健脾消食方对脾虚大鼠胃肠运动的影响

张进，李岩

（1.中国医科大学附属盛京医院消化内科，沈阳 110004；2.辽宁医学院附属第一医院消化内科，辽宁 锦州 121000）

·论著·

健脾消食方对脾虚大鼠胃肠运动的影响

张进1，2，李岩1

（1.中国医科大学附属盛京医院消化内科，沈阳 110004；2.辽宁医学院附属第一医院消化内科，辽宁 锦州 121000）

目的观察和探讨健脾消食方对脾虚证大鼠胃肠运动的调节作用。方法雄性SD大鼠40只随机分为正常对照组、模型组、模型中药组、模型西药组。通过劳倦过度加饮食失节法建立脾虚模型，建模成功后，各组予相应药物灌胃1周；期间观察记录大鼠症状、体质量，给药后测量胃排空率与小肠推进比，酶联免疫吸附法检测SP、SS含量。结果健脾消食方改善大鼠脾虚症状，模型中药组与模型组比较体质量增加、胃排空率增高、小肠推进比降低、SP水平明显增高、SS水平降低，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论健脾消食方改善脾虚大鼠一般状态，提高脾虚大鼠胃排空，恢复小肠亢进运动，其可能通过升高血清SP含量，降低血清SS含量进而调节胃肠运动。

健脾消食方；脾虚证；胃肠运动；生长抑素；P物质

功能性消化不良是一种常见的消化系统疾病，以消化不良为主诉的患者约占普通内科门诊的10%，占消化内科门诊的50%［1］.其发病机制复杂，目前研究表明，本病与运动功能障碍、内脏高敏感性、胃酸分泌、幽门螺杆菌感染、精神心理因素等诸多因素相关［2］。研究表明，运动功能障碍是功能性消化不良（functional dyspesia，FD）的主要发病基础，约40%的FD患者存在胃排空延缓［3］，并且以固体胃排空延迟为主［4］。

FD在中医学里属于“痞满”、“胃脘痛”、“积滞”范畴，肝胃不和型、脾胃虚弱型构成了FD的主要证型［5］，根据FD的临床表现及病机，在中医辨证论治中尤其注重健脾补虚［6］。我们根据多年临床经验及既往药理研究自拟健脾消食方，此方由健脾、消食、行气的中药组成。

本实验根据中医病因病机理论，采用劳倦过度加饮食失节法建立大鼠脾虚证FD模型［7，8］，探讨和证实健脾消食方对脾虚证大鼠胃肠运动的调节作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物

健康雄性SPF级SD大鼠40只，10～12周龄，体质量180～220 g，由中国医科大学附属盛京医院实验动物中心提供［许可证号：SCXK（辽）2003-0013］。

1.2 药物与试剂

健脾消食方（太子参10 g、茯苓20 g、炒白术15g、炒鸡内金10 g、厚朴10 g、炒枳实10 g、砂仁10 g、炙甘草10 g），按照中药常规煎法，最后浓缩成生药浓度为0.8 g/mL的煎剂，4℃冷藏保存；枸橼酸莫沙必利（5 mg/片，住友制药有限公司，批号：2814C）：研细以蒸馏水稀释成0.125 g/L的溶液；羧甲基纤维素（宜兴市通达化学有限公司，批号：1107013）；硫喷妥钠（上海新亚药业有限公司，批号：020102）：临用前，用灭菌注射用水溶解成2.5%溶液后应用；Rat SS ELISA试剂盒（R&D Systems Inc.，USA）；Rat SP ELISA试剂盒（R&D Systems Inc.，USA）。营养性半固体糊的制备［9］：羧甲基纤维素5 g、奶粉8 g、糖4 g、淀粉4 g、碳素墨水2 mL，蒸馏水150 mL，搅拌均匀。

1.3 仪器设备

电子天平（0.01 g）：TE612-L，北京赛多利斯仪器系统有限公司；低速离心机：SC-3612，安徽中科中佳科学仪器有限公司；吸收光酶标仪：EL×808，Biotek，USA。

