芪菊袋泡茶治疗鼻咽炎的药效学研究*

蔡文伟付静邱宝珊

芪菊袋泡茶治疗鼻咽炎的药效学研究*

蔡文伟1付静2邱宝珊1

目的通过药效学实验对芪菊袋泡茶的抗过敏、祛痰及对免疫功能的作用进行研究。探讨芪菊袋泡茶治疗鼻咽炎的可能机理。方法通过观察芪菊袋泡茶对小鼠呼吸道酚红排泌、迟发型变态反应、被动皮肤过敏实验的影响，观察其祛痰、抗过敏作用及对免疫系统的影响。结果芪菊袋泡茶增加小鼠呼吸道酚红排泌量，提高环磷酰胺造成的免疫力低下小鼠的特异性免疫力，抑制小鼠被动皮肤过敏。结论芪菊袋泡茶具有祛痰、增强特异性免疫功能、抗过敏的作用。实验结果为芪菊袋泡茶主治气虚热毒蕴结型鼻咽炎提供了药理学依据。

袋泡茶；鼻咽炎；抗过敏；药效学

鼻咽炎为鼻咽部的非特异性炎症，是耳鼻咽喉科常见病，岭南温热气候，鼻咽炎发病率高，患者多属气虚热毒蕴结。目前多数学者认为,其病因与细菌、病毒感染及鼻咽局部免疫力下降有关。目前治疗鼻咽炎方法及剂型不多，且疗效不太理想，症状迁延反复。邱宝珊教授临床上运用黄芪、野菊花、马勃、薄荷、千层纸、甘草六味中药组成的方剂嘱患者泡水代茶饮以治疗慢性鼻咽炎，取得良好疗效[1]，拟制成袋泡茶剂，方便患者使用。本文通过进一步药效学实验对芪菊袋泡茶在祛痰、调节免疫功能及抗过敏方面的作用进行研究，为其治疗慢性鼻咽炎提供药理学依据，报道如下。

资料与方法

1 实验材料

1.1 实验动物

SPF级昆明种小鼠（合格证号：0110351）购自广州中医药大学实验动物中心，合格证号：0110351。

1.2 药物及试剂

芪菊袋泡茶粗粉，按黄芪∶野菊花∶薄荷∶千层纸∶马勃∶甘草为10∶10∶3∶5∶5∶6的比例打成粗粉，以沸水浸泡10分钟，合并挤压，反复2次，合并药液后再加热挤压，保证充分浸出（广州中医药大学第一附属医院）。鼻咽清毒颗粒（广州奇星药业有限公司，批号：12019）。绞股蓝总甙片（广州白云山和记黄埔中药有限公司，批号：KOD001）。盐酸氨溴索片[山德士（中国）制药有限公司，批号：FU002]。扑尔敏片（广州康和药业有限公司，批号：11201）。伊文思蓝（国药集团化学试剂有限公司，批号：WC20080125）。酚红（广州瑞舒生物科技有限公司，批号：20120721）。注射用环磷酰胺(江苏恒瑞医药股份有限公司，批号：11101821)。二硝基氯苯（广州齐云生物科技有限公司，批号：0168B383）。弗氏完全佐剂（北京鼎国生物技术有限责任公司，批号：742001200）。硫化钠（Aladdin Chemistry，批号：416911)。

1.3 实验仪器

JA1203N型分析天平：上海精密仪器有限公司产品；722可见分光光度计：上海菁华科技仪器有限公司；电子天平：常熟市双杰测试仪器厂，T1000；Thermo全波长酶标仪：赛默飞世尔科技中国，1510.。

2 方法[2]

