归芷软胶囊治疗黄褐斑的实验研究

梁 春， 郭建明， 段金廒， 黄 婧， 刘 培， 钱大玮

（南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心中药资源产业与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心，江苏南京210023）

归芷软胶囊治疗黄褐斑的实验研究

梁 春， 郭建明， 段金廒*， 黄 婧， 刘 培， 钱大玮

（南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心中药资源产业与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心，江苏南京210023）

目的观察归芷软胶囊 （白芷、当归、珍珠粉、银杏叶等）对黄褐斑模型小鼠肝脏和皮肤中酪氨酸酶水平、超氧化物歧化酶 （SOD）活力、丙二醛水平、皮肤中黑色素细胞免疫组化的影响。方法60只SPF级雌性ICR小鼠随机均分成空白组，模型组，VC片组，归芷软胶囊低、中、高剂量，除空白组外各组接受中波紫外线照射加肌肉注射黄体酮诱发黄褐斑。测定各组小鼠肝脏和皮肤中的酪氨酸酶和丙二醛的水平，SOD活力，同时采用免疫组化法观察小鼠皮肤中Melan A的表达。结果与模型组相比，归芷软胶囊低、中、高剂量组肝脏和皮肤中酪氨酸酶和丙二醛水平，皮肤中黑色素细胞的阳性目标面积、平均直径、积分光密度明显降低，有显著性差异 （P＜0.01或P＜0.05）；阳性对照组维生素C片组小鼠皮肤中SOD活力明显升高，有显著差异 （P＜0.05），其它组没有显著性差异。结论归芷软胶囊对黄褐斑模型小鼠有一定的防治作用。其机制可能与抑制酪氨酸酶活性和黑色素细胞的增殖，提高机体抗氧化能力有关。

归芷软胶囊；黄褐斑；酪氨酸酶；超氧化物歧化酶；丙二醛；黑色素

黄褐斑是一种面部色素代谢障碍的损容性皮肤病。在祖国医学古籍文献中记载为 “肝斑”、 “黧黑斑”。好发于面部，形状为不规则的淡褐色或黄褐色斑片，常对称分布于眼眶、两颊、额部、口角等处，边界较清，形似蝴蝶；伴有月经量少、痛经、睡眠不佳等症状，病程缠绵，易诊难治等；给黄褐斑患者带来了生理、心理、精神等诸多方面的烦恼和痛苦。本研究归芷软胶囊对黄褐斑小鼠肝脏、皮肤中酪氨酸酶 （TYR）水平，超氧化物歧化酶（SOD）活性，丙二醛 （MDA）水平，皮肤中黑色素细胞病理形态学变化的影响，为开发治疗黄褐斑药物提供依据。

黄褐斑的发病机理十分复杂，可能的相关因素也较多，不过迄今为止研究者较普遍认可的说法是：人体内分泌紊乱、紫外线照射、遗传等因素是导致黄褐斑生成的主要因素［1］；而中医则认为人体是一个有机整体，黄褐斑虽然是一种发生在面部的疾病，但多因脏腑功能失调，气血不营，脉络不畅，瘀而成斑为主，与肝、脾、肾三脏有关，尤其与肝脏关系最为紧密，而血瘀贯穿始终［2］。历代医家对此病的治疗虽有不同，但都遵循辨证论治的原则。

归芷软胶囊处方来源为自拟方，是根据黄褐斑发病病因及发病机制，选取具有养血活血、祛斑化瘀、美容养颜、补血消斑功效的中药组成的复方。方由白芷、当归、珍珠粉、银杏叶提取物等六味药组成。方中白芷具有祛风燥湿、消肿排脓、生肌止痛之功，能 “长肌肤、润泽颜色，可做面脂”；当归是补血之圣品，具有质润泽肤、养血活血、补血生肌的作用；珍珠具有安神定惊、润肤祛斑、解毒生肌的功效；银杏叶提取物具有活血化瘀、通络止痛、敛肺平喘、化浊降脂的活性。诸药合用，可共奏活血通脉，补血养颜，祛瘀消斑的功效。

