垂体腺瘤组织中基质金属蛋白酶－2和β－连环蛋白的表达与其侵袭性的相关性研究

李伟强，杨劲松

(1.太康县人民医院，河南 周口461400;2.郑州大学实验动物中心，河南 郑州450052)

垂体腺瘤常见的颅内神经系统肿瘤，大多数为良性，预后较好，但有部分患者具有一定的侵袭性，这与垂体腺瘤复发、恶性倾向等具有有关关系［1］。但是，目前关于垂体腺瘤的侵袭性机制及对预后的影响尚未完全阐明。基质金属蛋白酶－2 和β－连环蛋白均是与肿瘤有关的具有多种功能的蛋白，作者采用免疫组化S-P 法检测垂体腺瘤组织中基质金属蛋白酶－2 和β－连环蛋白的表达，并分析两者表达水平与垂体腺瘤侵袭性的相关性。

1 资料与方法

1.1 临床资料 入组2010年1月至2014年6月郑州大学第一附属医院神经外科和太康县人民医院神经外科开颅或微创手术切除的垂体腺瘤组织83 例，所有组织标本均经病理组织学确诊，男47 例，女36 例，年龄31 ～76 岁，中位年龄45 岁;病理类型:泌乳素腺瘤35 例，生长激素腺瘤17 例，混合性腺瘤13 例，促肾上腺皮质激素腺瘤9 例，无功能性腺瘤9 例;根据Wilson改良Hardy 分类系统分级分期法［2］对全组87 例垂体腺瘤进行分期，根据分期结果将其分为2 类，其中侵袭性垂体腺瘤40 例、非侵袭性垂体腺瘤43 例。

1.2 免疫组化S-P 法检测垂体腺瘤组织中基质金属蛋白酶-2 和β-连环蛋白的表达 所有标本均经质量分数4%甲醛固定、石蜡包埋，然后制成4 μm 切片，按照免疫组化S-P 试剂盒说明书进行垂体腺瘤组织中基质金属蛋白酶－2 和β－连环蛋白表达检测，并以已知阳性组织切片作为阳性对照，以PBS 代替一抗作为阴性对照。本研究所用鼠抗人基质金属蛋白酶－2和β－连环蛋白单克隆抗体及免疫组化S-P 试剂盒均购自福州迈新生物工程有限公司。

1.3 结果评判 所有切片均在高倍镜下，随机取5 个视野，用全自动彩色病理图像分析仪测定其灰度值，并取其平均数作为最终结果，灰度值越高，表达水平越低;灰度值越低，表达水平越高。

1.4 统计学处理 采用SPSS 17.0 进行数据处理，灰度值用±s 表示，2 组之间比较采用t 检验，并采用Pearson 相关分析法分析两者的相关性，检验水准α=0.05。

2 结果

基质金属蛋白酶－2 表达于垂体腺瘤细胞的胞浆内，β－连环蛋白表达于垂体腺瘤细胞的细胞膜及少量细胞浆内，两者均染色呈浅黄色至棕黄色。根据图像分析结果，我们发现，侵袭性垂体腺瘤组织中基质金属蛋白酶－2 的灰度值为137.4 ±9.6，显著低于非侵袭性垂体腺瘤的173.8 ±15.4，提示侵袭性垂体腺瘤组织中基质金属蛋白酶－2 的表达水平显著高于非侵袭性垂体腺瘤(P ＜0.05);侵袭性垂体腺瘤组织中β－连环蛋白的灰度值为157.6 ±13.4，显著高于非侵袭性垂体腺瘤的145.2 ±10.1，提示侵袭性垂体腺瘤组织中β－连环蛋白的表达水平显著低于非侵袭性垂体腺瘤(P ＜0.05)。经Pearson 相关分析法分析后发现，垂体腺瘤组织中基质金属蛋白酶－2 和β－连环蛋白的表达呈负相关(r=－0.637，P ＜0.05)。

3 讨论

垂体腺瘤常见的颅内神经系统肿瘤，发病率仅次于脑胶质瘤和脑膜瘤，垂体腺瘤大多数为良性，经微创或开颅手术切除后预后良好，但有部分患者肿瘤组织具有一定的侵袭性，使得肿瘤组织切除不干净，易于复发，以及向周围组织浸润［1－3］。基质金属蛋白酶－2是基质金属蛋白酶家族成员之一，在细胞外基质的降解中具有重要作用，能够促进细胞外基质的降解，破坏基底膜，使肿瘤细胞易于向周围扩散，发生肿瘤的侵袭迁移，其已经被证实在胃癌、乳腺癌、宫颈癌等多种实体瘤中存在高表达，并促进肿瘤的浸润转移等［4］。本文结果显示，侵袭性垂体腺瘤组织中基质金属蛋白酶－2 的表达显著高于非侵袭性垂体腺瘤，提示基质金属蛋白酶－2 可能在垂体腺瘤的侵袭性发生中具有促进作用，这与蔡华等［4］的研究结果一致。β－连环蛋白是由CTNNB1 基因编码的一种多肽链蛋白质，相对分子质量约为92 000 ～95 000，其既是同型细胞间黏附连接的主要结构成分，又是Wnt 信号传导的下游元件。正常情况下，β－连环蛋白大多与细胞膜上的E－钙黏蛋白结合，形成复合体，介导同型细胞之间的黏附，维持上皮细胞的完整性和极性，精确调控细胞的迁移［4］;少量存在于细胞浆中的β－连环蛋白则发挥介导Wnt 信号传导的作用［5］。研究［6－7］证实，多种恶性肿瘤组织中存在β－连环蛋白的异常表达，β－连环蛋白表达水平的高低可以作为独立的肿瘤预后评估指标。本研究结果显示，侵袭性垂体腺瘤组织中β－连环蛋白的表达水平显著低于非侵袭性垂体腺瘤，提示减少β－连环蛋白表达可能具有诱发垂体腺瘤侵袭的作用，这与夏多贵等［8］的研究结果一致。另外，本研究结果还显示，垂体腺瘤组织中基质金属蛋白酶－2和β－连环蛋白的表达呈负相关关系，提示两者在垂体腺瘤组织侵袭性发生的过程中相互影响。总之，垂体腺瘤组织中存在基质金属蛋白酶－2 和β－连环蛋白的异常表达，其表达水平检测可用于垂体腺瘤侵袭性的评估。

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