气相色谱法测定奥美拉唑中三乙胺残留

姜小林 傅志慧 应志洪 吴宁苹

（浙江省金华康恩贝生物制药有限公司，浙江 金华 321016）

三乙胺（triethylamine）是一种毒性较大的有机溶剂。美国药典和中国药典并没有将其列入毒性有机溶剂控制范围，但欧洲药品质量委员会（EDQM）特别规定了三乙胺的限度（质量分数0.32×10-3），要求生产企业在药品质量中进行严格控制。奥美拉唑的生产工艺中使用三乙胺调整pH，因此三乙胺将列入有机残留检测。

目前国内外文献中均没有关于奥美拉唑及结构相似的其他药物中三乙胺的检测报道。常规的顶空进样法可以快速地检测三乙胺[1]。但硅钢类金属转移管路对三乙胺有吸附作用，安捷伦等公司的绝大多数气相色谱仪不适用于三乙胺的顶空方法检测。因此应研究一种可靠适应的方法。

1 实验部分

1.1 仪器与试药

Agilent 7890气相色谱仪（FID检测器）；三乙胺、正庚烷和甲苯，均为色谱纯；氢氧化钠为分析纯；奥美拉唑原料由浙江金华某公司生产。

1.2 色谱条件及系统适用性实验

色谱柱：Agilent HP-INNOWAX毛细管色谱柱（30 m×0.53 mm×φ1.0 μm，聚乙二醇 20000）；程序升温（初始温度为40℃，保持10 min，再以30℃/min的速率升至200℃，保持3 min）；载气为氮气 （恒流），体积流量4.0 mL/min；分流体积比20:1；进样口温度200℃，FID检测器温度250℃，进样量1 μL。注入对照液，三乙胺峰与正庚烷峰之间的分离度不大于2.0，柱效不得低于5 000；拖尾因子不得大于1.5；重复进样5次，相对标准偏差不大于5.0%。

1.3 测定方法

内标溶液的配制：精密移取正庚烷0.5 mL，用甲苯稀释至100 mL；精密移取1.0 mL加甲苯稀释至100 mL。

三乙胺标准贮备液的配制：精密称取三乙胺对照品约0.1 g，用水稀释至100 mL。精密量取1 mL该液，用水稀释至10 mL。

对照溶液的配制：精密移取三乙胺标准贮备溶液1 mL，置10 mL具塞试管中，加入2 mL浓度0.5 mol/L的氢氧化钠溶液，加入2 mL内标溶液，振摇2 min后，取上清液。

样品溶液的配制：精密称取奥美拉唑约0.3 g置10 mL具塞试管中，加入2 mL浓度0.5 mol/L的氢氧化钠溶液超声溶解，加入1 mL水，加入2 mL内标溶液，振摇2 min后，取上清液。

空白溶液：取1 mL水置10 mL具塞试管中，按对照溶液同法操作。

三乙胺测定：精密吸取按上述方法配制的对照溶液和样品溶液各1 μL，注入气相色谱仪，记录色谱图，按内标法计算奥美拉唑原料中的三乙胺含量。

2 结果与讨论

2.1 系统适用性考察

取1.3节中配制的空白溶液和对照溶液各1 μL，注入气相色谱仪，记录色谱图，见图1。

图1 系统适用性色谱Fig 1 GC chromatograms for system suitability test

图1结果表明，空白溶剂不干扰三乙胺的测定。三乙胺峰的理论板数为6179，拖尾因子为1.4，与正庚烷的分离度为5.34，符合系统适用性要求。

2.2 线性关系

分别移取三乙胺对照品适量，加水逐步稀释成不同质量浓度的三乙胺标准液（4.8～143.6 μg/mL），移取1 mL上述各溶液，按1.3节中方法配制成不同含量的对照液。分取1 μL，注入气相色谱仪，记录色谱图。以质量浓度对三乙胺与正庚烷峰面积之比作线性回归，得回归方程为（R=0.998 9）：

A/mm2=[0.010 7ρ/(μg·mL-1)]-0.017 6。经实验，三乙胺在质量浓度4.8～143.6 μg/mL内与峰面积比呈良好的线性关系。

2.3 精密度

精密称取奥美拉唑原料6份，按1.3节中方法操作，以不同人员在不同时间用不同仪器分别测定，结果实验者1测得奥美拉唑中三乙胺的质量分数为40×10-6（RSD为4.6%），实验者2测得奥美拉唑中三乙胺质量分数为39×10-6（RSD为3.7%）。12份检测结果的RSD为4.3%。

2.4 回收率

精密称取9份奥美拉唑原料置10 mL具塞试管中，每份约 0.3 g（其中三乙胺为 12.0 μg），加入 2 mL浓度0.5 mol/L氢氧化钠溶液超声溶解。分别加入1 mL的50%、100%、150%三乙胺标准贮备液，按1.3节中样品溶液配制。量取上述溶液各1 μL，注入气相色谱仪，根据色谱检测结果计算三乙胺的回收量。结果见表1。

表1 回收率测定结果Tab 1 Recovery rate test results

由表1可知，平均回收率为99.5%、平均RSD为2.2%，表明该法有良好的回收率。

2.5 检测限与定量限

精密称取三乙胺对照品约0.1 g，加水逐步稀释成2.1 μg.mL-1的溶液，按1.3节中对照溶液配制。取1 μL 注入气相色谱仪，测得信噪比（S/N）为 3，对应的检测限为 7×10-6。

精密称取三乙胺对照品约0.1 g，加水逐步稀释成6.3 μg/mL的溶液，按1.3节中对照溶液配制。取1 μL注入气相色谱仪，测得信噪比（S/N）为 10，对应的定量限为 21×10-6。

2.6 讨论

1)色谱柱的选择。三乙胺极性较大，色谱峰容易拖尾，影响检测结果的准确性。经安捷伦公司的HP-5、DB 624、HP-INNOWAX 等毛细管色谱柱实验，三乙胺在HP-INNOWAX色谱柱中洗脱时间短，峰形尖锐，柱效和灵敏度比其他两款色谱柱高，实际选择HP-INNOWAX毛细管色谱柱，典型色谱图见图1(b)。

2)萃取剂的确定。奥美拉唑在稀氢氧化钠溶液中易溶解，不溶于甲苯；三乙胺微溶于氢氧化钠溶液，易溶于甲苯，因此选用甲苯作为三乙胺的萃取剂。

3)内标物的确定。三乙胺的沸点为89.5℃，选用极性相似、沸点较近的正己烷（沸点为68.7℃）和正庚烷（沸点为98.5℃）进行实验。结果表明，在HPINNOWAX色谱柱中，三乙胺与正己烷峰不易分离，而与正庚烷能完全分离，分离度大于5，因此选择正庚烷为内标物。

3 结论

本研究建立的内标法灵敏度高，避免了三乙胺在硅钢类金属顶空管路中的吸附问题，检测结果更精密可靠，可用于奥美拉唑中三乙胺的残留检测。

[1]邓菲，党岳，高峥，等.两性霉素B中三乙胺残留溶剂测定方法验证[J].河北化工，2009,32（10）:60.