不同季节对鹅若干生理和免疫指标的影响

肖 雄，孔丽娜，吴银宝，张文武，罗庆斌*

(1.华南农业大学 动物科学学院，广东 广州 510642; 2.广东温氏食品集团股份有限公司，广东 新兴 527439)

不同季节对鹅若干生理和免疫指标的影响

肖 雄1，2，孔丽娜1△，吴银宝1，张文武1，罗庆斌1*

(1.华南农业大学 动物科学学院，广东 广州 510642; 2.广东温氏食品集团股份有限公司，广东 新兴 527439)

为了探讨不同温度对乌鬃鹅若干生理和免疫指标的影响，寻找准确评定乌鬃鹅热耐受性的候选生理和免疫性状指标，以30周龄健康清远乌鬃鹅母鹅200只为研究对象，分别在夏季(35 ℃)和冬季(20 ℃)，采集鹅只的血液样品，非抗凝血用于测定T3、皮质酮含量；抗凝血用于测定H %、L %和H/L值。结果表明：夏季乌鬃鹅血清中的皮质酮含量显著高于冬季(P<0.05) ，T3含量极显著高于冬季(P<0.01)；与冬季相比，夏季乌鬃鹅的H%、H/L极显著升高(P<0.01)，L %极显著降低(P<0.01)。皮质酮和H/L值可以作为评价鹅热耐受性的重要性状指标。

鹅；不同季节；生理指标；免疫指标

清远乌鬃鹅属于小型肉用鹅种,饲养历史悠久[1]，具有优异的遗传特性，产品有很强的市场优势，但由于鹅羽毛细密、密度大，皮肤没有汗腺，对热应激反应尤为敏感。动物在热应激时机体散热受阻，呼吸活动加强，免疫力下降,容易诱发某些传染病,出现休克甚至死亡。随着饲养方式由放养型向集约化高密度饲养的转变，热应激给养鹅生产造成了巨大的损失[2]。高温除了会引起动物产生热应激外，还可以引发一系列非特异性全身反应。血液生化指标的变化是以机体组织细胞机能改变和新陈代谢变化为基础的，热应激可导致动物的血液生化指标发生改变[3]，同时热应激会影响动物的免疫功能，适当的热应激会使动物免疫功能加强并逐渐适应新环境，但过度的热应激则会使动物的免疫功能下降[4]。

生产上缓解热应激的方法主要集中在改善饲养环境方面，从遗传育种角度出发通过改良鹅只本身的热耐受性也是抗热应激的有效手段。目前在家禽热耐受性的研究中，涉及的耐热指标有温度指标、热存活指标、代谢率指标、血液生化和免疫指标、热应激蛋白(heat stress proteins，HSP)等，目前有关家禽的这方面研究主要集中在鸡上，对鹅的研究几乎是空白，并且在准确评定热耐受性的生物标记方面还存在意见分歧，所以研究不同温度条件 对鹅的生理和免疫指标的影响对探讨家禽热耐受性有着重要的作用。本研究分别在夏季(35 ℃)和冬季(20 ℃)测定了乌鬃鹅纯系群体的皮质酮、T3和H/L指标，通过比较不同温度下上述3个指标的变化，旨在直观地了解高温对鹅生理和免疫指标的影响，为水禽热应激的防控提供一定的参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物

清远乌鬃鹅母鹅200只由阳江智特奇鹅业有限公司提供，饲养模式为砖混结构鹅舍和水陆运动场，按照正常饲养标准进行饲养管理。

1.2 血样采集

在夏季(2009年9月20日上午10∶00整)，室外环境温度为35 ℃时，对种鹅(30周龄)进行翅下静脉采血，并记录采样种鹅的脚号。同年在冬季(2009年11月15日上午10∶00整)，室外温度20 ℃时，利用脚号记录对同一只种鹅(38周龄)进行翅下静脉采血。两次均采集非抗凝血1～2 mL，血清用于测定三碘甲腺原氨酸(T3)和皮质酮；抗凝血1～2 mL，用于测定异嗜性粒细胞/淋巴细胞(Heterophil / Lymphocyte,H/L)，H%和L%。