2.1 芪菊袋泡茶对小鼠呼吸道酚红排泌量的影响

取SPF级昆明种小鼠72只，雌雄各半，随机分成空白对照组（给予等体积蒸馏水），氨溴索组（300mg·kg-1），鼻咽清毒颗粒组（575mg·kg-1，采用临床用量的10倍），芪菊袋泡茶低、中、高剂量组（0.5、1.0、2.0g·kg-1，分别为临床推荐剂量的5倍、10倍、20倍）。每日灌胃给药1次，0.2ml/kg，连续给药5天。末次给药30min后每只小鼠腹腔注射5%酚红生理盐水0.1ml/10g体重，30min后脱颈处死，剖开胸腔，分离气管，剪下自甲状软骨至下端分叉处的一段气管，放入盛有4ml生理盐水的试管中，充分震荡后离心，取上清液3.5ml加1mol/L NaOH溶液0.1ml，显色后于波长546nm处测OD值，并统计组间差异。

2.2 芪菊袋泡茶对免疫功能作用的影响（小鼠迟发型变态反应DTH）

取SPF级昆明种小鼠60只，雌雄各半，随机分成空白对照组（给予等体积蒸馏水），环磷酰胺模型组（给予等体积蒸馏水），绞股蓝组（200mg·kg-1），芪菊袋泡茶粗粉浸出液低、中、高剂量组（0.5、1.0、2.0 g·kg-1，分别为临床推荐剂量的5倍、10倍、20倍）。每日灌胃给药一次，0.2ml/kg,连续给药5天。给药前2d每只小鼠腹部去毛，范围约3cm×3cm，并将含1%二硝基氯苯（DNCB）的丙酮麻油溶液（V∶V=1∶1，即配即用）50L均匀涂抹致敏，次日强化1次；除空白组对照组外小鼠致敏后立即皮下注射环磷酰胺125mg/kg诱导小鼠降低DTH模型。致敏5d后，用1%DNCB丙酮麻油溶液10ml均匀涂抹于各组小鼠右耳两面，左耳涂抹等量丙酮麻油溶液。共计24h，颈椎脱臼处死小鼠，剪下左右耳壳，用打孔器取下直径8mm的耳片，置电子天平称重，以左右耳片重量之差作为小鼠迟发型变态反应的强度。

2.3 芪菊袋泡茶的抗过敏作用（小鼠被动皮肤过敏，PCA）

取SPF级昆明种小鼠20只，雌雄各半，体重18～20g，将2%抗原卵清蛋白与弗氏佐剂等比乳化，每只小鼠两后脚掌各注射上述混悬液0.05ml。12天后，动物眼眶采血，分离血清，-20℃冰箱保存备用。另取SPF级昆明种小鼠72只，雌雄各半，随机分成模型组，扑尔敏组 (4mg·kg-1),鼻咽清毒颗粒组（575mg·kg-1，采用临床用量的10倍），芪菊袋泡茶低、中、高剂量组（0.5、1.0、2.0g·kg-1，分别为临床推荐剂量的5倍、10倍、20倍）。每日灌胃给药一次，0.2ml/kg,连续给药5天。末次给药1d后用上述致敏小鼠的混合血清加生理盐水1∶10稀释，每只动物腹壁皮内注射两个点，每点0.05ml，继续给药48h后进行抗原攻击，从动物尾静脉注射1%抗原卵清蛋白0.1ml(用1%伊文思蓝-生理盐水0.2mL配制)。20min后断头处死动物，翻转腹部皮肤，将蓝色斑皮取下，剪碎，加入丙酮-生理盐水(7∶3)混合浴液5 ml，浸泡，次日离心3000rpm10min，于波长610nm处测OD值，计算出抑制百分率。

抑制百分率(%)=100-（用药组平均OD值/对照组平均OD值）×100%

结果

1 芪菊袋泡茶对小鼠呼吸道酚红排泌量的影响

该实验数据表明芪菊袋泡茶中剂量组、氨溴索组与对照组相比，差异有统计学意义（P＜0.05）；鼻咽清毒颗粒组与对照组相比，差异有统计学意义（P＜0.01），小鼠呼吸道酚红排泌量均增加，见表1。

