壳聚糖胶囊大鼠30天喂养试验研究

吴 丹， 余永红

(1.江西省药品审评中心,江西南昌 330046;2.江西省食品药品检验所,江西南昌 330029)

壳聚糖胶囊大鼠30天喂养试验研究

吴 丹1， 余永红2

(1.江西省药品审评中心,江西南昌 330046;2.江西省食品药品检验所,江西南昌 330029)

[目的]观察壳聚糖胶囊30 d喂养大鼠产生的毒性。[方法]设低(0.83 g/kg·bw)、中(1.67 g/kg·bw)、高(3.33g/kg·bw)剂量组与对照组，连续喂养大鼠30 d观察动物生长发育状况、体重变化、平均进食量，计算食物利用率、脏器重量及脏器/体重比值，分析血常规指标和血生化指标，并进行大体解剖和组织病理分析。[结果]30 d喂养试验期间，动物生长发育良好，各指标与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。大体解剖和组织病理分析未见与样品有关的异常改变。[结论]样品30 d喂养对大鼠未产生明显毒副作用。

壳聚糖；胶囊；大鼠； 毒性;喂养试验

甲壳素是地球上第二大可再生资源[1]。甲壳素脱除乙酰基后的产物是壳聚糖，其化学名称为(1,4)-2-氨基-2-脱氧-β-D-葡聚糖[2]。壳聚糖具有增进结肠功能、维持血清中脂质的正常含量、降低饭后葡萄糖导致的生理反应、抑制食欲、吸附胆汁酸、抗癌、降脂及降胆固醇、增强免疫力、保护胃肠、抗凝血等作用[3-4]，近年来已被广泛用于保健食品开发。壳聚糖胶囊为口服固体制品，其功效成分D-氨基葡萄糖盐酸盐含量大于85.1 g/100g。笔者设低、中、高3个剂量组与对照组，连续喂养大鼠30 d壳聚糖胶囊，观察动物生长发育状况、体重变化、平均进食量，计算食物利用率、脏器重量及脏器/体重比值，分析血常规指标和血生化指标，并进行大体解剖和组织病理分析，观察壳聚糖胶囊30 d喂养大鼠产生的毒性。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

1.1.1 受试物。壳聚糖胶囊内容物由深圳某科技发展有限公司提供，人体口服推荐量为0.033 3 g/kg·bw(以成人体重60kg计)。

1.1.2 试验动物。清洁级SD大鼠由江西中医学院实验动物科技中心提供。实验动物生产许可证号为SCXK(赣)2005-0001。

1.1.3 主要仪器。全自动血液分析仪、全自动生化分析仪。

1.2 方法

1.2.1 试验方法。将雌雄各40只SD大鼠随机分成4组，低(0.83 g/kg·bw)、中(1.67 g/kg·bw)、高(3.33 g/kg·bw)剂量组(分别相当于人体推荐量的25、50、100倍)和对照组；按体重的10%换算成饲料量，低、中、高剂量样品分别以0.83%、1.67%、3.33%的比例与饲料混合，对照组喂食基础饲料；动物分笼饲养，自由摄食饮水，每天观察动物状况，每周加食2次，记录给食量和剩食量，并称重，计算摄食量和食物利用率。30 d后禁食16 h采血，禁食前、后(采血前)称重；以摘眼球方式采血，每只采血2份，1份做血常规检测，1份做生化检测，采血后经颈椎脱臼将动物处死并解剖，对肝、肾、脾、睾丸进行称重，计算脏/体比值，取肝、肾、脾、胃、十二指肠、睾丸、卵巢作病理切片检查。在对各剂量组动物作大体检查未发现明显病变和生化指标改变时，仅进行高剂量组及对照组动物主要脏器的组织病理学检查[5]。

1.2.2 统计方法。利用SPSS11.0软件对数据进行正态检验和方差齐性检验，如果数据为正态分布的方差齐性，则采用单因素方差分析进行组间比较；如果非正态分布或方差不齐，改用秩和检验进行分析[6]。

