5-FU与顺铂辅助放化疗预防食管鳞癌微转移的临床观察

郁大江

(江苏省中医院心胸外科南西六病区，江苏 南京 210029)

食管癌［1-2］为临床常见恶性肿瘤之一，据统计全球每年约有48 万新发病例，我国为食管癌的高发区，每年死于食管癌的病患约达15 万之多。手术治疗是治疗食管癌发病早期的首选方案，其5 年生存率可达90%，但临床大部分食管癌患者在发现时就已被诊断为中晚期，其手术治疗后5 年生存率仅为10%～20%，这是因为癌细胞发生了微转移等而导致术后复发，而血液与骨髓是转移复发的重要基础［3-4］。近年来，应用术前辅助放化疗治疗食管癌能提高患者术后生存率的报道较多，同时也存在着一定争议，临床对其尚未形成一致看法［5-6］。此次研究中，研究组患者在术前放化疗，并采用巢式RT-PCR (逆转录聚合酶链反应)法检查术后患者外周血中CK19 mRNA 的表达情况，旨在探讨该治疗方案在预防食管癌微转移的临床疗效。

1 资料与方法

1.1 一般资料

127 例研究病例均为我院2009 年12 月至2013年6 月收治并确诊的食管癌患者，在征求患者及其家属意见(知情同意并签订知情同意书)的基础上随机将其分为两组。病例选入标准:(1)初治并确诊为食管癌患者;(2)血常规检验正常者;(3)没有放化疗禁忌症者;(4)无心肝肾严重疾病者;(5)预计生存期≥3 个月患者;(6)可完成术后随访患者。其中对照组63 例中:男44 例，女19 例;年龄46～78 (中位年龄62)岁;原发肿瘤部位在胸上段13 例，胸中段41 例，胸下段9例;Ⅱ期38 例，Ⅲ期25 例。观察组64 例中:男46 例，女18 例;年龄45～77 (中位年龄61)岁;原发肿瘤部位在胸上段12 例，胸中段43 例，胸下段9 例;食管鳞癌64 例;Ⅱ期40 倒，Ⅲ期24 例。两组患者在性别、年龄、原发肿瘤部位、肿瘤分期和类型等方面比较，无统计学差异(P ＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法 对照组行单纯手术治疗，麻醉方式选择全麻，据原发肿瘤部位合理选择手术方式(胸上段癌变者在右胸、腹、右颈部行手术联合切口，胸中下段癌变者在左胸、左颈行手术切口);术中切除癌变病灶并清扫区域淋巴结;术后无可见病灶残留并病理检查结果显示切缘无肿瘤细胞残留视为根治性切除，有病灶或切缘有肿瘤细胞残留视为姑息性切除;选择胃食管颈部吻合术进行消化道重建。观察组在手术前辅助应用5-FU (生产厂家:北京紫竹药业有限公司，批准文号:国药准字H11020026)与顺铂(生产厂家:江苏豪森药业股份有限公司，批准文号:国药准字H20010743)化疗及食管区放射治疗，具体方案为:(1)辅助化疗方案:5-FU 剂量为500 mg/m2，静脉滴注，1次/天;顺铂剂量为75 mg/m2，静脉滴注，1 次/天，1 个周期为3 w，共化疗2 个周期;(2)辅助放疗方案:化疗2 个周期后，在食管区采用直线加速器行三野照射放射治疗，在18 d 内进行分割照射12 次，总剂量为36Gy;(3)放化疗结束后3 w再行手术治疗(同1.2.1)。

1.2.2 CK19 mRNA 检测方法［7-8］(1)收集病患术后1 w 的外周血10 mL;(2)以淋巴细胞分离液(购自上海索莱宝生物科技有限公司)分离得到单核细胞并用生理盐水洗涤，未及时测定的-80℃保存备用;(3)按照Trizol 一步法提取总RNA，并用UV 法定量;(4)取1～2 μg 总RNA，在70℃预变性5 min 后;(5)巢式RT-PCR 法依次cDNA 第一链合成与PCR 扩增，取第2 轮PCR 扩增所得产物6 μL 进行2%的琼脂糖凝胶电泳;(6)应用一次性凝胶摄像仪对结果摄片。

1.3 观察指标

1.3.1 考察两组患者术后外周血CK19 (细胞角蛋白19)mRNA 的阳性表达率，同时对比两组的根治切除率，随访3 年，观察患者术后1、2、3 年生存率。

1.3.2 结果判定［7］1112-1116在DNA Marker 指示下观察摄片结果，凝胶上若出现319 bp 的扩增条带即为CK19 mRNA 的表达，将其定义为CK19 mRNA 阳性表达。