1.4 脾虚证模型的建立

劳倦过度加饮食失节法：隔日将大鼠置于盛有温水（22℃）的塑料桶中游泳至力竭1次（大鼠水中旋转、运动协调性明显下降，水淹没鼻尖，身体下沉，至再次浮出水面超过10 s，连续3次［10，11］）以达到劳倦过度；单日禁食不禁水，喂饲甘蓝15 g/只，双日自由进食水，精炼猪油灌胃1次，以达到饮食不节，共25 d。按照脾虚模型宏观诊断标准［12］，大鼠出现：精神倦怠，嗜卧，懒动，拱背，扎堆，眯眼；毛色干枯欠光泽，耳尾色白；抓取时挣扎无力；软便或便塘；受激排便率增高；体质量增长减慢，食量减少为造模成功。

1.5 分组及给药

40只大鼠适应性饲养3 d后随机分为4组，即正常对照组、模型组、模型中药组，模型西药组，每组10只。除正常对照组外，其余3组建立脾虚证动物模型，造模过程中大鼠因溺水死亡5只（模型组、模型西药组各死亡2只，模型中药组死亡1只）。造模成功后给药，给药依据人和鼠给药剂量换算公式［13］进行计算，模型中药组给予健脾消食方12.5 mL/（kg·d），模型西药组给予莫沙必利 12.5 mL/（kg·d），模型组及正常对照组给予灌服等量蒸馏水，1次/d灌胃，持续7 d。

1.6 一般情况观察

包括毛发光泽度、活动、反应、大便情况、进食量，造模前、造模后及给药后的体质量。

1.7 胃排空率和小肠推进比的检测

末次给药后禁食不禁水24 h，给予半固体糊2 mL灌胃，灌胃前称定营养性半固体糊质量，1 h后硫喷妥钠（40 mg/kg）麻醉，迅速打开腹腔，结扎贲门和幽门，剪取胃及全小肠；自贲门及幽门结扎处取胃，用吸水纸吸干胃外壁，称质量后沿胃大弯剪开，用生理盐水充分冲洗胃内容物，再吸干水分后称质量，胃排空率=1-［（胃全重-胃净重）/灌胃量］× 100%；量取小肠内从幽门括约肌至肠内容物色素最前端及至盲肠的距离，两者之比，即为小肠推进比。

1.8 血清P物质（SP）、生长抑素（SS）的检测

末次给药后禁食不禁水24 h，半固体糊灌胃后1 h，硫喷妥钠麻醉，腹主动脉采血4 mL，分离血清，-80℃保存，ELISA法检测按照试剂盒说明书进行。

1.9 统计学处理

2 结果

2.1 大鼠一般状态比较

模型组大鼠出现体型瘦小，毛发干枯，倦怠，疲乏懒动，蜷缩，扎堆，抓取时挣扎无力，眯眼，拱背等表现，粪便较正常组比较，初期进食甘蓝后排便干小，色深，后期时软时稀，偶有便塘，进食量降低，体质量明显低于正常对照组，差异有统计学意义（P＜0.01）。给药后，模型中药组及模型西药组大鼠精神状态较模型组好转，较活跃，毛发转好，进食量增加，体质量均高于模型组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

2.2 胃排空率

模型组胃排空率低于正常对照组，差异有统计学意义（P＜0.01）；模型中药组与模型西药组胃排空率均高于模型组，差异有统计学意义（P＜0.05）；模型中药组与模型西药组比较无统计学差异（P＞0.05），两组胃排空率低于正常对照组，模型西药组与正常对照组比较无统计学差异（P＞0.05），见表1。

2.3 小肠推进比

模型组小肠推进比高于正常对照组，差异有统计学意义（P＜0.01），模型中药组小肠推进比低于模型组，差异有统计学意义（P＜0.05），但与正常对照组比较无统计学差异（P＞0.05）；模型西药组小肠推进比明显高于正常对照组，差异有统计学意义（P＜0.01），而与模型组比较无明显差异，见表1。

表1 各组大鼠平均体质量、胃排空率、小肠推进比、SP水平、SS水平的比较（）Tab.1 Comparison of the mean body weight，GER，IPR，concentration of serum SP and concentration of serum SS between different groups（）

表1 各组大鼠平均体质量、胃排空率、小肠推进比、SP水平、SS水平的比较（）Tab.1 Comparison of the mean body weight，GER，IPR，concentration of serum SP and concentration of serum SS between different groups（）

compared to model group：1）P＜0.05，2）P＜0.01；compared to normal control group：3）P＜0.05，4）P＜0.01.

