不同方法学检测乙型肝炎血清标志物结果的应用研究

左立新

不同方法学检测乙型肝炎血清标志物结果的应用研究

左立新

目的 评价酶联免疫吸附剂测定（ELISA），电化学发光免疫分析技术（ECLIA），时间分辨荧光免疫分析技术（TRFIA）及化学发光免疫分析法（CLIA）四种检测方法对乙型肝炎血清标志物检测的一致性。方法 选取2009年1月～2011年2月株洲市人民医院诊治的120例乙型肝炎患者，采用ELISA、ECLIA、TRFIA及CLIA进行乙型肝炎血清标志物检测。结果 在ELISA与ECLIA检测中，HBsAg检测Kappa值为0.821（μ=29.21），HBeAg检测Kappa值为0.887（μ=16.54）一致性极强；抗HBs检测Kappa值为0.754（μ=31.54），抗HBe检测Kappa值为0.751（μ=25.54），抗HBc检测Kappa值为0.691（μ=27.54），有高度一致性。在ELISA与TRFIA检测中，HBsAg检测Kappa值为0.841（μ=31.54），抗HBs检测Kappa值为0.814（μ=25.43），抗HBe检测Kappa值为0.852（μ=18.21），及抗HBc检测Kappa值为0.816（μ=27.54），有极强一致性；HBeAg检测Kappa值为0.761（μ=27.54），有高度一致性。在ELISA与CLIA检测中，抗HBs检测Kappa值为0.876（μ=19.21），抗HBc检测Kappa值为0.864（μ=29.21），有极强一致性；HBsAg检测Kappa值为0.764（μ=26.54），HBeAg检测Kappa值为0.712（μ=24.42），抗HBe检测Kappa值为0.721（μ=21.43），有高度一致性。结论 在对乙型肝炎血清标志物检测时，ELISA、ECLIA、TRFIA和CLIA 4种检测均有一致性，不同检测方法结果可以互认。

乙型肝炎血清标志物；酶联免疫吸附剂测定（ELISA）；电化学发光免疫分析技术（ECLIA）；时间分辨荧光免疫分析技术（TRFIA）；化学发光免疫分析法（CLIA）；一致性

乙型肝炎为全球性多发疾病，目前全球约有3亿乙型肝炎病毒携带者。而我国更是乙型肝炎高发地区[1]，约1亿患者携带乙型肝炎病毒。目前临床上对乙型肝炎的诊断主要依靠乙型肝炎血清标志物，主要有乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎表面抗体（抗HBs）、乙型肝炎e抗体（HBeAg）、乙型肝炎e抗体（抗HBe）及乙型肝炎核心抗体（抗HBc）。传统的检测方法为酶联免疫吸附试验（ELISA）[2]，随着医疗技术的发展，新的实验仪器与技术不断用于临床，电化学发光发（ECLIA），时间分辨免疫荧光法（TRFIA）及化学发光法（CLIA）等新试验方法均在近几年在临床上广泛应用。本研究对用4种方法（ELISA，ECLIA，TRFIA及 CLIA）对120份血清标本进行检测，并对它们的一致性进行了评价。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2009年1月～2011年2月株洲市人民医院诊治的120例乙型肝炎患者，其中男74例，女46例；年龄20～51岁，平均（34.5±1.2）岁。患者均符合乙型肝炎诊断标准[3]。

1.2 方法 抽取120例患者血清样本，并采用ELISA，ECLIA，TRFIA及CLIA这4种方法进行检测。ELISA采用PHOMO酶标仪（安图生物公司）进行检测[4]；ECLIA检测采用罗氏E601电化学发光免疫分析仪；TRFIA采用Angtest时间分辨免疫荧光分析仪；CLIA检测采用意大利IASON化学发光荧光免疫分析仪[5]。

1.3 结果判断 根据厂家试剂说明书规定的Cut-off值做为判断标准。应用竞争法检测时阳性为＜Cut-off值，夹心法检测时检测阳性为＞Cut-off值[6]。