1 材料与方法

1.1 试剂与药物 冰乙酸 （体积分数≥99.5%）、无水乙醇 （体积分数≥99.7%） （南京化学试剂有限公司）；甲醛 （体积分数为 37% ～40%）（西陇化工股份有限公司）；氯化钠 （上海凌峰化学试剂有限公司）；Anti-Melan A抗体（北京博奥森生物技术有限公司）；ElivisionTMsuper免疫组化检测试剂盒 （福建迈新生物技术有限公司）；PBS缓冲液（自制）：每升中含8 g NaCl，0.2 g KCl，1.44 g Na2HPO4，0.24 g KH2PO4，pH调至7.4。其他试剂均为进口分装或国产分析纯。

蛋白定量测试盒 （考马斯亮蓝法，批号140605）、 丙 二 醛 （MDA） 试 剂 盒 （批 号140603）、超氧化物歧化酶 （SOD）测定试剂盒（批号140621）（均购自南京建成生物工程有限公司）；酪氨酸酶 （TYR）测定试剂盒 （由南京建成生物工程有限公司代购）。

黄体酮注射液：每支20 mg/m L（批号130711），购自上海通用药业股份有限公司，使用前用灭菌注射用水稀释至所需浓度；维生素C片每片0.1 g（批号130505），购自东北制药集团沈阳第一制药有限公司；灭菌注射用水每支5 m L（批号120605），购自江苏方强制药厂有限责任公司。

归芷软胶囊 （自制，以下简称归芷），主要由当归、白芷、银杏叶提取物、珍珠粉等六味组成。当归、白芷醇提物、银杏叶提取物、珍珠粉等，按处方比例制备成软胶囊内容物。

1.2 实验动物 SPF级ICR小鼠，60只，体质量（20±2）g，均为雌性，由上海杰思捷实验动物中心提供，动物许可证号：SCXK（沪）2012-0006。

动物饲养条件：60只小鼠分笼饲养。在自然条件相同的情况下，常规饲养，保持自然光照，无不良因素影响，饲养6 d适应实验环境后开始进行实验。

1.3 主要仪器设备 Leica ASP300S全自动真空组织脱水机；Thermo包埋机，型号Histostar；Thermo手动切片机，型号Finesse E+；Shandon全自动染色机；OLYMPUS显微镜BX41；TDL-80-2B型低速台式离心机 （上海安亭科学仪器厂）；SPX-150BⅢ型生化培养箱 （天津市泰斯特仪器有限公司）；Mettler Toledo型电子分析天平（梅特勒-托利多仪器有限公司）；FSH-Ⅱ型高速电动匀浆器 （江苏金坛金城国胜实验仪器厂）；Enspire multimode plate reader检测仪（美国perkinelmer公司）；WH-1微型漩涡混合仪 （上海沪西分析仪器厂有限公司）；EPED-E2-30TF型实验室级超纯水器（南京易普易达科技发展有限公司）；紫外线照射灯，小鼠造模笼具 （自制），宠物剃毛器等。

2 实验方法

2.1 动物分组及模型制备

2.1.1 动物分组 取雌性ICR小鼠，按体质量随机分成6组，每组10只，分别为空白组、模型组、阳性对照组、归芷低剂量组、归芷中剂量组及归芷高剂量组。

2.1.2 动物模型制备 黄褐斑药理动物模型的研究经查阅文献 ［3-5］主要的动物模型有：雌激素（黄体酮）全身攻击法、紫外线照射法等，但仍属探索阶段，至今尚无公认可行的造模方法。实验前期参考文献，对雌激素全身攻击法、紫外线照射法、紫外线照射辅助雌激素法进行模型复制筛选，最终采用紫外照射辅助黄体酮注射液攻击的方法进行造模。

各组小鼠均用剃毛器除去背部短毛，用脱毛膏涂于小鼠背部（面积约3.0 cm×3.0 cm），2 min后用抹布擦干净，实验期间小鼠背部短毛长出者，应立即除净。除空白组外，其余5组实验小鼠均放置在自制的造模笼具内，以280～320 nm波长，每日照射小鼠背部皮肤1次，照射时间60 min，动物与光源的距离为20 cm，连续照射31 d；同时，空白组肌肉注射灭菌注射用水5 mL/kg，模型组及各给药组肌肉注射黄体酮注射液20 mg/kg（相当于人临床等效剂量的8倍）。各组均注射于小鼠大腿根部，两腿交替，连续31 d，并每天观察其脱毛部位皮肤变化情况。

