超微粉碎技术提高齐墩果酸滴丸溶出度的实验研究

郭雪红，许 和

(天津医学高等专科学校，天津 300222)



超微粉碎技术提高齐墩果酸滴丸溶出度的实验研究

郭雪红，许 和

(天津医学高等专科学校，天津 300222)

目的：研究超微粉碎技术应用于齐墩果酸滴丸生产的可行性及效果。方法：采用超微粉碎技术制备齐墩果酸超微粉滴丸并与齐墩果酸普通滴丸相比较，采用紫外分光光度法进行溶出度测定。结果：齐墩果酸浓度在0.020 74～0.072 59 mg/ml内呈良好线性关系(r=0.999 7，n=6)；溶出度均一性良好；45 min时齐墩果酸滴丸的溶出度达到95.24%，远高于普通滴丸(82.36%)、胶囊剂(75.32%)和分散片(52.17%)。结论：采用超微粉碎技术制备的齐墩果酸滴丸剂各项指标均优于未处理过的，超微粉碎技术用于齐墩果酸滴丸生产可显著改善滴丸的性状及质量。

超微粉碎技术，齐墩果酸滴丸，溶出度

齐墩果酸(oleanolic acid,简称OA)是天然五环三萜类化合物，目前临床上齐墩果酸主要用于治疗急性黄疸型和慢性中毒型肝炎，并作为抗癌辅助药物[1]。另外齐墩果酸还具有抗病毒、降血糖、降血脂作用，特别是抗艾滋病病毒活性的发现，说明齐墩果酸具有广阔的开发前景。目前市场销售齐墩果酸产品多为片剂和胶囊剂，剂型单一，而且齐墩果酸的脂溶性极强，吸收差，溶出度和溶出速率低，现有制剂生物利用度低且辅料用量比例大，从而极大地影响了齐墩果酸治疗作用的发挥。研究发现，中药通过超微粉碎技术，可以提高生物利用度、增强药效[2]，因此，本实验对超微粉碎技术制备齐墩果酸滴丸进行了初步研究，并考查了该制剂的体外溶出和生物利用度，为超微粉制备齐墩果酸滴丸的合理应用提供依据。

1 仪器与试药

1.1 试药 齐墩果酸(98%，陕西慧科植物开发有限公司，批号120610)；齐墩果酸对照品(中国药品生物制品检定所，11709-200905)；齐墩果酸分散片(自制)；齐墩果酸胶囊(奥星制药，批号0608)；二甲基硅油(沈阳试剂厂，批号1108)； 聚乙二醇4000(美国Merck公司，进口分装)；试剂均为药用规格及分析纯，水为新制蒸馏水。

1.2 仪器 真空干燥箱(中科美其)；FWl00型高速万能粉碎机(北京科伟永兴仪器有限公司)；LS-POP(6)型激光粒度分析仪(珠海欧美客科技有限公司)；数显电动搅拌机(WH-S，天津市威华实验仪器厂)； 振动磨机(3ZM-W400)；磁力搅拌机(78-1，杭州仪表电机厂)； 电子天平(CUB-986，瑞士METTLER TOLEDO-ACS 型)； 滴丸机(自制)；紫外-分光光度计(UV-2201，SHIMADZU)；ZRS-8G 型智能溶出仪(天津大学无线电厂)。

2 方法与结果

2.1 样品制备

2.1.1 齐墩果酸普通粉制备 将待制备的齐墩果酸药材在真空干燥箱减压常温干燥5～10 h，用高速万能粉碎机进行粉碎20 min，过200目标准筛，得齐墩果酸普通粉。

2.1.2 齐墩果酸微粉制备

2.1.2.1 不同时间超微粉碎对齐墩果酸粉D50、D90均值的影响 将通过标准筛的齐墩果酸普通粉分成4份，分别用深冷振动超微粉碎机组在-20 ℃条件下进行超微粉碎10、20、30和40 min，用LS-POP(6)型激光粒度分析仪测定其粒径分布，重复测量3次，统计不同粉碎时间得到的齐墩果酸粉D50(中位粒径)、D90(90%粒径值)的均值，结果见表1。

表1 不同时间超微粉碎对

2.1.2.2 磨介填充率对齐墩果酸超微粉碎效率的影响 磨罐和磨介均为不锈钢，磨介直径为8 mm，物料填充率100%。磨介填充率选取50%、60%、70%、80%和90% 5个水平。粉碎完成后，称取10 g粉体，分别用80目(180 μm)、200目(75 μm)、320目(45 μm)以及500目(25 μm)的标准筛进行振动筛分，对所得结果进行分析。在磨介填充率为80%时，绝大部分齐墩果酸的粒径达到25 μm以下的水平。见表2。

表2 筛过百分比

2.1.2.3 齐墩果酸微粉制备条件 综上所述，取500 g齐墩果酸普通粉投进深冷振动超微粉碎机组在-20 ℃、磨介填充率80%的条件下，进行超微粉碎40 min。

2.1.3 粒度分布检查 利用激光粒度仪对齐墩果酸普通粉和微粉的粒度分布情况进行检测。见表3。

表3 齐墩果酸普通粉和微粉的粒度分布

2.1.4 齐墩果酸滴丸剂制备 在PEG 4000熔融的状态下分别加入齐墩果酸普通粉和微粉各500 g，并搅拌混合均匀(其中齐墩果酸与PEG 4000比例为1∶5)，选择滴头内径3 mm,外径4 mm的滴头，滴距为7 cm，滴入至装有二甲基硅油的冷凝管中，调控冷凝温度为(15±5) ℃，制备成丸，清洗去除表面的冷凝剂，筛选包装即得齐墩果酸普通滴丸和超微粉滴丸。