1.4 统计学分析

采用SPSS 15.0 统计学软件包对本次研究数据进行统计分析，CK19 mRNA 的阳性表达率、根治切除率与术后生存率均采用χ2检验。

2 结 果

2.1 两组患者术后CK19 mRNA 阳性表达率比较

观察组和对照组的外周血中CK19 mRNA 阳性表达率分别为31.74%和23.08%，两组比较，差异具有统计学意义(P ＜0.05)，见表1。

2.2 两组患者根治切除率比较

观察组与对照组根治切除率分别为85.94%和65.08%，观察组显著高于对照组(P ＜0.05)，见表2。

2.3 两组患者术后生存率比较

所有研究对象均完成3 年术后随访，观察组术后1、2 和3 年生存率分别为85.94%、67.19%和43.74%;对照组术分别为80.95%、41.27% 和25.40%;两组比较，术后1 年生存率差异无统计学意义(P ＞0.05)，观察组术后2 年和3 年生存率显著高于对照组(P ＜0.05)，见表3。

表1 两组患者术后CK19 mRNA 阳性表达率比较

表2 两组患者的根治切除率比较

表3 两组患者术后1、2、3 年生存率比较

3 讨 论

食管癌为临床多发肿瘤之一，在导致癌症患者死亡病因中，全球排名第七，而在中国排名第四。临床对于食管癌的治疗方法需根据具体病情、癌变部位及转移情况决定，目前，手术切除仍然是早期食管癌患者的标准治疗方案，但多数患者在就医时已被诊断为中晚期癌变，相关报道均称其术后生存率仍较低，中位生存时间超过18 个月的非常少，治疗效果尚欠佳。可见，更为有效合理的综合治疗方案的研究应用极为迫切。近年来有关食管癌新辅助放化疗方案得到了临床越来越多的关注与研究，但相关报道结果不甚一致，存在着一定的争议。本次研究中，通过将食管癌患者分组研究，观察组在对照组单纯手术治疗基础上辅助应用5-FU 与顺铂化疗及食管区放疗，旨在评价其临床效果。

诸多报道［8-10］称，影响食管癌手术治疗中长期效果与不良预后的原因是术后癌细胞的转移而引起的复发，病灶手术切除后常规病理检查显示淋巴结阴性的患者在5 年内仍有30 %～50%出现癌细胞转移，这是因为食管相邻的纵膈重要组织与器官一定程度影响了术中肿瘤的完整切除，微转移病灶的存在为术后转移复发创造了条件。血液与骨髓是转移复发的重要基础，而常规病理检查法不能检测发现的微转移灶，因此，近年来许多学者采用了多种方法对肿瘤的微转移做了广泛研究。食管癌属于上皮细胞癌，CK19 (细胞角蛋白19)是一种细胞骨架蛋白，其能在上皮细胞或上皮起源肿瘤中特异表达而区别于正常细胞和间叶组织，因其高度组织及分化特异性被公认为检测癌细胞微转移的有效标志物之一。国内外相关报道表明，其在食管癌微转移或作为手术效果评价指标的相关研究中取得较满意的效果。本研究基于以上研究成果，并考虑到外周血取样的方便性，将外周血中CK19 mRNA 阳性表达率作为评价食管癌微转移临床指标。结果显示，观察组与对照组根治切除率分别为:31.74%和23.08%，观察组显著高于对照组(P ＜0.05)。提示食管癌患者手术前辅助应用5-FU 与顺铂化疗及食管区放疗，可良好预防微转移的发生。

在本次研究中，还对比了两组患者的根治切除率与术后3 年内生存率，结果显示，观察组根治切除率为85.94%，明显高于对照组的65.08% (P＜0.05);两组术后1 年生存率差异无统计学意义(P ＞0.05)，观察组术后2 年和3 年生存率显著高于对照组(P ＜0.05)，与相关报道一致。间接提示了术前辅助应用5-FU 与顺铂化疗及食管区放疗可提高食管癌根治性切除率，从而降低了区域淋巴结转移率及癌细胞微转移率，对局部复发产生了良好的预防控制作用，最终改善患者预后，提高了患者术后生存率。

综上所述，食管癌患者手术前辅助应用5-FU与顺铂化疗及食管区放疗，可良好预防微转移的发生。但更大样本、更深层次与更系统的研究有待进一步进行。

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