脂联素与慢性乙型肝炎病毒感染肝纤维化的相关性

丁岗强，康 谊，刘俊平，曾艳丽，侯环荣，魏君锋，尚 佳

(河南省人民医院感染性疾病科，河南郑州，450003)

中国是乙型肝炎病毒感染高流行区，慢性乙型肝炎发展为肝硬化的年发生率约为2.1%［1］，而肝纤维化是其发展为肝硬化的必经阶段，抗纤维化也因此成为慢性乙型肝炎治疗过程中的重要方面。脂联素(ADN)作为脂肪细胞分泌的一种细胞因子具有广泛的生物学作用，可参与糖尿病、动脉粥样硬化等多种疾病的发生及进展，且近年来研究发现脂联素具有抑制肝纤维化的作用，但目前尚缺乏脂联素与慢性乙型肝炎病毒感染肝纤维化相关性的研究。本研究检测慢性乙型肝炎患者血清脂联素水平及肝活检组织脂联素的表达，探讨脂联素与肝纤维化的相关性，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2009年1月－2013年6月本院传染科住院治疗的HBeAg阳性并接受肝活检的慢性乙型肝炎患者60例，其中男34例，女26例，年龄31～59 岁，平均(48.8 ±7.4)岁，均为初次进行抗病毒治疗，符合2000年中华医学会西安会议修订的《病毒性肝炎防治方案》诊断标准［2］。排除其他病毒感染引起的肝功能异常及肝细胞癌，均无长期大量饮酒史、未合并2型糖尿病。肝纤维化分级由同一位病理医生评价Ishak纤维化评分及组织炎症活动度，根据肝纤维化程度将0～2级者纳入轻度肝纤维化组(n=28)，3～4级者纳入重度肝纤维化组(n=17)，5～6级者纳入为肝硬化组(n=15)。另选取同期本院体检中心的20例与慢性乙型肝炎患者年龄、性别相匹配的健康体检人员设为对照组。本研究经本院伦理会同意，所有研究对象均签署知情同意书。

1.2 研究方法

患者入院后次日、对照组入组日晨抽空腹静脉血 3 mL，分离血清置于 －30℃ 待测，采用ELISA法检测血清脂联素水平，抗体为Majorbio Biotech公司的鼠抗人单克隆抗体，具体操作步骤严格按说明书进行。

肝组织脂联素的免疫组织化学检测采用Phoenix Biotech公司购买的鼠抗人脂联素单克隆抗体试剂盒，具体操作步骤严格按说明书进行。脂联素染色阳性标准为细胞胞质出现棕色颗粒。每张切片在高倍镜下(400倍)随机选择5个视野，每个视野计数200个细胞(共1000个)，阳性细胞数≥10%判为阳性，阳性细胞数＜10%判为阴性。

1.3 统计学方法

应用SPSS 17.0统计学软件，计量资料采用均数±标准差()表示，比较采用t检验，率的比较采用χ2检验，应用Spearman相关系数进行相关分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

各组血清脂联素水平比较，差异均有统计学意义(P＜0.05)，且血清脂联素水平与肝纤维化分级存在显著正相关(r=0.967，P ＜0.05);肝硬化组肝组织脂联素表达率为93.33%，明显高于轻度(14.29%)及重度纤维化组(41.18%)，重度纤维化组高于轻度纤维化组，差异均有统计学意义(P ＜0.05)。见表1。

表1 各组血清脂联素及肝组织脂联素表达率比较［n(%)］

3 讨论

乙型肝炎病毒感染是一项全球性公共卫生问题，每年大约有100万人死于乙型肝炎病毒感染后的肝硬化、肝细胞癌、肝功能衰竭［3］。肝纤维化是慢性乙型肝炎进展为肝硬化的必经阶段，是肝脏在受到包括病毒、酒精、药物及化学毒素、自身免疫等各种损伤时肝组织内细胞外基质(ECM)成分过度增生与异常沉积导致肝脏结构(以肝窦毛细血管化与肝小叶内以及汇管区纤维化为表现)及功能(以肝功能下降、门静脉高压等为表现)发生异常的病理变化［4］，进一步可发展为肝硬化［5］，严重影响患者的生命健康。目前一般认为肝星状细胞(HSC)增殖、活化导致肝脏内ECM过度沉积是肝纤维化的核心［6］。静止期HSC在各种致病因素的作用下被激活并增殖，导致合成和分泌ECM增加，并减少其降解，最终出现ECM积聚而发生肝纤维化［7］。

脂联素是在人体血浆中高浓度存在的一类具有保护作用的脂肪细胞因子，具有调节能量代谢、提高胰岛素的敏感性的作用［8］，且近年来其抗炎和抗肝纤维化作用不断受到重视，其机制可能为通过抑制及减少机体 TGF－B1、TNF－α、PDGF及α－SMA、PCNA的表达等来使HSC静息状态得以维持，抑制HSC活化、增殖及迁移，并具有促进其凋亡的作用，通过抑制枯否细胞产生TNF－α，从而起到抑制肝纤维化的作用［9］，国外动物实验研究［10］也证实了这一过程。近年来也有研究表明脂联素与肝纤维化具有相关性，但不同研究结果具有一定的差异，可能与多种因素如疾病的时期、病因、性别、年龄等影响有关。Hui JM等［11］观察了非酒精性脂肪性肝炎(NASH)患者与单纯脂变患者及正常对照组，发现NASH患者血清脂联素水平较前二组明显降低，并且与肝脏炎症坏死具有相关性。Liu等［12］对280位乙型肝炎患者与116例健康者进行对照研究发现，血清脂联素水平在乙肝患者明显低于肝硬化和肝细胞癌患者。本研究结果表明，血清脂联素水平在对照组、轻度纤维化组、重度纤维化组及肝硬化组两两比较依次上升，差异有统计学意义(P＜0.05)，且血清脂联素水平与肝纤维化分级存在显著正相关性(P＜0.05);本研究也对肝组织脂联素的表达进行了免疫组化研究，结果显示肝硬化患者肝组织脂联素表达率最高。既往研究［13］提示肝组织脂联素的表达来源可能为血清脂联素蛋白的摄取，脂联素排泄的途径之一可能是胆汁分泌，而肝硬化时胆管分泌功能损伤可能是脂联素水平的升高及在肝脏中聚集的原因。

综上所述，脂联素与慢性乙型肝炎肝纤维化的进程密切相关，有望为肝纤维化的防治提供新的思路。

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