表1 各组小鼠呼吸道酚红排泌情况（）

表1 各组小鼠呼吸道酚红排泌情况（）

注：**表示给药组与空白对照组比较P＜0.01，*表示给药组与空白对照组比较P＜0.05。

组别 n OD对照组氨溴索片组鼻咽清毒颗粒组低剂量组中剂量组高剂量组12 12 12 12 12 12 0.118±0.030 0.143±0.027*0.169±0.043**0.140±0.029 0.144±0.029*0.126±0.026

2芪菊袋泡茶对免疫功能作用的影响（小鼠迟发型变态反应DTH）实验

实验数据表明，与对照组相比，环磷酰胺模型组小鼠DTH耳肿胀度显著降低（P＜0.05），提示免疫功能低下模型建立成功；与环磷酰胺模型组相比，芪菊袋泡茶中、高剂量组小鼠DTH耳肿胀度显著增加（P＜0.05），见表2。

表2 各组小鼠DTH耳肿胀度情况

3 芪菊袋泡茶的抗过敏作用（小鼠被动皮肤过敏，PCA）

实验数据显示与模型组相比，芪菊袋泡茶低、中剂量组小鼠伊文思蓝渗出量均显著降低（P＜0.01），见表3

表3 各组对小鼠被动皮肤过敏（PCA）情况

讨论

鼻咽部属上呼吸道，免疫力下降情况下，正常菌群失调，鼻咽部的正常生理环境遭到破坏，鼻咽部遭到致病菌、病毒感染，黏膜对损伤因子的防御反应则表现为鼻咽炎，反复发作或迁延日久而发展为慢性鼻咽炎。中医则认为慢性鼻咽炎多由粉尘、浊气的刺激，或烟酒过度，偏嗜辛辣以致脏腑功能失调，肺胃痰热内蕴，复感外邪；或外感后余热未清，伤及阴液，病久，肺肾阴虚，痰淤阻滞；脾胃虚弱，脾胃失运，水谷不化精气，不得上输于肺，而下流成为湿浊，湿浊阻滞，脾胃不能运化水谷精微，濡养清窍；肝郁气滞，痰瘀阻络[3]。既往鼻咽炎的分型治疗多沿用慢性鼻炎、慢性咽炎而辨证加减治疗，李洵等[4]通过300例慢性鼻咽炎患者按照中医辨证标准进行证候分型，观察各型患者主要症状分布及局部黏膜表现，分为肝经郁热、肺胃蕴热、湿热蕴脾、肺肾阴虚、脾气虚弱、痰凝血瘀6个证型，其中以脾气虚弱最为多见。针对岭南温热气候，慢性鼻咽炎发病率高，大多数慢性鼻咽炎患者多属气虚，热毒蕴结鼻咽所致。

芪菊袋泡茶为邱宝珊教授等结合多年临床经验，针对岭南温热气候，鼻咽炎及鼻咽癌发病率高，患者多属气虚热毒蕴结所拟，由黄芪、野菊花、薄荷及甘草等六味药物组成，主要功效为益气清热，解毒利咽。其中黄芪对免疫系统包括非特异性免疫功能、体液免疫、细胞免疫、对自然杀伤(NK)细胞及诱生干扰素都有重要的影响[5]。野菊花提取物具有显著的抗炎、免疫抑制作用[6]。薄荷成份中的薄荷醇能促进分泌，使黏液稀释而表现祛痰作用[7]。甘草具有抗炎及免疫抑制作用[8]。陈少敏等[9]通过芪菊袋泡茶对小鼠及鸡胚的体内外实验，已证明芪菊袋泡茶组方具有抗菌、抗病毒作用。

