新生儿血流感染病原菌分布及耐药性新趋势研究

廖旭东

深圳市妇幼保健院检验科，广东 深圳 518028

新生儿的免疫功能还未发育完全，抵抗力差，在出现血流感染时非常容易引发败血症。败血症是常见的新生儿血流感染，在活产婴中发生率占0.1%～1.0%[1]，尤其对早产婴儿来说，败血症的发生率更为显著。因此，临床在诊治新生儿期间，需要对其血流感染情况进行及时了解，在使用或者更换抗生素之前，应及时抽取血样送检血培养，以起到有效预防和减少败血症发生率的作用[2]。为了探讨新生儿血流感染病原菌的分布情况以及耐药性的新趋势，本文统计并对照分析了2009年及2012年深圳市妇幼保健院（以下简称“我院”）新生儿血流感染病原菌的分布和耐药性情况，分析结果报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

采用回顾病历方法收集我院2009年及2012年新生儿血流感染病原菌的分布和耐药性情况资料。

1.2 诊断方法

在患儿使用或者更换抗生素之前，从颈静脉、桡静脉以及股静脉等不同部位进行2次采血[3]，在无菌操作要求下抽取1～3 mL血液，然后注入有树脂吸附剂的血培养瓶（由法国生物-梅里埃公司提供），增菌时运用BACTEC9240全自动血培养仪。把阳性报警的血培养瓶在血平板（由安图绿科生物工程有限公司提供）中转种，对纯菌落分离，在鉴定菌株和药敏试验时运用DL-医学检验系统进行补充纸片法[4]。

1.3 评定标准

依照美国临床和实验室标准协会（NCCLS）2004年制定的试验标准对药敏结果进行判断，并以大肠埃希菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923以及铜绿假单胞菌ATCC27853为质控菌株。

1.4 统计学方法

应用SPSS 16.0统计学软件进行数据分析，计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 病原菌种类

2009年我院共上报80例新生儿血流感染病例，有9株分离病原菌，分离阳性率为11.2%；2012年共上报110例新生儿血流感染病例，有29株分离病原菌，分离阳性率为26.3%。较2009、2012年我院分离病原菌阳性率明显升高（P＜0.05）。革兰阴性需氧杆菌是我院新生儿血流感染的主要病原菌，占近50%，革兰阳性菌和真菌其次。2009年金黄色葡萄球菌为我院感染率最高的病原菌，2012年转变为白色念珠菌为我院感染率最高的病原菌，2009年及2012年我院白色念珠菌感染率分别为7.2%、12.3%，即较2009、2012年我院新生儿白色念珠菌感染率明显升高（P＜0.05）。

2.2 革兰阴性菌对抗菌药的耐药情况

2009年及2012年我院革兰阴性菌对哌拉西林、头孢唑啉以及氨苄西林的耐药率较高。相较于其他抗菌药，2012年亚胺培南的耐药率较低（P＜0.05）。对第三代头孢菌素的耐药率呈上升趋势的病原菌有沙雷菌属、枸橼酸杆菌属以及肠杆菌属。见表1。

2.3 革兰阳性菌对抗菌药的耐药情况

2009年我院3种球菌对万古霉素均高度敏感，然而2012年出现耐万古霉素肠球菌（VRE）率为6.3%。2012年我院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 （MRSA）和表皮葡萄球菌（MRSE）比率分别为79.3%、88.4%，较2009年的74.5%、67.4%均明显升高（P＜0.05）。见表2。

表1 革兰阴性菌对各种抗菌药的耐药率（%）

表2 革兰阳性菌对各种抗菌药的耐药率（%）

3 讨论

血流感染可能会引发全身性感染，并且症状比较严重，由于新生儿的免疫功能还没有完全发育，使得其更加容易出现感染，特别是早产儿，非常容易出现菌血症和败血症。2009年我院有80例新生儿发生血流感染，共有9株分离病原菌，分离阳性率为11.2%；2012年我院有110例新生儿血流感染病例，有29株分离病原菌，分离阳性率为26.3%；2012年病原菌分离阳性率明显高于2009年，差异有统计学意义（P＜0.05），说明我院新生儿感染至2012年明显增加，提示必须加强对新生儿真菌感染的控制。