1.3 生理及免疫指标测定

1.3.1 T3和皮质酮的测定 采非抗凝血直接离心吸取血清，由中山大学广州达瑞抗体中心用T3和皮质酮 ELISA 试剂盒检测，操作按照试剂盒说明书进行。

1.3.2 H/L的测定 将采集到的抗凝血用瑞氏和吉姆萨复合染色法对血涂板染色[5]，镜检，按Alfred等[6]的白细胞分类方法进行细胞分类，并按Campo等[7]的方法进行计数和计算。由解放军458医院免疫细胞实验室代测。

1.4 数据分析

不同状态下生理和免疫指标的差异比较采用T检验，利用SAS 9.0软件完成分析。

2 结果与讨论

2.1 不同季节对乌鬃鹅血液生理指标的影响

南方夏季高温对动物来说是一种不良刺激，动物除了进行行为等物理调节外,还必须改变血浆中某些激素水平以加强化学调节。皮质酮是由下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴(HPA)分泌的一种糖皮质激素，对应激产生的生理和行为应答有着重要作用。Chen等[8]研究发现，与正常状态相比，热应激(35 ℃)状态下，隐性白羽洛克鸡血清中皮质酮和T3浓度含量极显著升高。Edens等[9]使雌、雄仔鸡突然处于43 ℃ 2 h,每隔30 min屠宰采血,发现血浆皮质类固醇先急剧增加,而后迅速下降。然而也有不同观点认为高温条件下皮质酮上升不显著或者下降[10-11]。同样地，其他形式的应激也会改变血浆中皮质醇的含量,比如短途运输应激会使小鼠血清中的皮质酮水平明显降低[12]。屠云洁等[13]对7日龄皖西白鹅进行急性冷应激，发现血清的皮质醇在冷暴露3 h时显著升高,并在冷暴露期间保持高水平。Davis等[14]认为鸡血浆皮质酮含量跟年龄有关，皮质酮在26 wk(产蛋高峰期)和64 wk(产蛋结束)时含量最高。关于皮质酮是否能够作为准确地评价应激的指标至今都没有达成共识，Minozzi等[15]提出不能单独用皮质酮的含量来评价耐应激能力，应该结合其他指标综合考虑。三碘甲状腺原氨酸(T3)是由下丘脑-垂体-甲状腺轴分泌的调节生长代谢的重要激素。血浆T3水平下降时，代谢速度减慢，产热减少，反之亦然。应激会影响血清中T3和T4水平，所以结合血清中的T3水平和皮质酮含量来评价耐应激能力。高增兵等[16]将288只A A鸡分成4组，分别置于25.10、29.98、33.08和36.92 ℃的温控室内，发现各试验组与对照组(25.10 ℃)相比,血浆T3浓度先升高后降低。但一些学者认为在热应激条件下鸡血浆T3水平会降低，这样降低代谢强度从而减少产热，更好的适应高温环境[17-19]。Sinurat等[20]也研究表明,随着环境温度的升高，血清中T3 含量逐渐下降，且在35 ℃时极显著低于常温组。

表1 不同季节乌鬃鹅血液生理指标的差异比较Table 1 Comparison of goose with various physiological indices in different seasons

注：括号内数字表示个体数。下同。

Note:Data in brackets indicate individual numbers.The same below.

本研究发现，夏季乌鬃鹅皮质酮含量显著高于冬季(P<0.05)，血清T3含量极显著高于冬季(P<0.01)。鹅只在冬季(刚产蛋结束)正采用人工强制换羽进行反季节繁殖，虽然没有遭受热应激，但是换羽应激会使皮质酮含量升高，所以如果排除换羽应激，夏季鹅血清中的皮质酮含量应该比冬季高很多，也说明换羽应激对乌鬃鹅血清皮质酮的影响比热应激小。由甲状腺分泌的三碘甲状腺原氨酸(T3)与甲状腺素(T4)是家禽体内非常重要的生长调控激素，对家禽的生长、生殖、换羽等均有密切关系，从而换羽应激对T3的影响比热应激大，所以造成了夏季乌鬃鹅的T3含量比正常温度下高；夏季鹅只血清中T3水平明显升高的另一个原因可能是由于本研究的应激条件跟文献报道的不完全一样。文献报道的高温应激条件都是人工制造高温条件或者室内模拟昼夜节律变化的高温，而本试验则是自然条件下的高温，它有独自的特点，比如昼夜温差大，一天中温度变化大等。我们采样的时间是在上午10∶00～12∶30，正处于逐渐的升温阶段，正如高增兵等[16]的研究，在这个短期时间内，鹅只处于急性热应激状态，其为适应这种不利环境而增加代谢强度和产热，故T3升高。而此后因散热困难，鹅体温上升快，为减缓体温过度升高，一方面减少采食量，另一方面降低T3分泌量；当鹅只适应环境后，T3分泌渐趋稳定。Tao等[19]的观点也同样证实了以上的推测，T3的变化具有昼夜节律，试验模拟昼夜节律变化的高温条件，从采样的几个时间点来看都存在明显的随着温度的变化而变化。