1.4 统计学方法 判断不同检测方法检测结果是否具有一致性采用Kappa检验，并采用μ检验进行抽样误差影响的排除。根据Kappa系数对检测结果一致性程度进行分区，一般划分为6个区段：Kappa系数＜0表示极差；0～0.2表示微弱；0.21～0.4表示弱；0.41～0.6表示中度；0.61～0.8表示高度；0.81～1.0表示极强。

2 结果

ELISA与ECLIA检测乙型肝炎血清标志物结果见表1。ELISA与TRFIA检测乙型肝炎血清标志物结果见表2。ELISA与CLIA检测乙型肝炎血清标志物结果见表3。

表1 应用ELISA与ECLIA方法检测乙型肝炎血清标志结果比较

表2 应用ELISA与TRFIA方法检测乙型肝炎血清标志结果比较

3 讨论

我国为乙型肝炎高发地区，故需一种或几种可靠检验方法来诊断乙型肝炎。目前临床上诊断乙型肝炎的方法主要依靠乙型肝炎血清标志物，标志物检测主要包括HBsAg、抗HBc、抗HBe、抗HBs及HBeAg[7]。

目前临床上乙型肝炎血清标志物检测有多种方法，主要有酶联免疫吸附试验，电化学发光法，时间分辨免疫荧光法及化学发光法，其中最常用的为酶联免疫吸附试验，特异性及敏感性最佳的检测方法为电化学发光法[8]。

表3 应用ELISA与CLIA方法检测乙型肝炎血清标志结果比较

本研究结果显示，在ELISA与TRFIA检测中，HBsAg检测Kappa值为0.841（μ=31.54），抗HBs检测Kappa值为0.814（μ=25.43），抗HBe检测Kappa值为0.852（μ=18.21），及抗HBc检测Kappa值为0.816（μ=27.54），有极强一致性；HBeAg检测Kappa值为0.761（μ=27.54），有高度一致性。在ELISA与ECLIA检测中，HBsAg检测Kappa值为0.821（μ=29.21），HBeAg检测Kappa值为0.887（μ=16.54）一致性极强；抗HBs检测Kappa值为0.754（μ=31.54），抗HBe检测Kappa值为0.751（μ=25.54），抗HBc检测Kappa值为0.691（μ=27.54），有高度一致性。在ELISA与CLIA检测中，抗HBs检测Kappa值为0.876（μ=19.21），抗HBc检测Kappa值为0.864（μ=29.21），有极强一致性；HBsAg检测Kappa值为0.764（μ=26.54），HBeAg检测Kappa值为0.712（μ=24.42），抗HBe检测Kappa值为0.721（μ=21.43），有高度一致性。总的来说4种方法在对乙型肝炎血清标志物检测均具有高度或极强的一致性，故在临床检测中，这4种方法可以进行互认。

[1] 杨凡,单咏梅,周宏，等.不同方法学检测乙型肝炎血清标志物结果的评价分析[J].检验医学,2010,25(9):723-726.

[2] 潘晓红.不同方法学检测乙型肝炎血清标志物结果评价[J].中国实用医药,2012,7(21):112-114.

[3] 张碧琼.不同方法学检测乙型肝炎血清标志物结果评价[J].健康必读（中旬刊）,2012,11(4):145-146.

[4] 董剑.不同方法学检测乙型肝炎血清标志物结果评价的分析[J].贵阳中医学院学报,2012,34(6):60-61.

[5] 朱丽坤.不同方法学检测乙型肝炎血清标志物结果的评价分析[J].按摩与康复医学（中旬刊）,2011,2(10):22.

[6] 毛炎辉.不同方法学检测乙型肝炎血清标志物结果的评价分析[J].中外医疗,2013,32(9):167-168.

[7] 刘军.不同方法学检测乙型肝炎血清标志物的结果分析[J].中国实用医药,2013,8(18):40-41.

[8] 张俊峰,许现伟.不同方法学检测乙型肝炎血清标志物结果评价[J].中国实用医药,2013,8(27):129-130.

10.3969/j.issn.1009-4393.2014.23.085

湖南 412000 株洲市人民医院检验科（左立新）