2.2 齐墩果酸普通滴丸和超微粉滴丸溶出度研究

2.2.1 溶散时限测定 依据《中国药典》2010年版(二部)附录丸剂通则溶散时限的要求进行检验，取普通滴丸测得的溶散时限分别为(7±2)、(8±2)和(7±3)min；取超微粉滴丸测得的溶散时限分别为(6±2)、(7±2)和(6±2)min，两批样品均符合规定。

2.2.2 紫外检测波长的确定 精密称取齐墩果酸对照品适量, 用甲醇溶解并稀释至1 mg/ml。以甲醇溶液为空白对照液,在200～600 nm波长范围内，进行紫外吸收波长扫描, 结果显示齐墩果酸在210 nm处有最大吸收, 所以本试验检测波长为210 nm。

2.2.3 线性范围 精密量取齐墩果酸对照品溶液(1.037 mg/ml)0.5、1.0、2.0、3.0、4.0和5.0 ml, 置10 ml量瓶中,用甲醇稀释至刻度，在210 nm波长处测定齐墩果酸吸收度。根据吸光度标准曲线求得回归方程为A=0.009 6C+0.003 7，齐墩果酸含量在0.020 74～0.072 59 mg/ml内呈良好线性关系(r=0.999 7，n=6)。

2.2.4 样品中齐墩果酸含量的测定 分别精密吸取齐墩果酸普通滴丸和超微粉滴丸溶液适量,测定两种滴丸中齐墩果酸含量分别为10.63%和19.32%。

2.2.5 溶出度测定

2.2.5.1 测定方法 采用《中国药典》2010年版2部附录ⅩC第一法进行溶出度试验，采用紫外分光光度法检测,每容器中放入齐墩果酸滴丸20粒(约600 mg)。

2.2.5.2 溶出介质选择 分别以0.1 mol/L盐酸溶液、水和人工胃液(量取稀盐酸16.4 ml，加水约900 ml与胃蛋白酶10 g，晃动均匀后，加水稀释成1 000 ml，即得[3])为溶出介质，以100 r/min转速进行溶出试验，溶出结果见表4。试验结果表明：样品中齐墩果酸在人工胃液中的溶出远远优于水和0.1 mol/L盐酸溶液，故确定溶出介质为人工胃液。且齐墩果酸超微粉滴丸与普通齐墩果酸滴丸相比，溶出速度快，累积溶出量高。

表4 样品在不同溶剂下的溶出百分比 %

2.2.5.3 齐墩果酸超微粉滴丸溶出曲线的均一性 从同一批超微粉滴丸中取6份，每份10粒，按上述确定的条件进行溶出度试验，6份溶出结果见表5。试验结果表明，齐墩果酸超微粉滴丸溶出度均一性良好。

2.2.5.4 齐墩果酸滴丸体外溶出度检验结果 同上述测定条件，测定齐墩果酸含量，并计算相对累计溶出百分率。同时测定齐墩果酸胶囊剂、分散片溶出度。结果见表6。结果表明：超微粉齐墩果酸滴丸与普通齐墩果酸滴丸以及同类口服固体制剂相比，溶出速度快，累积溶出量高。

表5 溶出曲线的均一性

表6 体外溶出度测定结果

3 讨论

3.1 由表1可见，超微粉碎10、20和30 min时，粉体的D50、D90均值变化不大，粉体属于普通细粉范畴(粒径<180目) ，超微粉碎40 min时，粒径有了明显的减小，粉体即达到了超微粉的粒径要求。中药经超微粉碎后，物料处于超微状态，其粒度尺寸介于分子、原子和块粒之间，超微粉碎通常分为微米级粉碎(1～100 μm)、 亚微米级粉碎(0.1～1 μm)、 纳米级粉碎(0.001～0.1 μm，即1～100 nm)[4]。对于中药方面的开发利用来讲，一般达到微米级粉碎即可破坏组织细胞壁(膜)结构，获得所需要的物料特性，为了不破坏细胞内有效成份，故毋须纳米级粉碎。

3.2 由表2可见，随着磨介填充率从50%到80%逐渐增大，粉体的筛过率也随之增大。当磨介低于70%时，通过320目及500目标准筛的粉末所占百分比较小。这是由于随着研磨磨介的增加，钢球与粉体的接触机会增加，而粉体与粉体的接触减小，从而使粉碎效率提高。但当磨介填充率达到90%时，粉体对500目标准筛的通过率反而减小(只有55.21%)，粉碎效率下降幅度比较大，而磨介填充率为70%和80%的情况下，通过500目标准筛的质量分数分别有 74.73%和91.38%。这可能是因为此时磨介填充率太高，限制了钢球以及粉体的运动，导致研磨效率降低。

3.3 本实验初步探讨利用超微粉碎技术提高齐墩果酸滴丸的溶出度，但对于有些中药有效成分研究尚不明确，特别是复方配伍变化方面的研究不够深入全面，给滴丸研究与生产带来很大的难度。因此目前此种方法只能应用于剂量较小药物或处方组成较少的方剂药物。

1 李丽庆．齐墩果酸治疗恶性肿瘤病人的临床Ⅰ期研究[J]．中国肿瘤临床，1992，(6)：412

2 夏荃，林传权，莫全毅，等．珍珠层粉超微粉的制备及药效学研究[J]．中成药，2014,36(2)：396-399

3 苏卓．金槐冠心滴丸制备工艺及质量标准研究[D]．陕西中医学院，2010

4 唐芳，徐虹，赵绪元,等．齐墩果酸滴丸的质量控制[J]．中国医院药学杂志，2008，28(16):1416-1418

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