放疗开始后7天及1个月采集晨起空腹静脉血3ml于EDTA抗凝管，3000r/min离心10min。吸取血清放-80℃冰箱保存待测。用ELISA法定量检测血清VEGF含量，人血管内皮生长因子ELISA试剂盒购于上海西唐生物科技有限公司，具体操作按试剂盒说明书进行，结果在酶标仪主波长450nm读取光密度值，绘制标准曲线，得出待测血清VEGF含量。

1.5 近期疗效及放疗副反应评价 所有患者治疗前和结束后均行胸部CT扫描。治疗结束后3个月评价近期疗效。近期疗效采用世界卫生组织(WHO)评价标准：CR(所有可见病灶完全消失至少4周)，PR(病灶缩小50%以上但未完全消失至少4周)，NC(病灶缩小不超过50%或增大不超过25%)，PD(病灶增大超过25%或出现新的病灶)。在本研究中，CR+PR为治疗有效组，NC+PD为治疗无效组。放疗副反应分级采用RTOG放射损伤分级标准。

1.6 统计学方法 采用SPSS 10.0软件进行统计分析，计量资料用t检验和方差分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 临床特征 46例患者经放射治疗6～7周，共30～33次，总治疗剂量为60～66Gy。其中男38例(82.6%)，女8例(17.4%)；年龄≥55岁者29例(63.0%)，<55岁者17例(37.0%)；病理类型：腺癌25例(54.3%)，鳞癌20例(43.5%)，大细胞癌1例(2.2%)；临床分期：Ⅱ期2例(8.6%)，Ⅲ期40例(87.0%)，Ⅳ期4例(17.4%)；放疗方式：3D-CRT者29例(63.0%)，IMRT 17例(37.0%)。

2.2 近期疗效评价 46例患者中CR 2例，PR 28例，NC 10例，PD 6例，有效率(CR+PR)为65.2%，无效率(NC+PD)为34.8%。有效组放疗前后血清VEGF水平均低于无效组，差异有统计学意义(均P<0.05)；放疗开始后1周VEGF水平与放疗前相当，而放疗1个月时VEGF水平明显低于放疗前，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

2.3 并发症 放疗过程中及放疗结束后，患者均出现了1项或多项放疗副反应，其中放射性肺炎38例，放射性食管炎16例，Ⅰ～Ⅱ度骨髓抑制29例，治疗中及治疗结束后3个月内未发生Ⅳ度骨髓抑制、大咯血、呼吸衰竭等危及生命的严重并发症。

3 讨论

血管内皮生长因子(VEGF)是在牛垂体滤泡星状细胞体外培养液中纯化出来的一种肝素结合因子，它位于6p21.3上，主要参与血管形成，与肿瘤浸润转移关系密切[6]。VEGF在多种人实体肿瘤中均有表达,包括结直肠癌、胃癌、肺癌、肝癌、胰腺癌、乳腺癌等[5]。患者血清中VEGF水平与肿瘤侵袭转移能力呈正相关，继而与预后有着密切的关系，成为某些肿瘤生物治疗靶点[7]。

既往研究证明，VEGF在肺癌组织中的表达，在肺癌组织增殖与淋巴结转移过程中发挥重要作用。VEGF在肺癌组织中的阳性表达率明显高于正常组织,且微血管计数值均高于阴性组织，但具体机制尚不完全清楚[8]。

近期研究人员通过meta分析亚洲肺癌患者放疗前后VEGF水平与放疗敏感性显示，肺癌患者血清中VEGF表达水平与患者放疗敏感性及预后有着密切的关系。放疗后1周内血清VEGF水平先是有一个明显下降过程，然后又迅速上升至治疗前水平，治疗后1周至1个月再逐渐下降，并明显低于放疗前水平。这一变化可能与肿瘤细胞受照射后DNA损伤修复过程有关，但具体机制不详。该研究搜查了CISCOM科学网络、PubMed、谷歌学术、EBSCO及Cochrane图书馆，使用STATA 12.0软件进行荟萃分析。其中包含了14个临床研究，包括5个病例对照研究和9个群组研究。分析结果显示，非小细胞肺癌患者的血清VEGF水平高于健康对照组，放射治疗前后血清VEGF水平有着显著的差异(P<0.05)。进一步研究发现，血清VEGF水平的变化与患者放疗疗效及预后关系密切。血清VEGF水平与非小细胞肺癌患者组织学评分无明显关系。本研究结果显示，放疗后1周时血清VEGF水平与放疗前接近，放疗1个月时VEGF水平则明显低于放疗前水平，有效组放疗前后血清VEGF水平均明显低于无效组(P<0.05)。其机制可能是高水平VEGF对肿瘤血管形成能力与肿瘤细胞乏氧有关，从而影响肿瘤细胞放疗疗效。

