离体子宫平滑肌测定方法的改进

崇立明，王忠辉，杨阳，王蓉，周莉，孙祖越

上海市计划生育科学研究所 药理毒理学研究室，中国生育调节药物毒理学检测中心，上海 200032

离体子宫平滑肌是生物活性组织，通过人工模拟的生理环境测定药物对子宫平滑肌舒张和收缩变化的影响，同时采用计算机生物信号采集处理系统，使子宫平滑肌收缩的复杂信号量化，绘制出给药前后子宫平滑肌收缩的图形并测得数据，可为实验提供更加客观和准确定量的分析方法。离体器官实验需要给离体器官一个适宜的环境，包括温度（35℃）、营养液（De-Jalon's 液）及混合氧（95% O2和5%CO2）[1]。正常实验中，在供氧时直接用钢瓶给营养液中通入混合氧[2-9]。考虑到用钢瓶通气的危险性，而且通混合氧费时、费事，耗费较多，我们以新西兰兔离体子宫平滑肌为材料，在营养液中分别通入混合氧、增氧泵通气及不通气，观察了离体子宫平滑肌的收缩反应，寻求一种简便、易行、经济的替代方法。

1 材料与方法

1.1 材料

健康雌性新西兰兔（普通级，体重2.5～3.5 kg）购自上海松江区松联实验动物场［生产许可证SCXK（沪）2012-0011，使用许可证SYXK（沪）2013-0027］，饲养于上海市计划生育科学研究所（中国生育调节药物毒理检测中心）普通级小动物房，室温18～26℃，相对湿度40%～70%，光照12～14 h，黑暗10～12 h。实验开始前于不锈钢笼内（单只/笼）适应性饲养7 d，自由进食、饮水。

De-Jalon's 液：NaCl 9 g，KCl 0.42 g，NaHCO30.5 g，CaCl20.06 g，葡萄糖0.5 g，蒸馏水1000 mL。

RM-6240BD 多道生理信号采集处理系统、JZJ01H 型肌肉张力换能器、离体肠管及热板恒温器（均购自成都仪器厂）；增氧泵。

1.2 实验方法

每只兔取3 mm×10 mm 大小子宫平滑肌3 段，随机分为混合氧组、增氧泵通气组和不通气组，每组8 段子宫，一端穿线固定于离体器官恒温水浴装置的浴槽底部，另一端穿线与记录装置相连，分别通入混合氧、增氧泵通气及不通任何气体；将已连接的子宫肌浸没于浴槽，浴槽中盛有6 mL 新鲜配置的De-Jalon's 液，给予子宫肌1 g 的负荷并保持，静置10 min，待波形稳定后，记录约5 min正常波形。

1.3 统计学处理

以RM-6240BD 生物机能实验系统描记子宫平滑肌的收缩活动。测定子宫平滑肌的收缩幅度、频率及活动力（幅度×频率），实验数据以x±s 表示，用SPSS11.5统计分析软件处理数据，单因素方差分析。

2 结果

不通气组子宫平滑肌的频率和活动力与混合氧组比较均有统计学差异，而混合氧组与增氧泵组比较无统计学差异。表明给新西兰兔离体子宫平滑肌的营养液内通入混合氧或使用增氧泵通气效果相同，不通气组的效果最差。见表1、图1。

表1 不同通气方式对新西兰兔子宫平滑肌收缩的影响（）

表1 不同通气方式对新西兰兔子宫平滑肌收缩的影响（）

与混合氧组相比，*P＜0.01，**P＜0.05

图1 不同通气方式对新西兰兔子宫平滑肌波形的影响

3 讨论

增氧泵是通过电动马达抽吸空气，通过管道通路吹到水中释放，增加了空气和水的接触面和水的循环流动，可以保证水中始终保持充足的溶氧量和溶氧的均一度。

本实验中，离体子宫维持生理功能的条件是营养液，营养液中的混合氧含量及营养液与子宫是否充分接触都是维持组织正常生理功能的重要条件。根据实验结果，增氧泵通气组与混合氧组对比无统计学差异，说明使用增氧泵通气可促进营养液流动，增加营养液与子宫充分接触的机会，在氧气供应方面也达到了与通入混合氧相同的效果。综上所述，使用增氧泵通气可以达到供氧及促进液体流动的双重目的，完全可替代传统的用钢瓶通入混合氧的方法，而且增氧泵体积较小，操作简单，方便经济，是离体子宫实验的理想选择。

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