2.2 给药方法 造模的同时开始按分组灌胃给药，每天1次，连续31 d。每天下午①空白组，按10 mL/kg体质量灌服生理盐水；②模型组，同空白组；③归芷低、中、高剂量组，按 3.05，6.1，12.2 g/kg体质量灌服归芷水溶液 （临床等效剂量的3.5，7，14倍）；④阳性组，按0.1 g/kg体质量灌服维生素C片水溶液 （相当于人临床等效剂量的10倍）。

2.3 取材及样品制备

2.3.1 取材 治疗30 d后，截止取材时，除去灌胃、自然死亡及造模死亡的小鼠，取材小鼠共54只，于取材前一天禁食不禁水12 h，末次给药1 h后，小鼠脱颈椎处死，迅速取其肝脏和背部脱毛处全层皮肤 （不含皮下脂肪），用于生化指标检查。另外，取小鼠去毛皮肤1块 （1.0 cm×1.0 cm），用于皮肤黑色素细胞的免疫组化检测。

2.3.2 样品制备 肝脏和皮肤样本的制备 取肝脏和背部脱毛处全层皮肤，用预冷生理盐水（4℃）冲洗，除净血液和其他结缔组织，用滤纸拭干；然后切取肝脏、皮肤各0.3 g，分别加入于样本9倍量的预冷生理盐水 （4℃），尽量剪碎组织，再倒入试管中，高速均浆，分别制成10%肝脏、皮肤组织匀浆液；再以3 000 r/min转速离心10 min，取上清液，分别制备肝脏和皮肤样本，于-80℃冷冻保存。

免疫组化样本制备 另取小鼠照射部位皮肤1块（面积1.0 cm×1.0 cm），用10%甲醛固定皮肤，常规石蜡包埋切片，再经脱蜡至水，抗原修复后，黑色素标记采用免疫组织化技术，加Anti-Melan A抗体，采用免疫组化两步法，DAB显色，苏木素复染等过程，用于小鼠皮肤黑色素细胞的免疫组化检测［6-7］。

2.4 指标测定

2.4.1 小鼠肝脏和皮肤指标的测定 SOD活性、MDA水平的测定 取上述匀浆上清液，按试剂盒操作要求对各组小鼠的皮肤和肝脏进行指标测定，再按说明书公式计算SOD活性及MDA水平。

酪氨酸酶的测定 按照Elisa试剂盒的操作要求和步骤进行测定，最后计算样品酪氨酸酶浓度。

工作原理 本试剂盒应用生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法（Elisa）测定标本中小鼠酪氨酸酶水平。样品加入到预先包被了酪氨酸酶单克隆抗体的酶标孔中，加入酪氨酸酶，温育；温育后，加抗酪氨酸酶抗体，再与链霉亲和素-HRP结合，形成免疫复合物，再经过温育和洗涤，除去未结合的酶，加入底物A、B，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色，颜色的深浅与样品中小鼠酪氨酸酶的浓度呈正相关。用酶标仪在450 nm波长下，测量各孔的吸光度 （OD值）。通过标准曲线计算样品中小鼠酪氨酸酶水平。

2.4.2 小鼠黑色素阳性目标的计算机病理图像分析 各组选取5只小鼠的皮肤组织块，各制成1张病理切片，每张片随机观察5个互不重叠的视野，找到阳性目标 （皮肤表皮和附件上皮细胞胞浆中呈现棕色反应）后，用计算机病理图像分析系统软件（Image-Pro®Plus5.0.2（IPP）软件）对阳性目标图像进行定量分析，得出每张切片5个视野及每组5只动物黑色素阳性目标的目标面积、平均直径、积分光密度。

2.5 统计学方法 实验数据采用SPSS 11.0软件中的Descriptives进行统计，实验数据采用均数±标准差 （）表示；与空白组和模型组比较，采用ANOVA中的Dunnett法进行组间两两比较，P＜0.05表示显著性差异，P＜0.01表示极显著性差异，两者均表示差异具有统计学意义。

3 结果

3.1 归芷软胶囊对黄褐斑模型小鼠肝脏及皮肤酪氨酸酶的影响 实验结果表明，同空白组相比，模型组小鼠肝脏、皮肤中酪氨酸酶水平明显增加，具有显著性差异 （P＜0.05）；与模型组相比，维生素C片组，归芷低、中、高3个剂量组的肝脏、皮肤中TYR水平明显降低，有显著性差异 （P＜0.05或P＜0.01）。结果见表1。

