白细胞介素10、白细胞介素17及γ干扰素在川崎病患儿血清中的表达及临床意义

刘志国, 王华春, 陈　健, 刘风颖, 王　振, 王庆然,王　刚

(河北省故城县医院 儿二科, 河北故城, 253800)

白细胞介素10、白细胞介素17及γ干扰素在川崎病患儿血清中的表达及临床意义

刘志国, 王华春, 陈健, 刘风颖, 王振, 王庆然,王刚

(河北省故城县医院 儿二科, 河北故城, 253800)

摘要:目的探讨白细胞介素(IL)-10、IL-17及γ干扰素(IFN-γ)在川崎病(KD)患儿血清中的表达及临床意义。方法选取本院收治的31例KD患儿为观察组，另选取健康体检患儿30例为对照组。记录观察组患儿急性期、亚急性期和恢复期的血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平表达，并分析与冠状动脉损伤的相关性。结果观察组血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平随治疗时间的延长不断下降，但仍显著高于对照组(P<0.05, P<0.01)。Spearman等级相关分析结果显示，血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平与疾病改善程度呈显著负相关(r=-0.938, -0.515, -0.922, P=0.000)。血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平在损伤组和未损伤组中均随着治疗时间的延长而显著下降(P<0.05, P<0.01)，损伤组各指标水平显著高于同期未损伤组(P<0.05, P<0.01)。结论血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平检测可以反映KD患儿的病情进展，并可作为预测冠脉损伤发生的参考指标。

关键词:白细胞介素-10; 白细胞介素-17; γ干扰素; 川崎病; 冠状动脉损伤

川崎病(KD)是一种好发于婴儿的发热性疾病，其主要病理改变为全身血管性血管炎，对冠状动脉的损害较为明显，其中>80%的患儿年龄小于5岁[1]。KD的发病机制目前仍不完全清楚，预测其与异常免疫反应和感染相关。有研究认为，免疫细胞可以激活并产生多种细胞因子及其介导的免疫反应，其与KD冠状动脉的损伤具有显著相关性，其中，白细胞介素(IL)-10、IL-17和干扰素(IFN)-γ起主要作用[2-4]。本文主要通过双抗体夹心酶联免疫吸附实验(ELISA)检测KD患者血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平表达，分析其与相关临床指标的相关性，并探讨其在KD并发冠状动脉损伤的诊断和预防中的可能作用。

1资料与方法

选择2013年1月—2014年10月收治的KD患者31例，设为观察组，均符合第七次世界儿童川崎病研讨会制定的KD诊断标准[5]，起病均<1周。其中男25例，女6例；年龄10个月～6岁，中位年龄3.5岁。通过彩色多普勒检测，根据患儿是否并发冠脉损伤分为损伤组(n=19)和未损伤组(n=12)。另选取健康体检儿童30例为对照组，其中男24例，女6例；年龄1～5岁，中位年龄3.3岁；排除感染性疾病患儿。2组年龄、性别等一般资料差异无统计学意义(P>0.05), 具有可比性。

治疗方法：观察组患者均在患病10 d内给予静脉滴注丙球治疗, 2 g/kg; 阿司匹林80 mg/(kg·d), 分三次口服。

标本采集：观察组患儿分别在治疗前(急性期)、治疗1周(亚急性期)和治疗2周(恢复期)后清晨抽取空腹静脉血5 mL, 4 ℃下以2 000 r/min速度离心20 min，分离血清，取上清液保存于-70 ℃冰箱中。对照组均抽取空腹静脉血3 mL备检。采用ELISA法检测检测血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平，试剂盒均购自北方邦定泰克生物技术公司。

2结果

2.1　观察组和对照组患儿血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平表达

观察组患儿血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平与对照组比较，差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。随着治疗时间的延长，以上指标均显著降低(P<0.05或P<0.01), 而IL-17和IFN-γ在亚急性期与急性期差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。Spearman等级相关分析结果显示，血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平与病情分期呈显著负相关(r=-0.938, -0.515, -0.922,P=0.000)。

ng/L

与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01; 与恢复期比较，#P<0.05, ##P<0.01; 与亚急性期比较, △△P<0.01。

2.2　冠状动脉损伤对血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平表达的影响

血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平在损伤组和未损伤组中均随着治疗时间的延长而显著下降(P<0.05或P<0.01)，损伤组各指标水平均显著高于同期未损伤组(P<0.05或P<0.01)。见表2。

ng/L

与未损伤组比较，*P<0.05，**P<0.01; 与恢复期比较, #P<0.05, ##P<0.01;