2.2 不同对乌鬃鹅免疫指标的影响

机体受到外界刺激时( 如病原体入侵，热应激等)，淋巴细胞和单核细胞在血液中的含量会下降，异嗜性粒细胞增加，因此异嗜性粒细胞(H)与淋巴细胞(L)的比值升高[21-22]。H/L值的变化与家禽的应激程度密切相关,可以作为检测家禽应激程度的一项准确指标[7]。本研究发现，夏季乌鬃鹅的H/L和H%值均极显著高于冬季(P<0.01)；而与冬季相比，夏季乌鬃鹅的L%值极显著降低(P<0.01)。与安丽英[23]、吴春梅等[24]报道的范围一致，也与前人的报道相符。H/L值已经作为一个成熟的评价抗逆性的指标应用到育种上，Al-Murrani等[25]研究表明H/L值高的家系更容易应激,多项生产性状均低于 H/L值低的家系。王存波等[26]利用H/L评价不同品种鸡的抗应激能力，初步表明家禽的抗应激能力存在品种间差异。吴春梅等[24]研究发现,北京油鸡的H/L值极显著低于白来航蛋鸡，得出北京油鸡比白来航蛋鸡耐逆性更强。除了热应激，其他应激也可导致H/L值升高，比如限饲、冷应激、束缚、病毒感染、电击、氨气等[27]，同时H/L值与性别和年龄紧密相关。本试验的结果证明了H/L值可以作为评价鹅热耐受性的免疫指标。冬季虽然没有高温应激，但是存在人工强制换羽应激，会使H增加，L减少，H/L值增大，所以夏季乌鬃鹅的H/L值实际上应该比冬季高很多，换羽应激对H/L值的影响没有热应激大。H/L值可以作为一个很好的评价家禽抗逆性的免疫指标。

表2 不同季节乌鬃鹅免疫指标的差异比较Table 2 Comparison of goose with various physiological indices in different seasons

3 结 论

高温会增加鹅外周血中的T3和皮质酮含量，同时也会使H/L值升高。皮质酮和H/L值可以作为评价鹅热耐受性的重要指标，但T3是否能作为评价耐热性能的候选指标还需进一步验证。

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EffectsofSeasonalDifferenceonPhysiologicalandImmuneIndicesofGoose

XIAO Xiong1,2,KONG Li-na1,WU Yin-bao1,ZHANG Wen-wu1,LUO Qing-bin1*

(1.SouthChinaAgricultureUniversity,Guangzhou510642,China；2.GuangdongWensfoodgroupLimitedbyShareLtd,Xinxing527439,China)

This study was designed to explore the effects of different temperature on several physiological and immune indices of Wuzong goose.30-week-old female Wuzong gooses (n=200) were selected and blood samples were obtained at summer(35 ℃) and winter(20 ℃),respectively,then repackaged into blood collection tubes.Blood serum was used to measure T3 and corticosterone content,and the anticoagulation was to determine H%,L% and H/L value.The result indicated that compared with the winter,the T3 and corticosterone content of blood serum in Wuzong goose increased extremely significantly (P<0.01) or significantly (P<0.05) at summer.Moreover,the H%,H/L value rose significantly (P<0.01) and the L% decreased significantly (P<0.01).The corticosterone and H/L values were important indexes to judge thermal tolerance of goose.

goose; different season; physiological index; immune index

2013-12-21，

2014-01-12

广东省教育部产学研结合项目(2009B090300088)

肖 雄(1984-)，男，四川宜宾人，硕士，从事家禽生产与管理工作；△与第一作者同等贡献。

*[通讯作者]罗庆斌(1969-)男，四川雅安人，副教授，硕士生导师，研究方向为家禽健康养殖与安全生产。E-mail: qbluo@scau.edu.cn

S811.6

A

1005-5228(2014)07-0045-04