变应性鼻炎患者血清IL-12及IL-31水平测定及其临床意义

柴若楠史亮谢华马德宾张俊丽

·实验研究·

变应性鼻炎患者血清IL-12及IL-31水平测定及其临床意义

柴若楠1史亮1谢华1马德宾1张俊丽1

目的探讨变应性鼻炎患者血清IL-12及IL-31水平及其临床意义。方法 变应性鼻炎患者按照体外检测血清中抗体常规加入吸入性过敏原特异性抗体IgE（sIgE）抗体检测结果分为阳性组和阴性组，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测164例变应性鼻炎患者和82例健康对照组血清中IL-12及IL-31水平。特异性IgE测定采用德国欧盟优敏系列（EUROALLER）检测系统。结果变应性鼻炎特异性IgE阳性组、阴性组的血清IL-12及IL-31检测结果分别为：23.8±9.1、19.1±7.9和27.9±9.4；22.8±6.7；对照组的血清IL-12及IL-31检测结果分别为：11.3±4.8、14.9±7.5；与对照组相比IL-12、IL-31均有统计学意义（P＜0.05）。变应性鼻炎特异性IgE阳性组亚组中，螨虫过敏组的血清Il-12水平最高，其次为蟑螂过敏组等；与对照组相比，螨虫过敏组与蟑螂过敏组均有显著性差异（P＜0.05）；变应性鼻炎特异性IgE阳性组的血清IL-31水平与对照组相比均有显著性差异（P＜0.05）。结论免疫因子IL-12及IL-31可能参与变应性鼻炎的发病过程，环境中的螨虫与蟑螂是变应性鼻炎的主要诱因。

变应性鼻炎；IL-12；IL-31；过敏原

变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)是变态反应科与耳鼻咽喉科的常见病之一，目前国内发病率约为20%～30%之间，其发病机制尚未完全阐明，目前多认为该病为IgE介导的Ⅰ型变态反应，多种免疫细胞如T、B淋巴细胞、肥大细胞等及多种细胞因子参与发病机制[1]。临床上患者连续阵发性喷嚏、大量水样鼻涕、鼻痒及鼻塞为主要症状，部分患者伴有嗅觉减退，严重影响患者的学习、工作和生活。近年来，新的细胞因子不断被发现，其中许多新的白介素与变应性鼻炎关系密切，多项研究发现变应性鼻炎患者血清中IL-4、IL-12、sIL-2R、TNF-α、IL-10、白三烯水平或相应的mRNA含量升高[2-5]。

最新研究表明，IL-12具有多功能的免疫调节作用，与AR发生发展密切相关，能抑制特异性IgE的产生，在各个环节对AR发病都可能起到一定的调节作用[6]，IL-12在Th细胞亚群的分化中起着关键作用[7]，可有效抑制或逆转Th细胞向Th2细胞亚群的分化，是抗呼吸道变态反应性疾病的重要因素[8]。研究同时也发现AR患者体内IL-31 mRNAi水平约是健康人群中的10倍[9]。与Th2型细胞因子的表达正相关[10]。

本文通过ELISA法检测变应性鼻炎患者和正常人对照血清中IL-12及IL-31的表达水平，分析这些细胞因子在变应性鼻炎的发病中所起的作用，并通过测定特异性IgE的过敏原检测方法找到变应性鼻炎患者主要的环境影响因素。

资料与方法

1 临床资料

所有研究患者均来自2014年5月～2014年10月于我变态反应科门诊就治的164例变应性鼻炎患者，全部符合变应性鼻炎诊断标准[11]。

sIgE检测，sIgE的测定采用德国欧盟优敏系列（EUROALLER）检测系统）（其中sIgE阳性组82例，男40例，女42例，年龄13～54岁，平均(32.1±13.7)岁，病程3个月～3年，平均(12.2±3.6)个月。其中单一过敏40例（蟑螂15例、螨虫17例、艾蒿2例、树木2例、螃蟹2例、淡水鱼1例、大豆1例）；剩余42例均为多种过敏患者，其中含有食物过敏的为28例，其次是蟑螂和螨虫过敏，分别有36和38例。