祛痰实验利用酚红能部分从气管排泌的特点，在祛痰药物的影响下，随着气管分泌量的增加，由呼吸道黏膜排出的酚红也增多，用分光光度计测出酚红的排泌量，从而得知药物祛痰作用的强弱。由实验结果可知，芪菊袋泡茶能显著增加小鼠气管酚红排泌量，有祛痰作用。本研究用免疫抑制剂环磷酰胺诱导DTH降低小鼠模型来研究芪菊袋泡茶对小鼠特异性免疫功能的影响，实验结果证实，芪菊袋泡茶可显著增加模型小鼠耳肿胀度，能显著提高环磷酰胺造成的免疫力低下小鼠的特异性免疫力。被动皮肤过敏实验（PCA）结果提示芪菊袋泡茶可显著抑制小鼠被动皮肤过敏，能抑制由IgE介导的过敏反应。

综上所述，芪菊袋泡茶在药效学实验中具有抗菌抗病毒、祛痰、增强特异性免疫功能、抗过敏的作用，为芪菊袋泡茶益气清热、解毒利咽，主治气虚热毒蕴结型鼻咽炎提供了药效学依据，同时为芪菊袋泡茶应用于鼻咽炎预防提供药效学依据。

1 邱宝珊，陈少敏，李洁璇，等.芪菊泡茶治疗气虚热毒蕴结型鼻咽炎的临床研究[J].新中医,2014,46(1):109-111.

2 徐叔云,卞如濂.药理实验方法学[M].第2版.北京:人民卫生出版社,2002:1001-1059.

3 王世贞.中医耳鼻咽喉科学[M].第2版.北京：中国中医药出版社,2007:151-156.

4 李洵,张亚力,刘建华,等.慢性鼻咽炎中医证候分型的临床研究[J].北京中医药大学学报（中医临床版）2011，18（3）:8-9.

5 陈国辉,黄文凤.黄芪的化学成分及药理作用研究进[J].中国新药杂志,2008,17（17）：1482-1485

6 陈传千,沈艳平,屈跃丹,等.野菊花提取物药理作用的研究进展[J].吉林医药学院学报,2010,6(31):175-178.

7 房海灵,李维林,任冰如,等.薄荷属植物的化学成分及药理学研究进展[J].中国药业,2010,19(10):13-17.

8 于辉,李春香,宫凌涛,等.甘草的药理作用概述.现代生物医学进展[J],2006,6(4):77-79.

9 陈少敏,黄可儿，刘春松，等.芪菊袋泡茶抗菌及抗病毒的药效学研究[J].中药新药与临床药理,2013,24(6): 573-577.

（收稿:2014-09-10 修回：2014-10-17）

Pharmacological Study on the Effect of the Stilbene Chrysanthemum Tea Bag in Treating nasopharyngitis

CAI Wenwei,FU Jing,QIU Baoshan
The First Affiliated Hospital of Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou,510405,Guangdong,China

ObjectiveResearch the anti allergic,anti-asthmatic effects and immunologic function of the Qiju teabag by pharmacodynamic experiment and explore the mechanism for the treatment of nasopharyngitis.MethodObserving the influence of Qiju teabag on phenolsulfonphthalein excretion of respiratory tract,the delayed hypersensitivity and the passive cutaneous anaphylaxis of mice,and to explore the influence on the anti-asthmatic,antiallergic effect and the immunologic function.ResultsThe Qiju teabag can increase the phenolsulfonphthalein excretion of respiratory tract,improve the specificity immunity of the mice with suppressed immunity caused by cyclophosphamide and inhibit the passive cutaneous anaphylaxis of the mice.ConclusionQiju teabag performs well in anti allergic,anti-asthmatic effects and immunologic function.The experimental results show that the Qiju teabag refreshes the breath,clears the heats,detoxify and is good for the pharynx.The experiment provides the pharmacodynamic evidence for nasopharyngitis caused by the knotting of toxic heat in the body.

teabag；nasopharyngitis；anti allergic；pharmacodynamics

10.16542/j.cnki.issn.1007-4856.2015.04.002

广东省科技厅科研项目（2008B080703044）

1 广州中医药大学第一附属医院耳鼻咽喉科（510406）

2 南方医科大学附属珠江医院体检保健科

邱宝珊，教授，主任医师.Email：baoshanqiu@126.com.