2 结果与分析

观察发现，各试验组动物生长发育良好，行为正常，未见中毒和死亡。对80只大鼠作大体解剖观察发现，各主要器官的尺寸、外观形态、色泽等未见异常。对高剂量组及对照组大鼠做镜检发现，肝脏、肾脏、胃肠、脾脏及睾丸(卵巢)未见明显的组织病理学变化。试验结果表明，各剂量组的平均进食量、大鼠体重、周食物利用率、总食物利用率与对照组比较无显著性差异(P>0.05)(表1～2)；各剂量组雌雄大鼠的血常规指标和生化指标与对照组比较，无显著性差异(表3～4)。各剂量组大鼠禁食后体重、肝、肾、脾、睾丸重量和肝/体、脾/体、肾/体、雄鼠睾/体比值与对照组比较无显著性差异(表5～6)。

3 结论

30 d喂养试验期间，各试验组动物生长正常，各剂量组体重、增重、食物利用率与对照组比较无显著性差异(P>0.05)，说明受试物对大鼠的正常生长发育和食物的吸收代

表1 壳聚糖胶囊对大鼠体重的影响

注：表中数据为平均值±标准误。

表2 壳聚糖胶囊对大鼠食物利用率的影响

注：表中数据为平均值±标准误。

表3 壳聚糖胶囊对大鼠血常规指标的影响

注：表中数据为平均值±标准误。HGB为血红蛋白；RBC为红细胞总数；HCT为红细胞压积；PLT为血小板数；WBC为白细胞计数；LYM为淋巴细胞；NEUT为中性粒细胞；MO为单核细胞；EO为嗜酸性粒细胞；BA为嗜碱性粒细胞。

表4 壳聚糖胶囊对大鼠生化指标的影响

注：表中数据为平均值±标准误。ALT为谷丙转氨酶；AST为谷草转氨酸；TP为总蛋白；ALB为白蛋白；TC为胆固醇；TG为甘油三酯；BUN为尿素氮；Cr为肝酐；GLU为血糖。

表5 壳聚糖胶囊对大鼠体重及脏器重量的影响 g

注：表中数据为平均值±标准误。

表6 壳聚糖胶囊对大鼠脏器/体重比值的影响 %

注：表中数据为平均值±标准误。

谢无明显影响；大鼠的血常规、血生化指标、脏器重量及脏器/体重比值与对照组比较，无显著性差异(P>0.05)，脏器组织未出现明显异常病理学改变。可见在该试验条件下，受试物30 d喂养对大鼠未产生明显毒副作用。

[1] 郭开宇，赵谋明．甲壳素/壳聚糖的研究进展及其在食品工业中的应用[J]．食品与发酵工业，2000，26(1)：59-64．

[2] 马宁，汪琴，孙胜玲，等．甲壳素和壳聚糖化学改性研究进展[J]．化学进展，2004，16(4) ：643-653．

[3] 李树品，康战燕，苏学艳．壳聚糖与人体生理机能调节[J]．山东科学，1998，11(1)：57-62．

[4] 刘丽红．壳聚糖及其衍生物在医药中的应用[J]．福建化工，2001(1)：13-14．

[5] 中华人民共和国卫生部．保健食品检验与评价技术规范[S]．北京：中华人民共和国卫生部，2003：961-1001．

[6] 王莹，徐艺玫，杜勇，等．月见草油软胶囊大鼠30天喂养试验观察[J]．疾病预防控制通报，2013(4)：89-91．

Thirty Days Feeding Experiment of Chitosan Capsule on Rats

WU Dan et al

(Jiangxi Provincial Center for Drug Evaluation, Nanchang, Jiangxi 330046)

[Objective] To evaluate the toxicology and safety of chitosan capsule. [Methods] Setting low (0.83 g/kg·bw), medium (1.67 g/kg·bw) and high (3.33 g/kg·bw) dose groups and control group; feeding rats for 30 days; observing growth of rats, body weight change and the average intake; calculating food utilization rate, organ weight, and organ/body weight ratio; analyzing biochemical indexes and blood routine indexes; performing gross anatomy and histopathological analysis. [Results] During the experiment, there were no significant differences between the control group and experimental group (P>0.05). There were no abnormal changes associated with chitosan capsules in gross anatomy and histopathological analysis. [Conclusion] There is no obvious side effect of chitosan capsule on rats.

Chitosan; Capsule; Rat; Toxicology; Feeding experiment

吴丹(1983- )，女，江西临川人，主管技师，硕士，从事保健食品研究。

2014-05-04

S 816.4

A

0517-6611(2014)15-04671-02