4 结论

我们的研究表明，非小细胞肺癌患者血清VEGF水平可能是一个有前景的生物标志物，可用来预测放疗敏感性和非小细胞肺癌患者的预后。

[1] Laine AM, Westover KD, Choy H. Radiation therapy as a backbone of treatment of locally advanced non-small cell lung cancer[J]. Semin Oncol，2014,41:57-68.

[2] Padda SK, Burt BM, Trakul N,etal. Early-stage non-small cell lung cancer: surgery, stereotactic radiosurgery, and individualized adjuvant therapy[J]. Semin Oncol, 2014,41:40-56.

[3] Ferrara N, Houck KA, Jakeman LB,etal. The vascular endothelial growth factor family of polypeptides[J]. J Cell Biochem, 1991,47:211-218.

[4] Petrillo M, Borriello M, Fuoco G,etal. Novel VEGF-independent strategies targeting tumor vasculature: clinical aspects[J]. Curr Pharm Des,2012,18:2702-2712.

[5] Shibuya M. VEGF-VEGFR Signals in Health and Disease[J]. Biomol Ther (Seoul), 2014,22:1-9.

[6] Dvorak HF. Leaky tumor vessels: consequences for tumor stroma generation and for solid tumor therapy[J]. Prog Clin Biol Res, 1990,354(A):317-330.

[7] Funakoshi T, Lee CH, Hsieh JJ. A systematic review of predictive and prognostic biomarkers for VEGF-targeted therapy in renal cell carcinoma[J]. Cancer Treat Rev，2014， 40:533-547.

[8] Alevizakos M, Kaltsas S, Syrigos KN. The VEGF pathway in lung cancer[J]. Cancer Chemother Pharmacol, 2013,72:1169-1181.

Clinical significance of serum VEGF of non-small cell lung cancer patients with radiotherapy

MA Jinlu1, JIN Long1, HAN Suxia1,etal

(1.DepartmentofRadiotherapy,TheFirstAffiliatedHospitalofMedicalCollege,Xi’anJiaotongUniversity,Xi’an710061; 2.Xi'anKunlunHospital,Xi’an710016)

Objective To investigate the relationship between recent effect of radiotherapy and serum vascular endothelial growth factor (VEGF) level in patients with non-small cell lung cancer (NSCL). Methods 46 patients with non-small cell lung cancer were treated with conventional three-dimensional conformal irradiation (3 d CRT) and intensity modulated radiation (IMRT). The serum VEGF was detected with ELISA before radiotherapy and 1 d, 7 d and 1 month after radiotherapy. According to the recent curative effect, the patients were divided into effective and ineffective group. Results The total therapeutic doses were 60-66 Gy. The efficient rate (CR+PR) was 65.2% and no efficiency rated (NC+PD) was 34.8%. Serum VEGF levels before and after radiotherapy of effective group was lower than that of ineffective group. The difference was statistically significant. VEGF 1 week and 1 month after radiotherapy was lower than that before radiotherapy. The difference was statistically significant. Conclusion Non-small cell lung cancer patients serum VEGF levels may be a promising biomarker, which can be used to predict radiation sensitivity and the prognosis of patients with non-small cell lung cancer.

Non-small cell lung cancer; VEGF; Radiotherapy

国家自然科学基金(81001027)

韩苏夏，教授，《西部医学》常务编委，E-mail: shan87@mail.xjtu.edu.cn

R 734；R 815

A

10.3969/j.issn.1672-3511.2015.06.007

2014-06-03； 编辑： 母存培)