表1 归芷软胶囊对黄褐斑小鼠模型肝脏及皮肤酪氨酸酶含量的影响 （，n=9）Tab.1 Impact of Guizhi Soft Capsules on tyrosinase contents in the liver and skin of chloasmamousem odel（，n=9）

表1 归芷软胶囊对黄褐斑小鼠模型肝脏及皮肤酪氨酸酶含量的影响 （，n=9）Tab.1 Impact of Guizhi Soft Capsules on tyrosinase contents in the liver and skin of chloasmamousem odel（，n=9）

注：与空白组比较，#P＜0.05；与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

组别 酪氨酸酶/（ng·mL-1）肝脏 皮肤空白组130.60±19.87 214.45±17.34模型组 162.69±12.57# 248.79±43.04#维生素C片组 132.32±26.45* 215.50±14.64*归芷低剂量组 131.50±29.87* 196.49±22.95**归芷中剂量组 135.23±25.97* 193.57±24.19**归芷高剂量组 123.77±15.56** 208.31±43.24*

3.2 归芷软胶囊对黄褐斑模型小鼠肝脏及皮肤氧化指标的影响 实验结果显示，小鼠经造模后，同空白组相比，模型组小鼠肝脏、皮肤中SOD活力明显降低，MDA水平明显增加，具有显著性差异（P＜0.05或P＜0.01）。

与模型组相比，除维生素C片组小鼠皮肤中SOD活力明显升高，具有显著性差异 （P＜0.05）；其余给药组皮肤、肝脏的SOD活力与模型组相比，没有统计学意义，但活力有升高的趋势。

与模型组相比，除归芷低剂量组皮肤有降低MDA水平的趋势，没有统计学差异外。其余给药组肝脏、皮肤中的MDA水平均显著降低，具有显著性差异 （P＜0.05或P＜0.01）。结果见表2、表3。

表2 归芷软胶囊对黄褐斑小鼠模型肝脏及皮肤中超氧化物歧化酶活力的影响 （，n=9）Tab.2 Im pact of Guizhi Soft Capsules on SOD activity in the liver and skin of chloasma mouse model（，n=9）

表2 归芷软胶囊对黄褐斑小鼠模型肝脏及皮肤中超氧化物歧化酶活力的影响 （，n=9）Tab.2 Im pact of Guizhi Soft Capsules on SOD activity in the liver and skin of chloasma mouse model（，n=9）

注：与空白组比较，#P＜0.05；与模型组比较，*P＜0.05

肝脏 皮肤空白组组别 超氧化物歧化酶/（U·mgprot-1）108.17±11.80 528.36±60.94模型组 95.36±5.92# 426.68±22.74#维生素C片组 89.06±4.44 504.52±76.44*归芷低剂量组 95.30±16.27 450.67±78.98归芷中剂量组 97.19±11.63 430.30±63.00归芷高剂量组97.20±7.43 459.54±103.19

表3 归芷软胶囊对黄褐斑小鼠模型肝脏及皮肤中丙二醛的影响（，n=9）Tab.3 Im pact of Guizhi Soft Capsules on malondialdehydelevel in the liver and skin of chloasma mouse model（，n=9）

表3 归芷软胶囊对黄褐斑小鼠模型肝脏及皮肤中丙二醛的影响（，n=9）Tab.3 Im pact of Guizhi Soft Capsules on malondialdehydelevel in the liver and skin of chloasma mouse model（，n=9）

注：与空白组比较，#P＜0.05，##P＜0.01；与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.05

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3.3 归芷软胶囊对黄褐斑模型小鼠皮肤黑色素细胞免疫学的影响 在前期模型筛选时，小鼠皮肤做了HE染色，在光学显微镜下观察黑色素细胞及黑色素在皮肤中的分布情况，但切片不能够很清楚的看到黑色素，所以实验中未选择做HE染色，只做了黑色素免疫组化。

空白组：小鼠表皮中可见极少黑色素细胞，毛囊、皮脂腺基底细胞中见少量黑色素，胞浆着色棕褐色。以Anti-Melan A为阳性对照，黑色素细胞排列于基底层；模型组：黑色素主要存在小鼠皮肤真皮层，多见于汗腺、毛囊、皮脂腺，呈强阳性反应，棘细胞层和基底细胞层呈现深棕色。黄褐斑多表现为皮肤的黑色素沉着，分别给予维生素C片组和不同剂量的归芷软胶囊内容物治疗后，模型小鼠的皮肤黑色素得到明显的改善；维生素C片组小鼠皮肤基底层黑色素数量较模型组有一定减少，呈棕褐色；与空白组相比，黑色素数量减少、深度变浅。尤其是中剂量组时，小鼠的皮肤黑色素大量减少，黑色素深度变浅。提示归芷软胶囊能显著改善小鼠皮肤黑色素的形成，对黄褐斑具有一定的疗效作用。结果见图1。