Concentration Concentration Before model After model After drug GER（%） IPR（%） of serum of serum establishment（g） establishment（g） administration（g） SP（ng/L） SS（pg/mL）Normal control group 10 215.10±6.37 385.70±17.70 415.70±17.16 74.05±11.09 54.02±7.85 82.32±12.70 46.58±11.07 Model group 8 216.25±6.96 258.50±6.684） 273.50±12.074） 49.15±10.114） 66.81±6.834） 71.56±5.873） 63.84±10.404）Model TCM group 9 216.89±6.00 257.33±19.674） 291.89±24.751），3） 60.41±12.311） 59.11±6.421） 81.67±7.711） 50.76±10.031）Model western medicine group 8 214.50±8.25 255.50±7.674） 284.87±8.594） 69.07±8.082） 70.20±8.644） 82.85±8.351） 51.72±6.951）Body weight Groups n

2.4 P物质

模型组SP水平明显低于正常对照组（P＜0.05），模型中药组及模型西药组SP水平明显高于模型组（P＜0.05），差异均有统计学意义。模型中药组、模型西药组、正常对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

2.5 生长抑素

模型组SS水平显著高于正常对照组（P＜0.01），模型中药组及模型西药组SS水平明显低于模型组（P＜0.05），差异均有统计学意义；模型中药组与模型西药组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；模型中药组及模型西药组SS水平与正常对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

3 讨论

中医学认为，功能性消化不良的发生与情志郁结、外邪内积、脾胃虚弱有关，脾虚是发病的基础，肝郁是致病的条件，胃气不降是引发症状的原因［14］。《证治准绳》云“脾主四肢，若劳力辛苦，伤其四肢，则根本竭矣。或因饮食不调，或因劳力过度，或饮食不调之后加之劳力，或劳力过度之后继以不调，故皆谓之内伤元气不足之证”。根据以上中医理论，我们采用劳倦过度加饮食失节法建立脾虚证动物模型，有研究表明，劳倦过度加饮食失节法与利血平、耗气破气等其他造模方法相比，对胃黏膜的损伤更轻［15］，与功能性胃肠病更相符。我们采用的公认疲劳标准，其力竭的程度更深，避免了疲劳的快速恢复［11］同时又可避免中度运动强度对于胃肠运动功能的促进作用［16］。

健脾消食方参照出自《太平惠民和剂局方》的四君子汤作为健脾之基础，加炒鸡内金、砂仁、厚朴、炒枳实而成。方中太子参为君药，甘温益气，健脾养胃；臣以苦温之白术，健脾燥湿加强益气助运之力，炒鸡内金消食导滞；佐以甘淡茯苓，健脾渗湿，砂仁、厚朴、炒枳实行气导滞；使以炙甘草益气和中，调和诸药，诸药合用，共奏益气健脾，消食导滞之功。既往药理研究表明：四君子汤对大鼠胃运动具有双向调节作用［17］，白术煎剂能明显促进小鼠胃排空及小肠推进功能［18］，厚朴可以改善L-Arg和阿托品所致的胃肠动力障碍［19，20］，枳实提取物能够增强家兔离体肠管的自主运动，其水煎剂可使犬小肠平滑肌张力和运动功能增强［21］。砂仁及其水提取液有较好的促胃肠动力作用［22，23］，各种鸡内金炮制品都能不同程度地减少小肠推进率［24］，本方符合中医传统理论，并且具备药理学基础。

本实验大鼠造模后出现脾虚证的宏观症状，开腹时观察到模型大鼠胃肠胀气，肠壁变薄等脾虚证表现。模型大鼠的胃排空减低及小肠运动亢进，提示其存在消化、吸收功能障碍，健脾消食方可提高脾虚大鼠减低的胃排空率，作用虽弱于莫沙必利，但是能够恢复脾虚大鼠亢进的小肠运动，使其接近正常，具有胃肠运动的双向调节作用。

SS是一种广泛分布的抑制型胃肠激素，大部分分布在胃肠道［25］，可抑制许多细胞因子的释放，对胃肠道具有广泛的直接和间接调节作用［26］，抑制胃固体排空和胃张力性收缩［27，28］。FD患者外周血SS升高［29～31］，并且FD患者的症状与血浆SS含量明显相关［32］。

