不同子宫内膜组织中ER、PR蛋白的表达*

张 娟,任琛琛,杨 立,任瑞芳,白 杨,陈 琳,李玛俊

郑州大学第三附属医院妇产科 郑州 450052

不同子宫内膜组织中ER、PR蛋白的表达*

张 娟,任琛琛#,杨 立,任瑞芳,白 杨,陈 琳,李玛俊

郑州大学第三附属医院妇产科 郑州 450052

#通讯作者，女，1968年11月生，博士，主任医师，研究方向：妇科肿瘤， E-mail：renchenchen1106@163.com

子宫内膜;雌激素受体；孕激素受体;中重度宫腔粘连

目的：观察子宫内膜功能层、基底层及浅肌层组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)蛋白的表达情况。方法应用免疫组化SP法检测30例子宫内膜功能层、基底层、浅肌层组织中ER、PR蛋白的表达。结果子宫内膜功能层、基底层和浅肌层中ER和PR蛋白表达水平差异均有统计学意义(χ2=17.582和19.182，P均<0.001)；功能层、基底层和浅肌层ER和PR蛋白表达水平依次降低。结论给予高于生理剂量的雌孕激素周期性疗法刺激残余的子宫内膜生长，可能预防中重度宫腔粘连分离术后宫腔粘连的再次发生。

子宫内膜分为功能层、基底层和浅肌层，月经期功能层坏死脱落，受卵巢雌孕激素的调节，基底层可再生形成功能层[1]。因感染、创伤等因素引起子宫内膜功能层、基底层或浅肌层损伤，如损伤后不能及时修复，容易形成宫腔粘连[2]。宫腔粘连分离术(transcervieal resection of adhesions，TCRA)后宫腔再次粘连仍有可能发生，需要采取一定措施使子宫内膜恢复正常状态。轻度宫腔粘连分离术一般只伤及功能层，应用生理剂量雌孕激素效果比较理想；但中重度宫腔粘连会伤及基底层甚至浅肌层，应用雌孕激素治疗的效果尚无定论。Romer 等[3]提出中重度宫腔粘连分离术后应给予大剂量雌孕激素使内膜上皮化进而促进其再生，加速子宫内膜修复。但Chen等[4]认为高雌激素状态可使血清中转化生长因子及成纤维细胞生长因子2表达升高，进而使子宫内膜发生纤维化改变，再次形成宫腔粘连 。作者应用免疫组化方法观察子宫内膜功能层、基底层及浅肌层中雌激素受体(estrogen receptor,ER)和孕激素受体(progesterone receptor,PR)的分布情况，以期为中重度宫腔粘连分离术后雌孕激素的应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1标本选择选取2000年1月至2012年12月因宫颈不典型增生住院行子宫全切的患者30例，年龄27～45(38.5±0.5)岁。纳入标准：宫颈不典型增生，半年内未服用任何激素类药物，正常子宫(无子宫肌瘤、子宫腺肌症、子宫内膜息肉等)。所选标本均为月经中后期(月经第15～21天)子宫内膜。

1.2组织学观察30例石蜡切片经HE染色，于显微镜下观察正常人子宫内膜，根据各层的组织学[4-5]不同进行分层。功能层：螺旋动脉周围蜕膜样变，间质水肿明显，腺体扩张、边缘不规则、腔内有分泌物；基底层：腺体呈管状、腺上皮为柱状，间质致密，似增殖期内膜，含多量厚壁血管(基底动脉)；浅肌层：含有腺体，缺少子宫内膜下组织，无厚壁血管，紧贴基底层。

1.3子宫内膜组织ER、PR蛋白的表达采用免疫组化SP法检测。鼠抗人ER、PR单克隆抗体来自于丹麦DAKO公司。具体步骤如下：石蜡切片常规经二甲苯脱蜡，梯度酒精水化，自来水冲洗；每张切片加50 μL过氧化物酶阻断溶液，室温下孵育10 min，PBS冲洗3次；每张切片加50 μL一抗(稀释100倍)孵育150 min，PBS冲洗3次；每张切片加50 μL生物素标记的二抗，孵育60 min，PBS冲洗；加100 μL新鲜配制的DAB显色液3～5 min，蒸馏水冲洗终止反应；苏木素复染。染色结果判定： ER、PR主要定位于细胞核，以棕红色为阳性染色。每张切片选取10个高倍视野观察，参照文献[5]的方法计算阳性细胞的百分率,阳性细胞<10%为(-)，～29%为(+)，～49%为()，≥50%为()。

