核桃叶提取液对家兔离体小肠平滑肌收缩活动的影响①

刘亭秀，宋庆，李静，王彩冰，黄永毅

（1.右江民族医学院2011级临床医学本科，广西 百色 533000 E－mail：1529235241＠qq.com；2.右江民族医学院2012级临床医学本科，广西 百色 533000；3.右江民族医学院应用生理学研究室，广西 百色 533000）

核桃（Juglans Regia L.）又称胡桃，为胡桃科植物，分布在广西、贵州、新疆、河北、河南、山东、山西等地，其营养丰富，有补肾壮阳、温肺润肠，强身健脑、驻颜延年之功用［1］，核桃叶具有杀虫、抗炎、抗衰老、增强记忆力等作用［2－5］；而目前尚未发现有核桃叶（Walnut Leaf）对小肠平滑肌活动影响的文献报道，本研究通过核桃叶提取液作用于家兔离体小肠，观察核桃叶是否对小肠平滑肌有影响，为核桃叶进一步开发利用提供实验依据。

1 材料和方法

1.1 实验动物 健康家兔10只，体重1.5～2kg，雌雄不拘，由右江民族医学院动物中心提供，动物许可证号：SCXK 桂2012－0003。

1.2 药材、试剂、仪器 核桃叶生品于2014年5月在广西百色市采集，晒干备用。氢氧化钠（天津市福晨化学试剂厂，批号：20120510）；pH 试纸（江苏泰州市奥克滤纸厂，批号：20120216）。恒温平滑肌槽（成都泰盟科技有限公司，型号：HW－400E）；生物机能实验系统（成都泰盟科技有限公司，型号：BL－420E＋）；肌张力换能器（中国北京航天医学工程研究所，型号：JH－2）。

1.3 核桃叶提取液的制备 将100g核桃叶加入4 000ml的水中浸泡1h，文火煮沸2h，16层纱布过滤后再用滤纸过滤，滤液用文火隔水浓缩至100 ml（相当于生药1g／ml），冷却后放入4℃冰箱保存，用时以0.01mol／ml NaOH 将水提液pH 调至7.5。

1.4 家兔小肠标本的制备 实验前家兔禁食24h，自由饮水。用木槌击家兔头部，昏迷后快速沿腹正中线开腹取出幽门以下的小肠约15cm 分离脂肪和肠系膜，将小肠剪成约1.5cm 的肠段，迅速用台氏液（参照实验生理科学［6］的方法配制）将肠内容物洗净，放入充有氧气的台氏液中备用。

1.5 实验方法 将每只家兔的肠段均随机一段分入正常对照组及核桃叶低、中、高浓度组，共4组。用蛙心夹在肠段两端对角固定，安放盛有充氧台氏液的HW－400E恒温平滑肌槽内，其中一端接于肌张力换能器与BL－420E＋生物机能实验系统连接，调节基线在2g，保持灌流管内台氏液平面在同等高度，待小肠平滑肌活动曲线稳定描记1 min后，在灌流管内加入相应的液体（正常对照组加台氏液0.1 ml，核桃叶低、中、高浓度组分别加入1g／ml核桃叶提取液0.1、0.2、0.4ml）后描记小肠平滑肌活动曲线。

1.6 实验数据测量 测量1 min内曲线全部收缩波的平均张力作为收缩力（g），测量1 min内曲线收缩波的个数作为收缩频率（次／分）。给药前和给药后2 min分别对收缩力和收缩频率进行测量。

1.7 统计学方法 实验数据利用SPSS 16.0统计软件进行统计分析，计量数据以（±s）表示，两组间均数比较用t检验，P ＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

各组给药前的小肠平滑肌收缩力比较差异无统计学意义（P ＞0.05），正常对照组、核桃叶低浓度和中浓度组给药后的小肠平滑肌收缩力与给药前及各组间的两两比较差异均无统计学意义（P ＞0.05）；核桃叶高浓度组给药后的小肠平滑肌收缩力明显高于给药前、正常对照组、核桃叶低浓度组、核桃叶中浓度组（P ＜0.001）。各组给药前和给药后的小肠平滑肌收缩频率两两比较差异均无统计学意义（P ＞0.05）。见表1。