光密度反映物体对光的吸收率 （透过率），反应物体颜色的深浅程度；颜色越深，其对光线的吸收越多，故光密度越高。积分光密度颜色越深，面积越大，光密度越高。

实验结果显示，模型组小鼠皮肤黑色素的阳性目标的面积、平均直径、积分光密度值明显高于空白组，具有极显著性差异 （P＜0.01）；与模型组相比，维生素C片组，归芷低、中、高3个剂量组的皮肤黑色素的阳性目标、平均直径、积分光密度值明显降低，有极显著性差异 （P＜0.01），结果见表4。

图1 归芷软胶囊对黄褐斑模型小鼠皮肤免疫组化形态Fig.1 Effect of Guizhi Soft Capsules on immunohistochem istry morphology of skin melasma mousem odel

表4 归芷软胶囊对黄褐斑小鼠模型皮肤的目标面积、平均直径、积分光密度的影响 （，n=5）Tab.4 Im pact of Guizhi Soft Capsules on the target area，mean diameter，and integrated optical density in the skin tissue of mouse model of skin melasma（，n=5）

表4 归芷软胶囊对黄褐斑小鼠模型皮肤的目标面积、平均直径、积分光密度的影响 （，n=5）Tab.4 Im pact of Guizhi Soft Capsules on the target area，mean diameter，and integrated optical density in the skin tissue of mouse model of skin melasma（，n=5）

注：与空白组比较，#P＜0.05，##P＜0.01；与模型组比较，**P＜0.01

积分光密度空白组组别 面积/μm2 平均直径/μm 222.92±36.34 13.06±0.92 74.12±12.42模型组 579.17±129.23##17.17±0.59## 178.28±38.95##维生素C片组 278.98±39.30** 13.41±0.49** 88.24±11.69**归芷低剂量组 300.50±59.70** 13.94±1.13** 96.90±19.52**归芷中剂量组 310.18±30.27** 15.31±0.91** 107.86±10.89**归芷高剂量组 297.09±24.80** 14.28±0.52** 98.73±6.54**

4 讨论

通过测定模型小鼠皮肤和肝脏的TYR水平、MDA水平、SOD活力及皮肤黑色素细胞免疫组化结果，确定本实验方法建立黄褐斑小鼠模型是成功的。并且通过以上实验数据显示归芷中剂量组（相当于人临床等效剂量的7倍）比归芷低、高剂量组 （相当于人临床等效剂量的3.5，14倍）效果好。

当皮肤受到外界环境的影响，如日光紫外的照射超过一定的程度，皮肤老化就成为一种必然，接着就会产生老年斑、黄褐斑等。但随着崇尚绿色、回归大自然的潮流兴起，开发安全、高效而经济的新型抗衰老产品，已成为国内外许多研究者重点关注的内容；并且从天然中草药中提取有效抑制黑色素的成分，如白芷提取物［8］、当归提取物［9］、银杏叶提取物［10］，功效好，副作用小，且无过敏现象，具有无比的优越性。

经查阅文献，酪氨酸酶是一种含铜的多酚氧化酶，广泛存在于动植物和人体内，在黑色素的形成过程中起着重要的作用，是黑色素代谢中的关键酶。皮肤黑色素的合成是酪氨酸在酪氨酸酶作用下与氧结合成为多巴，多巴又在酪氨酸酶的作用下再氧化失去两个氢原子变为多巴醌，然后与氧结合发生的一系列变化［11］。酪氨酸酶的活性决定着黑色素的合成及其量的多少，同时也是黑素细胞分化成熟的特征性标志之一。很多补益、活血中药多都具有抑制酪氨酸酶活性、抗氧化、促进黑色素代谢的作用。复方中药治疗黄褐斑研究虽有限，但其主要机制与抑制黑素合成、黑素细胞增殖、抑制酪氨酸酶活性、清除多余超氧自由基、调节微量元素含量有密切关系，如逍遥散、桃红四物汤、六味地黄丸、补中益气汤、红玉祛斑胶囊等［12-13］。