本研究结果显示，脾虚模型大鼠的胃肠运动失调可能与血清中SP水平下降、SS水平升高有关。健脾消食方提升脾虚大鼠血清中SP水平，降低SS水平，表明该方可能通过调节血清SP、SS含量影响胃肠运动。

本实验证实了健脾消食方的胃肠调节作用和组方的合理性，为其对临床脾虚证消化不良患者胃肠运动失调的治疗提供了理论依据。功能性消化不良的运动功能改变不仅表现为全胃排空的异常，还包括胃容受性，胃内食物的分布，胃十二指肠协调运动，胃肠电活动等多方面的异常，并且与消化不良的症状具有相关性。健脾消食方对于胃肠运动的调节作用仍值得进一步研究探索。

［1］刘文忠.幽门螺杆菌感染与非溃疡性消化不良［J］.现代消化及介入诊疗，2010（2），15：94-97.

［2］柯美云.中国消化不良的诊治指南（2007大连）［J］.胃肠病学，2008，13（2）：114-117.

［3］Quartero AO，de Wit NJ，Lodder AC，et al.Disturbed solid-phase gastric emptying in functional dyspepsia：a meta-analysis［J］.Dig Dis Sci，1998，43（9）：2028-2033.

［4］王承党，萧树东，莫剑忠，等.胃排空障碍与功能性消化不良相关性的研究［J］.中华消化杂志，1997，17（6）：322-323.

［5］刘松林，梅国强，赵映前.功能性消化不良的中医临床辨证规律研究［J］.中国医药学报，2004，19（8）：449-451.

［6］陈更新，郑红斌，胡鸿毅.马贵同教授治疗功能性消化不良的经验［J］.中国中西医结合消化杂志，2001，9（2）：103-104.

［7］陈雷，李德新，崔家鹏，等.用模糊数学中模式识别方法进行脾气虚大鼠模型评价的实验研究［J］.中国中医基础医学杂志，2006，12（2）：118-120.

［8］周永生，樊雅莉，陈小野，等.脾气虚证动物模型规范化的初步研究-部分免疫功能方面［J］.实验动物科学与管理，2003，20（2）：1-5.

［9］Francis J，Critchley D，Dourish CT，et al.Comparisons between the effects of 5-HT and dl-fenfluramine on food intake and gastric emptying in the rat［J］.Pharmacol Biochem Behav，1995，50（4）：581-585.

［10］Tanaka M，Nakaraura F，Mizokawa S.Establishment and assessment of a rat model of fatigue［J］.Neurosci Lett，2003，352（3）：159-162.

［11］郭庆军，常耀明，李金声，等.大鼠游泳运动性疲劳模型力竭标准的研究［J］.现代生物医学进展，2010，10（15）：2855-2858.

［12］邹世洁，周永生，樊雅莉，等.脾气虚证动物模型规范化的初步研究宏观症征部分［J］.中国中西医结合消化杂志，2001，9（5）：264-267.

［13］陈奇.中药药理研究方法学［M］.北京：人民卫生出版社，2006：31.

［14］王长洪.著名中医学家董建华教授学术经验系列之一：功能性消化不良的论治经验［J］.辽宁中医杂志，1999，26（7）：289-290.

［15］李晨，王垂杰.3种脾虚证模型大鼠胃粘膜损伤情况的比较［J］.中国中西医结合消化杂志，2013，21（3）：127-130.

［16］杨春敏，王建荣，张秀荣，等.游泳对大鼠胃肠动力及血浆胃动素的影响［J］.世界华人消化杂志，2001，9（5）：586-587.

［17］叶富强，陈蔚文.四君子汤对胃肠道作用的药理研究［J］，时珍国医国药，2005，16（1）：73-74.

［18］李岩，孙思予，周卓.白术对小鼠胃排空及小肠推进功能影响的实验研究［J］.辽宁医学杂志，1996，10（4）：186.

［19］彭博，贺蓉，杨滨，等.厚朴和凹叶厚朴对实验性胃肠动力障碍的药效作用差异研究［J］.中国中药杂志，2010，35（10）：2624-2627.

［20］王贺玲，白菡，王学清，等.厚朴对实验大鼠的胃动力影响［J］.实用药物与临床，2007，10（20）：65-66.

［21］王本祥.现代中药药理学［M］.天津：天津科学技术出版社，1997：636.