表1 不同剂量的核桃叶提取液对兔离体小肠平滑肌收缩活动影响的比较 （±s，n ＝10）

表1 不同剂量的核桃叶提取液对兔离体小肠平滑肌收缩活动影响的比较 （±s，n ＝10）

注：与给药前比较，a：P ＜0.01；与正常对照组比较，b：P ＜0.01；与核桃叶低浓度组比较，c：P ＜0.01；与核桃叶中浓度组比较，d：P ＜0.01

组别 剂量（ml）收缩力（g）收缩频率（次／分）t P t P给药前 给药后给药前 给药后正常对照组 0.1 1.80±0.22 1.75±0.22 0.508 0.618 13.90±0.81 14.10±0.62 0.620 0.543核桃叶低浓度组 0.1 1.78±0.21 1.78±0.22 0.000 1.000 13.90±0.57 14.30±0.56 1.583 0.131核桃叶中浓度组 0.2 1.82±0.22 1.89±0.21 0.728 0.476 14.00±0.52 14.00±0.49 0.000 1.000核桃叶高浓度组 0.4 1.78±0.22 2.42±0.23abcd 6.359 ＜0.001 14.20±0.53 14.30±0.73 0.351 0.730

3 讨论

核桃树在世界各地均有分布，其果实为核桃有许多养身保健之功用，但其叶子却作为农作废弃物被抛弃，我国是核桃树种植面积和核桃产量均居于世界第一的国家，本课题组利用核桃叶提取液对离体小肠作用的实验研究，为能充分利用农作废弃物价值提供参考资料。小肠的运动形式包括有紧张性收缩、蠕动、分节运动等，这些运动的发生都是小肠平滑肌收缩的具体外部表现；可以通过观察小肠平滑肌收缩张力高低和收缩频率快慢来判断小肠兴奋性高低［7］。本实验结果显示：核桃叶低浓度和中浓度组对家兔离体小肠平滑肌收缩力和收缩频率与正常对照组差异无统计学意义，但核桃叶高浓度组离体小肠平滑肌收缩力明显高于给药前、正常对照组、核桃叶低浓度组、核桃叶中浓度组，其对离体小肠平滑肌收缩频率与其余组差异无统计学意义；提示高浓度的核桃叶提取液能增强家兔离体小肠平滑肌收缩力，而对收缩频率不影响。消化道对营养物质的消化和吸收的主要部位是小肠，小肠平滑肌收缩活动有利于营养物质在小肠内的消化和吸收。核桃叶主要含有没食子酸、反油酸、核桃叶醌、氢化核桃醌、葡萄糖苷和具有高抗炎作用的多酚复合物等成分［8］。核桃叶提取液增强小肠平滑肌收缩力作用是否与反油酸相关，其能否促进小肠对营养物质的消化和吸收还有待于进一步研究。

［1］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典［M］.北京：中国医药科技出版社，2010：262.

［2］ 翟梅枝，杨秀萍，刘路.核桃叶提取物对蚜虫的触杀作用［J］.西北林学院学报，2001，16（4）：55－56.

［3］ 许青松，陈新用，宋卫锋，等.核桃叶水提取物对小鼠炎症及免疫功能的影响［J］.延边大学医学学报，2008，31（2）：93－95.

［4］ 黄万元，陈洪玉，李文静，等.核桃、黑芝麻对D－半乳糖衰老模型小鼠的抗衰老作用研究［J］.右江民族医学院学报，2009，31（5）：778－779.

［5］ 李香兰，兰艳，许青松.核桃叶水提取液对小鼠空间学习记忆能力的影响［J］.山东医药，2008，48（29）：38－39.

［6］ 陈世民，莫燕娜，赵善民，等.实验生理科学［M］.2版.上海：上海科学技术出版社，2011：60.

［7］ 朱大年，王庭槐.生理学［M］.8 版.北京：人民卫生出版社，2013：187－209.

［8］ 高海生，朱凤妹，李润丰.我国核桃加工产业的生产现状与发展趋势［J］.经济林研究，2008，26（3）：119－126.