灵芝提取液对抗氯化钡所致心律失常的实验研究①

刘海燕，梁彩梅，杨文宝，黄秋菊，赵善民

（1.右江民族医学院2012级临床医学本科，广西 百色 53300 E－mail：1436179787＠qq.com；2.右江民族医学院生理学教研室，广西 百色 533000）

灵芝是中医药学宝库中的珍品，可谓“国宝”，具有调节体能、改善防御功能、预防疾病功能、抗衰老等生理功能。目前对灵芝的药理研究证明了其具有很高的药用价值，且近年来也被广泛用于临床，如治疗失眠健忘、咳嗽气喘，以及治疗肿瘤和糖尿病等方面都有很好疗效［1］。而且灵芝还具有降血压抗炎镇痛，抗衰老，治疗冠心病等作用［2］。但对其抗心律失常作用研究甚少。本实验以小白鼠为研究对象，探讨灵芝提取液对抗心律失常的作用，为临床应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 实验动物 选用体重为20～25g小白鼠，50只，雌雄不拘，清洁级，由右江民族医学院实验动物中心提供［许可证号：SYXK 桂2011－0010］。

1.2 药品 灵芝、盐酸普萘洛尔片、氯化钡。灵芝购自百色市民康大药房，产地：云南，批号：140601，规格：净选。盐酸普萘洛尔规格：10mg×100片，产地：山西云鹏制药有限公司，氯化钡：规格500g，产地：广东汕头市西陇化工厂，均由右江民族医学院生理实验室提供。

1.3 仪器 心电图机（广州市艾迪科逊医疗器械有限公司生产）由右江民族医学院机能实验中心提供，型号为ECG－6511，编号为：20024150。

1.4 方法

1.4.1 灵芝提取液的制备 取灵芝干品100g，剪碎，置于1 000ml蒸馏水浸泡1h后，置于烧杯中加热煮沸，改小火煮30min，冷却至室温后用纱布过滤，保留滤液。滤渣再用同样方法煮，合并两次滤液，文火。并将提取液灭菌、消毒，调pH 为7.30～7.50，渗透压为300mOsm／kg·H2O。

1.4.2 普萘洛尔溶液的制备 取10 mg普萘洛尔片剂100片，溶于200 ml生理盐水，使其浓度为0.5g／ml的药液供小鼠尾静脉注射。

1.4.3 氯化钡溶液的制备 取10g氯化钡粉末溶于100ml的生理盐水，使其浓度为0.1g／ml的药液供小鼠尾静脉注射。

1.4.4 动物分组 将50 只小白鼠随机分为空白组（生理盐水组）、对照组（普萘洛尔组）、低浓度组（灵芝提取液0.5g／ml）、中浓度组（灵芝提取液0.7g／ml）、高浓度组（灵芝提取液1g／ml）5组。在建立心律失常模型后，根据不同分组，注射不同药物浓度。

1.4.5 小鼠心律失常模型的建立 将小鼠固定于小鼠固定器中，按0.1 ml／10g剂量于尾静脉注射氯化钡溶液，1～2min后小鼠将会出现心律失常。

1.4.6 实验过程 20%乌拉坦腹腔注射（剂量为0.1 ml／10g）麻醉，将麻醉的小鼠固定于鼠台，连接已预热的心电图机的电极，记录正常的Ⅱ导联心电图（纸速度为25mm／s，标准电压1mV＝10mm），然后向小鼠尾静脉注射剂量为0.1ml／10g的0.1%氯化钡溶液，建立心律失常模型，5min后，记录心电图，再按照分组，注射相应药物浓度，记录用药后心电图，观察和比较各组小白鼠用药后对抗心律失常的情况。

1.5 统计学方法 采用SPSS 17.0统计学软件进行数据处理，计量资料用（±s）表示，组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用SNK 法，以P ＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

建立模型后，注射低、中、高浓度灵芝提取液后，心率减慢，而且与空白组对比，低、中、高浓度组心率显著减慢（P ＜0.01），说明灵芝提取液具有抗心律失常作用。此外，与对照组相比，低、中浓度组的心率减慢（P＜0.01），说明灵芝提取液抗心律失常比西药普萘洛尔更显著。同本组比较，对照组的QRS波时间延长，而低、中、高浓度组的QRS 时间也延长，但延长时间较短，见表1。