与亚急性期比较，△P<0.05, △△P<0.01。

3讨论

大量研究[6]表明, KD可能是感染引起的急性自身免疫性血管炎综合征。虽然KD的发病机制至今尚不清楚，但细胞因子在自身免疫性疾病中的作用仍引起了学者们的注意。研究[7-9]认为，活化的免疫活性细胞分泌的炎性介质，可参与KD的发生发展。Th17细胞在KD急性期患者血清中急速升高，且Th17细胞比例和IL-17的表达水平均显著上调，推测IL-17可能作为急性炎症的启动因素，导致KD免疫紊乱的发生[10-11]。IL-10由Th12细胞分泌，是一种可以调节T细胞、B细胞和NK细胞的产生的多能细胞因子，还具有抑制细胞黏附分子的产生、阻滞炎症细胞因子的分泌以及免疫活性细胞因子的表达，从而预防血栓形成的作用。研究[12-13]发现, IL-10水平在KD各治疗期均显著高于对照组，治疗后显著下降，表明IL-10可能参与了KD免疫性血管损伤以及血管炎的发生和发展过程。IFN-γ是一种特征性细胞因子，由Th1细胞分泌，具有激活中性粒细胞并促进其释放炎症介质和炎症蛋白的作用。有研究[14-15]结果显示，KD患儿治疗前IFN-γ水平异常升高，治疗后有显著降低，说明IFN-γ水平变化可能可作为预测儿童是否患KD的重要指标。本研究结果显示，KD患儿急性期、亚急性期和恢复期, IL-10、IL-17及IFN-γ水平均有显著下降，观察组显著高于对照组，且Spearman等级相关分析显示, 3种指标与KD改善程度呈显著负相关，表明3种指标水平越高, KD患儿症状越严重。

KD所致冠脉损伤的机制较为复杂，而免疫炎症因子是主要原因之一。血液循环系统及内皮细胞中的免疫活性细胞的相互聚集和黏附是导致炎症反应浸润深层血管的关键性原因，说明KD患儿的免疫效应细胞可向血管局部浸润，对血管损伤的生理和病理机制有重要影响[16]。有研究认为，IL-10在KD的全身系统中起负反馈调节，其水平偏低则不足以拮抗其他炎症因子(如IL-17、IFN-γ等)的作用引起冠脉损伤，且IL-10水平在急性期显著高于亚急性期和对照组，提示IL-10水平可能与KD是否引起冠脉损伤以及损伤程度有关[12]。本研究中，IL-10、IL-17及IFN-γ水平在冠状动脉损伤组和未损伤组各治疗期均有显著下降，损伤组各指标水平显著高于未损伤组，表明冠脉损伤患儿IL-10、IL-17及IFN-γ水平均可能有助于预测和预后KD患儿冠状动脉损伤。但由于本研究病例数较少，指标分析有局限性，后期需更多大型试验进一步研究。

参考文献

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Expression and clinical significance of IL-10, IL-17

and IFN-γ in infants with Kawasaki disease

LIU Zhiguo, WANG Huachun, CHEN Jian, LIU Fengying, WANG Zhen,

WANG Qingran, WANG Gang

(SecondDepartmentofPediatrics,GuchengHospital,Gucheng,Hebei, 253800)

ABSTRACT:ObjectiveTo explore the expression and clinical significance of interleukin (IL)-10, IL-17 and γ interferon (IFN-γ) in infants with Kawasaki disease (KD). MethodsA total of 31 KD infants were selected as observation group, while another 30 healthy infants were selected as control group. The expression of IL-10, IL-17 and IFN-γ in the acute, sub-acute and recovery stages of both groups were observed and their relationships with coronary artery damage were analyzed. ResultsSerum IL-10, IL-17 and IFN-γ levels decreased continuously along with the treatment in the observation group, but were still significantly higher than the control group (P<0.05 or P<0.01). Spearman rank correlation analysis results showed that serum IL-10, IL-17 and IFN-γ levels were in negative association with disease progression (r=-0.938, -0.515, -0.922, P=0.000). Serum IL-10, IL-17 and IFN-γ levels decreased significantly in damage group and non-damage group along with the treatment (P<0.05 or P<0.01), which were also markedly higher in damage group than in non-damage group (P<0.05 or P<0.01). ConclusionSerum IL-10, IL-17 and IFN-γ level detection can reflect the disease progression of KD infants, which can be used as the reference indexes for the predication of coronary artery damage.

KEYWORDS:interleukin-10; interleukin-17; γ interferon; kawasaki disease; coronary artery damage

基金项目:中国高校医学期刊临床专项资金(11520969)

收稿日期:2015-03-09

中图分类号:R 725.9

文献标志码:A

文章编号:1672-2353(2015)11-064-03

DOI:10.7619/jcmp.201511019