2009年及2012年革兰阴性需氧杆菌是我院新生儿血流感染的主要病原菌，占到了近50%，革兰阳性菌和真菌其次。这与杨晓华等[1]研究新生儿血培养病原菌分布及耐药性结果一致，其研究的589例新生儿血培养标本中，共检测出病原菌228株，总阳性率为6.35%，其中革兰阴性菌194株，占总分离率的85.09%，这充分说明革兰阴性需氧杆菌是造成新生儿血流感染的主要病原菌。在本研究中，金黄色葡萄球菌是2009年我院新生儿血流感染中分离率最高的病原菌，而到了2012年转变为白色念球菌分离率最高，其所占的比例由2009年的7.2%上升到了2012年的12.3%。一般认为，葡萄球菌是最为常见的一种化脓细菌，在自然界中广泛分布。相关研究表明，葡萄球菌是医务人员身上携带最多的病菌，是医院交叉感染的重要来源，具有较强的致病性和耐药性。而白色念珠菌是霉菌的一种，可存在于人体口腔、上呼吸道以及阴道和肠道中，在正常者集体中数量较少，不容易引起疾病，但是新生儿免疫能力较差，防御力下降，会导致正常菌群的失调，从而导致大量细菌的繁殖引发疾病。

新生儿免疫功能低下，对于各种病菌的抵抗能力较差，容易感染。2009～2012年我院新生儿血流真菌感染率越来越高，已经成为感染的首要致病菌。通过白色念珠菌、细菌以及抗菌药三者之间关系的体外实验可以得出，抗菌药杀死或者抑制正常菌群中的敏感菌株时，会引发微生态出现失衡情况，减弱了生物屏障的作用，白色念珠菌就会大量繁殖，从而使得菌群失调而出现真菌感染[5]。因此，要想预防新生儿血流的真菌感染，合理使用抗菌药是关键所在，应当引起临床医师的重视。

具有广泛耐药性的致病菌在国内外都是一个棘手的问题。大量研究证实，葡萄球菌对磺胺类、红霉素类和苯唑西林的耐药性均在60%以上，因而对于新生儿败血症的治疗药物已经不能够首选红霉素、苯唑西林、青霉素等药物。虽然葡萄球菌对氯霉素和环丙沙星的耐药性在33%以下，还没有发现耐万古霉素的葡萄球菌，但是经国内的研究证明，耐万古霉素的葡萄球菌株已经被发现。本研究显示，革兰阴性菌对氨苄西林的耐药率较高，对第二代头孢菌素的耐药率也在50%以上，对第三代头孢菌素的耐药性呈增长势头。与未加酶抑制剂者相比，革兰阴性菌对加酶抑制剂的抗菌药敏感性高，这说明产酶菌在我院革兰阴性菌感染中比例较高。据相关资料调查显示，血流感染的首要病原菌为凝固酶阴性葡萄球菌，在总细菌数当中，凝固酶阴性葡萄球菌占到了43%[6]。然而因为凝固酶阴性葡萄球菌是一个正常菌群，临床上在对新生儿采血中如果延长了操作时间抑或没有充分消毒都会形成污染，凝固酶阴性葡萄球菌是最为常见的污染菌。但是由于凝固酶阴性葡萄球菌能够生产毒力因子，致病性高，同时在凝固酶阴性葡萄球菌耐药性日趋增加的形势下，对于新生儿这一抵抗力较弱的群体来说，就愈发显示出了它的致病性[7]。革兰阴性杆菌的耐药机制主要包括以下几个方面：①抗菌药物的靶位数目和作用靶位改变，使病菌不与抗菌药物相结合；②病菌产生钝化酶或者灭活酶，从而使抗菌药物的结构改变或者使抗菌药物失活，导致不能够杀灭病菌；③革兰阴性菌会使细菌细胞壁的通透性改变，使抗菌药物药性不能够进入病菌体内；④病菌通过主动排外作用，将药物排出病菌体外；⑤细菌分泌的细胞外多糖蛋白复合物能够将细菌自身包围，形成细菌生物被膜，也会使革兰阴性菌产生耐药性。

目前，耐甲氧西林葡萄球菌引发的感染发病率不断增加成为了革兰阳性菌耐药的突出表现[8]，这也成为了一个世界性的难题。在本研究当中，MRSA和MRSE的发病率由2009年的74.5%和67.4%上升到2012年的79.3%和88.4%，其中，与MRSA的上升幅度相比，MRSE的上升幅度比较明显。由于VRE的主要危害不只是尚无抗菌药治疗由它引起的感染，更为重要的是它可以把万古霉素耐药的基因向毒力更强的金黄色葡萄球菌进行传递，对新生儿造成的威胁更大[9]。基于此，对VRE所引发的感染进行预防与控制有着重要意义。

总之，为了对细菌耐药性的增长速度进行控制，要适时增加对产超广谱β内酰胺酶菌和一些耐药率明显增高的新生儿血流感染病原菌的监测[10]，并提升抗菌药的应用管理。广大医务人员要提高自身的消毒意识，勤洗手，杜绝交叉感染的机会。另外，要防止抗生素滥用或者抗生素过度使用，这也将成为以后临床工作中的重点。

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