还有文献报道，SOD活力降低，不足以清除生理状态下的超氧自由基，反而使其含量相对增加，氧化反应加剧，黑素生成过多，亦可促使黄褐斑形成。黑色素的生成与体内的氧化和抗氧化机制有密切关系，若体内氧化与抗氧化之间的动态平衡被破坏，将导致酪氨酸氧化反应加速，黑色素形成过多而致黄褐斑。因此，抗氧化也是黄褐斑的治疗的重要机制之一。

本实验结果显示，归芷软胶囊给药组均能够显著降低黄褐斑模型小鼠肝脏、皮肤的酪氨酸酶的水平，凸显现出归芷软胶囊主要是通过抑制小鼠体内的酪氨酸酶的活性，降低酪氨酸水平，来减少黑色素的生成和沉着。据文献报道，白芷提取物、当归提取物、珍珠粉、银杏叶提取物对酪氨酸酶有抑制作用；同时，有文献报道，主要通过抑制酪氨酸酶活性、促进酪氨酸酶降解、抑制黑素细胞受体活性、阻碍黑素体的成熟和转运过程、避免可能诱发和加重色斑的因素等［14］，与本实验结果相符。

综上所述，归芷软胶囊对黄褐斑小鼠模型有一定的保护和治疗作用。其机制可能与抑制酪氨酸酶活性、抑制黑色素细胞的增殖，提高机体抗氧化能力有关。这提示对黄褐斑的预防和治疗还应有其他机制，需进一步研究，本研究为中药预防和治疗黄褐斑的应用提供了实验依据。

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Experimental study on Guizhi Soft Capsules treating chloasm a

LIANG Chun， GUO Jian-ming， DUAN Jin-ao*， HUANG Jing， LIU Pei， QIAN Da-wei

（Jiangsu Collaborative Innovation Center of ChineseMedicinal Resources Industrialization，and Nationaland Local Collaborative Engineering Center of ChineseMedicinal Resources Industrialization and Formulae InnovativeMedicine，Nanjing University of ChineseMedicine，Nanjing 210023，China）

AIMTo observe the impacts of Guizhi Soft Capsules（Angelicae dahuricae Radix，Angelicae sinensis Radix，Pulvis Pernnlae，Ginko Folium，etc）on tyrosinase level，superoxide dismutase（SOD）activity，malondialdehyde（MDA）level in the liver and skin ofmousemodel for chloasma.METHODSSixty ICR femalemice of SPF grade were equally assigned into blank，model，Vitamin C，Guizhi Soft Capsules low-，middle-，and high-dose groups.Except the blank group，all of the rest animals received ultraviolet irradiation and intramuscular injection of progesterone，which induced chloasma.After the treatment，the liver and skin were collected，their tyrosinase level，SOD activity，malondialdehyde levelwere detected and Melan A on skin was observed by immunohistochemistry.RESULTSCompared with the model group，the tyrosinase and malondialdehyde levels in mouse skin and liver tissue，and the target skin area，the diameter（mean），the integrated optical density in the skin tissue of Guizhi Soft Capsules low-，middle-，and high-dose groups decreased significantly（P＜0.01 or P＜0.05）.The SOD activity in mouse skin tissue of the Vc group increased significantly（P＜0.05）.No significantdifferenceswere observed in other groups.CONCLUSIONGuizhi Soft Capsules plays a significant role in the protective and treatment of the mouse model for chloasma.Themechanism of the actionmay be related to inhibiting the activity of tyrosinase and the generation of skinmelanoma cell，and thus improves the oxidation resistance of tissues.

Guizhi Soft Capsules；chloasma；tyrosinase；superoxide dismutase；malondialdehyde；melanin

R285.5

A

1001-1528（2015）04-0716-06

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.04.006

2014-08-15

国家科技支撑计划项目 （2011BAI04B03）

梁 春 （1989—），女，硕士，研究方向为中药资源及资源化学、方剂功效物质及中药配伍禁忌。Tel：15205161014，E-mail：liangchunnj@126.com

*通信作者：段金廒 （1956—），博士，教授，博士生导师，研究方向为中药资源及资源化学、方剂功效物质及中药配伍禁忌。Tel：（025）85811116，E-mail：dja@njutcm.edu.cn