张繁荣,胡志辉,周世力,孙齐英,许国权,李鹏
(江汉大学生命科学学院,武汉,430056)
食用菌营养丰富,具有非常高的营养价值。相关测定结果表明[1],鲜蘑菇的蛋白质含量为8.5%,而且含有人体所需的8种氨基酸,其中赖氨酸和亮氨酸的含量尤为丰富。食用菌中的蛋白质含量略低于肉类和蛋类,明显高于蔬菜及瓜果,且属于优质蛋白质,含有18种氨基酸,而且其生理活性极高,吸收率可高达80%以上。食用菌中脂肪的含量较低,而且以不饱和脂肪酸为主[2,3],如香菇、黑木耳、银耳中的不饱和脂肪酸分别占75%、73.1%、69.2%,另外,食用菌中不但不含胆固醇,而且含丰富的类甾醇[4]。
CTP-5消毒剂是深圳某公司新开发的一种绿色环保的新型氧化性消毒剂,它的终产物为CO2、O2、H2O,对环境没有为害。因此,本试验用CTP-5(深圳)对食用菌基质进行灭菌,并对其灭菌效果进行了检测了,以期寻找出更为理想的消毒剂以及较为合理的消毒剂浓度,以减少消毒剂对环境的影响,增强资源的合理利用,积极响应建设两型社会的号召。
食用菌培养料的杂菌污染主要由霉菌造成,本试验选用马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)真菌培养基。灭菌对象是食用菌培养料之一的棉籽壳。将消毒剂配成不同浓度梯度,对棉籽壳进行灭菌消毒,观察新型环保消毒剂CTP-5对棉籽壳的灭菌效果。
马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)配制:去皮马铃薯 200 g,葡萄糖 20 g,琼脂 20 g,蒸馏水1 000 mL。
先将马铃薯洗净去皮并切片,用电子天平称取200.0 g,加入所需2/3的蒸馏水于烧杯内,煮沸30 min后过滤,再加葡萄糖20.0 g,慢慢加入琼脂12.0~15.0 g,搅拌,使琼脂完全溶解,调pH值至7.0,最后将过滤液补足到1 000 mL,高压蒸汽灭菌后备用。
表1 不同浓度的CTP-5消毒效果比较
图1 高压灭菌对照与蒸馏水空白对照
CTP-5消毒剂的配制:配制浓度分别为1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 mg/L 的 CTP-51和 CTP-52消毒剂,消毒剂现配现用。
①棉籽壳的消毒 每组选取6颗棉籽壳,将其分别放入装有浓度为 1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 mg/L 的 CTP-51和 CTP-52消毒液的培养皿中,盖好,常温下消毒30 min。并将用蒸馏水浸泡过的棉籽壳和用高压蒸汽灭菌的棉籽壳作为对照。
②培养基的接种 用无菌操作方法取出经不同浓度的CTP-5处理的棉籽壳,用镊子以两行平行的方式放置于灭菌的马铃薯葡萄糖琼脂培养基平板上,使棉籽壳在培养基上尽量摆放均匀。20℃恒温下培养48 h,检查各平板中微生物的生长情况,并记录结果。同时设置蒸馏水和高压灭菌的对照组,每处理重复3次。
图2 不同CTP-51浓度对食用菌基质的灭菌效果
由图2和图3表明,随着CTP-5消毒剂浓度的增加,培养基上的菌落数减少,消毒效果增加。CTP-51的消毒浓度为0~8.0 mg/L时,培养物周围有大量的真菌和细菌菌落,消毒浓度为16.0 mg/L时,培养物周围仍有菌落存在,但数量仅为0~2个,消毒不彻底(图1)。CTP-52消毒效果整体优于 CTP-51,其浓度为1.0 mg/L时,培养物周围有较多的真菌和细菌菌落,但较相同浓度的 CTP-51处理少,CTP-52消毒浓度为2.0~8.0 mg/L时,大多数培养物周围无菌落生长,仅有少数培养物周围有1~2个菌落存在,浓度达到16.0 mg/L时,培养物周围完全没有菌落生长,与高压灭菌的对照组效果一样,达到彻底的消毒效果(图1)。
图2 不同CTP-52浓度对食用菌基质的灭菌效果
在生产上常用的食用菌培养料的灭菌方法是在常压下将培养料置于灭菌灶内加温至100℃,保持8~10 h,或用高压蒸汽灭菌,一般在0.138 MPa、126℃条件下灭菌1~2 h。该方法所需灭菌时间长、耗能高、用工多,且对有些杂菌的生长只能起到抑制作用,因此,在接种食用菌菌种后易诱使杂菌再度生长。本试验采用的CTP-5消毒剂是深圳某公司新开发的一种绿色环保的新型氧化性消毒剂,它的终产物为 CO2、O2、H2O,无残留,无污染,无公害,符合绿色农业发展的需要,而且高效,节约成本。
CTP-5消毒剂对棉籽壳良好的消毒灭菌效果在本试验得到了体现,但本试验仅仅是对培养料之一的棉籽壳进行消毒灭菌,至于对其他的培养料如木屑、玉米芯、秸秆、甘蔗渣、稻草等是否有效或有效的消毒灭菌浓度还有待进一步试验。另外,CTP-5消毒剂对食用菌菌丝的生长萌发、出菇产量等的影响也还有待进一步试验。
[1]王贺祥.食用菌栽培学[M].北京:中国农业出版社,2008:22-25.
[2]赵经周,辛春德,聂艳秋.食用菌的药用价值[J].中国林副特产,1996(2):13-20.
[3]王志敏.消毒与灭菌方法的选择[J].医药工程设计,2003,24(3):39-46.
[4]赵顺起,孟繁珍,高燕华,等.我国食用菌的药用研究[J].生物技术,1993,3(3):9-11.