［22］朱金照，冷恩仁，陈东风，等.15味中药促胃肠动力作用的筛选研究［J］.第三军医大学学报，2000，22（5）：436-438.

［23］张宁，李岩，孙利平.不同浓度砂仁水提液对小鼠胃肠运动比较的研究［J］.辽宁医学杂志，2003，17（3）：141-142.

［24］李卫先，李飞燕，李达.鸡内金不同炮制方法水提液对小鼠胃肠运动比较的研究［J］.湖南中医杂志，2008，24（2）：100-101.

［25］Patel YC.Somatostatin and its receptor family［J］.Front Neuroendocrinol，1999，20（3）：157-198.

［26］Corleto VD.Somatostatin and the gastrointestinal tract［J］.Curr Opin Endocrinol Diabetes Obes，2010；17（1）：63-68.

［27］de Hender WW，Lamberts SW.Somatostatin analog therapy in treatment of gastrointestinal disorders and tumors［J］.Endocrine，2003，20（3）：285-290.

［28］Foxx-Orenstein A，Camilleri M，Stephens D，et al.Effect of a somatostatin analogue on gastric motor and sensory functions in healthy humans［J］.Gut，2003，52（12）：1555-1561.

［29］王英德，唐海英，张延军，等.功能性消化不良患者胃排空和胃肠激素的变化［J］.中华消化杂志，2001，21（6）：369.

［30］唐红卫，黄裕新，徐海峰.功能性消化不良患者症状分型、胃排空功能、胃肠激素水平的相关性［J］.世界华人消化杂志，2003，11（11）：1715-1719.

［31］黄文，林曰增，李东涛，等.功能性消化不良患者胃排空障碍与血浆胃动素和生长抑素的关系［J］.实用医药杂志，2007，24（7）：809-810.

［32］Jonsson BH，Uvnas Moberg K，Theorell T，et al.Gastrin，cholecystokinin，and somatostatin in a laboratory experiment of patients with functional dyspepsia［J］.Psychosom Med，1998，60（3）：331-337.

（编辑 裘孝琦）

EffectsofJianpixiaoshiDecoction on GastrointestinalMotility in Ratswith Spleen-deficiency

ZHANGJin1，2，LIYan1

（1.DepartmentofGastroenterolgy，Shengjing Hospital，China MedicalUniversity，Shenyang 110004，China；2.DepartmentofGastroenterolgy，The FirstAffiliated Hospital，Liaoning MedicalUniversity，Jinzhou 121000，China）

Objective To investigate the regulating effect of Jianpixiaoshi Decoction（JPXSD）on gastrointestinal motility in rats of functional dyspepsia（FD）with spleen deficiency syndrome.MethodsForty healthy male SDrats were randomly divided into fourgroups：normalcontrolgroup，model group，model traditional Chinese medicine（TCM）group and model western medicine group.Except for the normal control group，FD model ofspleen-deficiency type was established by swimming to exhaustion on alternate daysand alternating feeding ofcabbage and lard for25 days.Corresponding drugs were then administrated to those fourgroups：distilled water，JPXSD and Mosapride distilled watersolution once a day by gavage for7 days.Symptoms and body weights of these rats were observed and recorded during the experiment.After the last of drug administration，all groups were fasted for24 hours.Nutritious semisolid paste marked with ink was given orally to the rats，GERand IPR of1 hourwere detected underanesthesia by sodium thiopental and blood were collected at the same time.The concentration of serum SP and SS were measured by ELISA according to the instructions.ResultsJPXSD improved the symptoms of model rats.Model TCM group showed significantly increased body weight，higher GER，lower IPR，higher serum SP level and lower SS level when compared to model group（P＜0.05）.ConclusionJPXSD could improve the symptoms of rat with spleen-deficiency，raise its body weight，accelerate the decreased gastric emptying and bring back the hyperactive small intestinal movementto normal.The regulating role ofJPXSDmay be realized through the increase ofserum SP leveland decrease ofSS level.

Jianpixiaoshi decoction；spleen-deficiency syndrome；gastrointestinal motility；somatostatin；substance P

R572

A

0258-4646（2015）08-0690-04

辽宁省科技厅药物源头创新研究课题

张进（1988-），男，医师，硕士.

李岩，E-mail：liy@sj-hospital.org

2014-05-26

网络出版时间：