sIgE阴性组82例（喷嚏、流涕、眼痒、鼻黏膜充血＞1月），男41例，女41例，年龄13～66岁，平均(36.2±15.4)岁，病程3个月～3年，平均(13.5±6.2)个月。就诊前3天均未服用抗组胺类药物、1个月内未使用过糖皮质激素类药物。对照组选自来我院康体保健中心体检的健康人82名，其性别、年龄组成与病例组具有可比性，且均无全身性疾病，无内分泌系统及心肺肝肾等慢性病，近期无局部及全身感染性疾病，也无特应性皮炎及其他过敏性疾病。

2 方法

2.1 标本采集

在签订知情同意书后，抽取对照组人员与所有变应性鼻炎患者清晨静息状态下空腹静脉5ml，离心10min（2000r/min）后，吸取上层血清，密封后，-20℃保存待检。

2.2 检测方法

采用人IL-12、IL-31检测试剂盒，用ELISA法测定血清样本中各细胞因子浓度；操作方法均严格按照说明书进行。

3 统计学分析

结果

1 血清测定结果分析

血清样本测定结果显示，变应性鼻炎sIgE阳性组、阴性组的血清IL-12、IL-31检测结果分别为：23.8±9.1、19.1±7.9和27.9±9.4；22.8±6.7；对照组的血清IL-12、IL-31检测结果分别为：11.3±4.8、14.9± 7.5；与对照组相比差异均有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 变应性鼻炎sIgE阳性组、变应性鼻炎sIgE阴性组和对照组血清IL-12、IL-31水平检测(pg/mL)

2 变应性鼻炎sIgE阳性组亚组分析

变应性鼻炎sIgE阳性组亚组中，血清检测IL-12、IL-31水平含量螨虫过敏组最高（21.4±6.3、 24.5±7.3），其次为蟑螂（19.9±9.5、22.2±9.7）过敏组，与对照组相比，螨虫过敏组与蟑螂过敏组均有显著性差异（P＜0.05），见表2。

表2 变应性鼻炎sIgE（+）亚组和对照组血清IL-12、IL-31水平检测(pg/mL，±s)

表2 变应性鼻炎sIgE（+）亚组和对照组血清IL-12、IL-31水平检测(pg/mL，±s)

注：*P＜0.05，**P＜0.01

组别 例数 IL-12单一过敏组食物过敏组蟑螂过敏组螨虫过敏组对照组40 28 36 38 64 17.5±9.2 15.7±6.6 19.9±9.5 21.4±6.3 12.9±5.8 t值2.87*2.21*4.31**6.73**IL-31 t值20.7±9.1 18.8±7.8 22.2±9.7 24.5±7.3 17.9±7.5 1.61 0.58 2.40*4.28**

讨论

AR是常见的呼吸道变应性疾病。其机制涉及一系列炎症细胞（嗜酸性粒细胞、肥大细胞、嗜碱性粒细胞等）和众多的细胞因子此外还存在神经调解、遗传学因素等作用，尚未完全明确[12]。本研究采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测164例变应性鼻炎患者健康对照组血清中IL-12及IL-31水平。对照组的血清IL-12及IL-31检测结果与对照组相比差异均有统计学意义（P＜0.05）。变应性鼻炎sIgE阳性组亚组中，血清检测IL-12水平含量螨虫过敏组高，其次为蟑螂过敏组等；与对照组相比，螨虫过敏组与蟑螂组均有显著性差异（P＜0.05）；变应性鼻炎sIgE阳性组的血清IL-31水平与对照组相比均有显著性差异（P＜0.05）。这表明IL-12及IL-31可能参与变应性鼻炎的发病过程。