1.4统计学处理应用SPSS 17.0进行分析，子宫内膜各层组织中ER和PR蛋白阳性表达的比较采用k个相关样本的秩和检验，检验水准α=0.05。

2 结果

ER和PR在子宫内膜功能层、基底层及浅肌层之间的表达见图1、表1和2。

χ2=17.582,P<0.001

表2 子宫内膜各层组织中PR蛋白的表达水平 例

χ2=19.182,P<0.001。

3 讨论

子宫内膜功能层受卵巢激素变化的调节，具有周期性增殖、分泌和脱落变化。月经后基底层再生并修复子宫内膜创面，重新形成子宫内膜功能层并再次进入下一个月经周期，形成正常的子宫内膜形态。轻度宫腔粘连一般只伤及功能层，术后应用生理剂量的雌孕激素序贯治疗，促使子宫内膜再生并使术后创面重新上皮化[6]。中重度宫腔粘连伤及基底层甚至浅肌层时，是否也可经验性给予生理剂量的雌孕激素序贯治疗，预防宫腔粘连的再次发生？

ER、PR位于细胞核中，当受体与激素结合形成复合物后，以活化的形式结合到染色体的特定部位，引起基因的活化，启动转录合成新的DNA，继而合成新的蛋白质，通过这些具有生物学功能的蛋白质调节细胞的生长和代谢。该研究结果表明子宫内膜不同损伤部位的ER、PR表达并不一致，ER、PR在子宫内膜功能层、基底层及浅肌层的阳性表达水平依次降低，以上结果为中重度宫腔粘连分离术后雌孕激素的应用提供理论依据。

综上所述，作者认为中重度宫腔粘连分离术后应给予高于生理剂量的雌孕激素序贯治疗，可能预防宫腔再次粘连。但该实验样本量较少，并且只是从理论上提示中重度宫腔粘连术后可以用高于生理量的雌孕激素，需要进一步实验验证。

[1]丰有吉.妇产科学[M].北京:人民卫生出版社,2002.

[2]罗丽兰.不孕与不育[M].北京:人民卫生出版社,1998:241

[3]Romer T,Schmidt T,Foth D.Pre-and postoperative hormonal treatment in patients with hysteroscopic surgery[J].Contrib Gynecol Obstet，2000，20：1

[4]Chen FP,Soonq YK,Hui YL.Successful treatment of severe uterine synechiae with transcervical resectoscopy combined with laminaria tent[J].Hum Reprod,1997,12(5):943

[5]陈乐真.子宫内膜病理组织学诊断[M].北京:人民军医出版社,2001.

[6]Fitzgibbons PL,Murphy DA,Hammond ME,et al.Recommendations for validating estrogen and progesterone receptor immunohistochemistry assays[J].Arch Pathol Lab Med,2010,134(6):930

(2013-08-12收稿 责任编辑李沛寰)

Expressions of ER and PR protein in different endometrial tissue

ZHANGJuan,RENChenchen,YANGLi,RenRuifang,BAIYang,CHENLin,LIMajun

DepartmentofObstetricsandGynecology,theThirdAfflliatedHospital，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450052

endometrium; estrogen receptor; progesterone receptor;moderately severe intrauterine adhesion

Aim: To observe distribution of the expressions of estrogen receptor (ER) and progesterone receptor (PR) in endometrium function layer, base layer, shallow muscular layer.Methods: Immunohistochemical SP method was applied to detect the expressions of ER and PR in 30 cases of endometrium function layer, base layer, and shallow muscular layer.Results: The expression levels of ER and PR protein in function layer, base layer and shallow muscular layer had statistical difference(χ2=17.582 and 19.182,P<0.001),and the expression levels of ER and PR proteins in function layer, base layer and shallow muscular layer decreased successively.Conclusion: Using estrogen and progesterone at higher dose to stimulate the growth of remnant endometrium may prevent the recurrence of intrauterine adhesion.

10.13705/j.issn.1671-6825.2014.03.017

*河南省人口计生委计划生育科学技术项目 2013年

R711.6