表1 5组动物模型用药前后心电图表现 （±s，n ＝10）

表1 5组动物模型用药前后心电图表现 （±s，n ＝10）

注：与空白组比较，a：P ＜0.01，b：P ＜0.05；与对照组比较，c：P ＜0.01，d：P ＜0.05

心率（次／分）P 波 时 间（s）QRS波时间（s）P－R间期（s）组别用药前 建模时 用药后用药前 建模时 用药后用药前 建模时 用药后用药前 建模时 用药后空白组 357.60±121.56 610.00±84.33 625.00±95.01 0.012±0.009 0.033±0.013 0.033±0.033 0.045±0.009 0.026±0.0.007 0.028±0.009 0.016±0.013 0.041±0.010 0.039±0.007对照组 621.70±103.97 621.70±103.97 461.80±41.62 0.028±0.037 0.037±0.007 0.036±0.008 0.048±0.023 0.053±0.007 0.055±0.016 0.028±0.032 0.053±0.037 0.049±0.033低浓度组 439.00±84.98 658.20±214.25 544.50±49.69ad 0.005±0.013 0.034±0.014 0.040±0.000 0.040±0.000 0.026±0.014 0.039±0.003 0.032±0.017 0.032±0.014 0.036±0.013中浓度组 444.60±117.70 676.40±81.00 600.90±67.03c 0.011±0.010 0.064±0.119 0.035±0.011 0.027±0.019 0.028±0.022 0.029±0.022c 0.025±0.024 0.029±0.026 0.031±0.026高浓度组 431.30±65.60 711.60±64.39 516.20±45.73a 0.010±0.014 0.038±0.010 0.039±0.007 0.044±0.013 0.041±0.023 0.046±0.016 0.048±0.010 0.048±0.017 0.055±0.026

3 讨论

利用尾静脉注射氯化钡是致小鼠心律失常的常规方法，故此可建立心律失常模型。从实验数据中，我们可以看出在建立模型后，注射低、中、高浓度灵芝提取液后，心率会出现减慢，而且与空白组对比，低、中、高浓度组、心率显著减慢（P ＜0.01），说明灵芝提取液具有抗心动过速作用。此外，与对照组相比，低、中浓度组的心率下降（P ＜0.01），说明灵芝提取液抗心律失常性能比西药普萘洛显著。此外，还可看出，同本组比较，对照组的用药QRS波时间有所延长，而低、中、高组的QRS波时间虽也延长，但延长比对照组短，即灵芝提取液的QRS延长时间比普萘洛尔延长时间短，说明在用灵芝提取液后QRS波时间得到抑制，心肌除极时间缩短，有利于心肌电活动恢复，更近一步说明灵芝提取液的抗心律效果比普萘洛尔更显著。氯化钡诱发的心律失常与多种离子流相关，静脉注射氯化钡可以增加心肌蒲氏纤维Na＋、Ca2＋电流，抑制心肌细胞K＋电流而诱发心律失常［3］。而普萘洛尔为β受体阻断药物，具有强β受体阻断作用，对β1 和β2受体选择性很低，用药后可使心率减慢，心肌收缩力和心排血量降低，冠脉血流量降低，心肌耗氧量减少，达到抗心律失常作用［4］。而灵芝子实体多糖能抑制四氧嘧啶诱导的NF－κB的活性，保护胰腺β细胞免受伤害，能降低血液黏度，增加心肌收缩力，增加冠状动脉血流量和心输出量，改善心律［5］。此外，有研究表明，灵芝含有灵芝多糖，具有抗血栓血凝、抗血脂、清除氧自由基作用［6－7］。在心律失常后，机体会产生大量的氧自由基，导致体内SOD 消耗增加以及自由基清除剂活性降低，从而引起氧自由基在体内聚集并与细胞膜发生脂质过氧化反应产生MDA，破坏膜的完整性，使心肌细胞电活动紊乱而发生恶性循环［8］。至于灵芝提取液是否通过清除心律失常后产生的自由基而起到抗心律失常作用，还需进一步探讨。目前临床上使用的抗心律失常的药物，均存在不足。而80年代以来，新开发的抗心律失常药物为数不多，综合临床应用抗心律失常药物的实践，人们提出并强调了抗心律失常药物的致（促）心律失常作用［9］。因此，通过研究灵芝提取液对小白鼠抗心律失常实验，表明灵芝水提取物具有抗心律失常作用，为开发新的抗心律失常的药物提供了新的理论基础。

［1］ 王晔.菌灵芝的药理作用和临床作用［J］.中国医药指南，2013，11（1）：252－253.

［2］ 石卫平.浅析灵芝药理在临床医学中的作用［J］.中国医药指南，2011，9（14）：303－304.

［3］ 高阳，刘艳，陈立朋，等.药物性和缺血性心律失常模型心肌M3受体表达差异与心律失常的关系［J］.中国病理生理杂志，2008，24（6）：1065－1068.

［4］ 杨宝峰，苏定冯，周宏灏.药理学［M］.北京：人民卫生出版社，2008：103.

［5］ 张晓云，杨春清.灵芝的化学成分和药理作用［J］.国外医药：植物药分册，2006，21（4）：152－155.

［6］ 李绪全，杨晓彤.灵芝多糖研究新进展［J］.中华新医药杂志，2004，3（9）：57.

［7］ 邓海林，吴佩颖，王建新.灵芝的研究进展［J］.时珍国医国药，2005，16（2）：141.

［8］ 孟玉娥.识得灵芝慧眼之灵芝药理作用［J］.生态文化，2011（3）：38－40.

［9］ ChiehFu－Chen，ShuMing－Chen，MaoTsun－Lin，et al.In vivo and in vitro studies on the mechanism of eardiovaseular ef－feel，Wu－Chu－Yu（evodiaeFruetu［J］.Am J Chin Med，1981，9（1）：39.