白细胞介素31（IL-31）是一种新发现的细胞因子，主要由活化的Th2细胞产生。IL-31其功能受体是由IL-31R和抑瘤素M受体（OSMR，oncostatin M receptor）两个亚基组成的异源二聚体复合物。有研究显示，来自气道过敏症的动物模型病变组织中的IL-31受体表达增加[13]。IL-31成为连接变性鼻炎中T细胞和皮肤瘙痒的细胞因子[14]。很多研究集中在变应性鼻炎和特应性皮肤炎中，发现变应性鼻炎和特应性皮炎患儿的疾病活动度和Th2细胞因子水平显着相关性[15]，IL-31在变应性鼻炎和慢性特应性皮炎的皮肤T细胞表达增加[16]。

白细胞介素12是近几年发现的细胞因子，它主要是由单核细胞和巨噬细胞分泌，它的产生能够诱导CD4＋Th细胞向Th1型细胞分化，进而能够平衡Th2型细胞的功能性亢进，抑制Th2型细胞产生和特异性IgE合成，从而进一步抑制EOS的聚集和浸润以及诱导细胞凋亡[17-19]。并可直接抑制多种Th2型细胞因子如IL-4、IL-5、IL-10等生成，促进Th1型细胞因子IFN-γ及IL-2产生，增强Th1细胞的免疫应答，被认为是促使T辅助细胞向Th1分化的始动因素[20]。本研究发现血清样本测定结果显示，变应性鼻炎sIgE阳性组、阴性组的血清IL-12、IL-31检测结果分别为：23.8±9.1、19.1±7.9、27.9±9.4；22.8±6.7；对照组的血清IL-12、IL-31检测结果分别为：11.3±4.8、14.9±7.5；与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05），变应性鼻炎sIgE阳性组亚组中，血清检测IL-12水平含量螨虫过敏组最高，其次为蟑螂过敏组、单一过敏组及食物过敏组；与对照组相比，螨虫过敏组与蟑螂过敏组均有显著性差异（P＜0.05）。

本研究检测变应性鼻炎患者白细胞介素12、31的水平和表达，发现其在AR患者中的水平均高于健康对照人群，提示IL-12及IL-31可能参与变应性鼻炎的发病过程，并通过测定sIgE的过敏原检测方法找到变应性鼻炎患者主要的环境影响因素，环境中的螨虫与蟑螂是变应性鼻炎的主要诱因。

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（收稿:2015-02-15 修回：2015-03-23）

Levels of serum IL-12 and IL-31 in patients with allergy rihitis and its clinical significance

CHAI Ruonan,SHI Ling,XIE Hua,MA Debin ZHANG Junli
General Hospital of Shenyang Military Area Command,The PLA center of Respiratory and allergic disease diagnosing management,Shenyang,110016,China

ObjectiveTo investigate levels of serum IL-12and IL-31 in patients with Allergy rititis and its clinical significance.MethodsSerum levels of IL-12and IL-31 were detected by enzyme-linked immunoadsorbent assay（ELISA）in 164 Allergy rititis patients(sIgE(+)82 cases、sIgE(-)82 cases)and 82 healthy controls.sIgE was measured by EUROALLER system.ResultssIgE positive groups,negative groups serum IL-12and IL-31respectively are 23.8±9.1、19.1±7.9、27.9±9.4；22.8±6.7,Control group serum IL-12 and IL-31respectively are 11.3±4.8,14.9±7.5,The differences were statistically significant compared with control group(P＜0.05).The subgroup of sIgE positive groups,mite group have high level of IL-12 in serum，followed by the cockroach allergy groups, Compared with control group,Mite allergy and cockroach allergy groups have significant difference(P＜0.05).ConclusionIL-12 and IL-31 may be involved in the pathogenesis of Allergy rititis mite and cockroach allergy may be the main induced factors of allergy rihitis.

Allergic Rhinitis;IL-12;IL-31;Allergens

10.16542/j.cnki.issn.1007-4856.2015.04.001

1 沈阳军区总医院全军呼吸内科及变态反应疾病诊治中心(沈阳，110016）

张俊丽，副主任医师.Email:Lilypad_ff@126.com