抗苗勒管激素及其2型受体在子宫内膜样腺癌中的表达

严俊

抗苗勒管激素及其2型受体在子宫内膜样腺癌中的表达

严俊

目的分析研究抗苗勒管激素(AMH)及其Ⅱ型受体对于子宫内膜样腺癌的作用, 探讨其分布表达情况。方法60例子宫内膜样腺癌患者, 根据其分化级别进行分组, 包括低分化组(Ⅲ级)15例、中分化组(Ⅱ级)30例和高分化组(Ⅰ级)15例, 对患者腺癌组织进行免疫组化分析, 统计对比三组患者AMH以及AMHR-Ⅱ得到阳性率。结果资料中所有患者子宫内膜样腺癌组织中均检测到AMH以及AMHR-Ⅱ的阳性表达, 高分化组患者AMH阳性率及AMHR-Ⅱ阳性率高于中低分化组, 阳性率随着分化程度的升高而增高, 三组患者阳性率差异有统计学意义(P＜0.05)。结论随着子宫内膜样腺癌患者分化程度的升高, 患者AMH以及AMHR-Ⅱ阳性率呈现上升趋势, 其表达与患者腺癌的发生密切相关。

子宫内膜样腺癌；免疫组织化学；抗苗勒管激素；抗苗勒管激素Ⅱ型受体

苗勒管抑制物, 即抗苗勒管激素(AMH), 是β-转化生长因子的一种, 具有一定调节细胞生长发育的作用, 并对于许多肿瘤尤其是女性生殖系统肿瘤可起到抗增殖作用［1］。该因子通过与其受体AMHR结合而作用, 其受体包括AMHR-Ⅰ及AMHR-Ⅱ。研究发现女性生殖系统常见肿瘤子宫内膜样腺癌上有AMH以及AMHR-Ⅱ的表达, 子宫内膜样腺癌的分化程度或与该表达相关［2］。为探讨该相关性, 分析AMH在子宫内膜样腺癌发病中作用, 采用免疫组化法对本院该类患者病理组织进行监测分析, 报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 本文中选取自2009年2月～2014年2月于张家港市第一人民医院治疗的子宫内膜样腺癌患者60例作为研究对象, 以其手术切除的腺癌组织为样本。资料中患者均经组织病理学检查确认为子宫内膜样腺癌根据分化组别分组, 包括低分化组(Ⅲ级)15例、中分化组(Ⅱ级)30例和高分化组(Ⅰ级)15例, 年龄29～70岁, 中位年龄57岁, 且术前均无化疗和放疗治疗历史。子宫内膜样腺癌按2006年WHO组织学分类标准进行病理分级。多克隆抗体均购自生工生物工程(上海)股份有限公司, 均为即用型试剂。

1.2方法及观察指标 采用免疫组织化学法对所有组织样本进行检测, 分析样本中AMH以及AMHR-Ⅱ的表达情况。操作步骤取常规石蜡组织切成约4 μm厚的切片, 贴附与铬矾明胶载玻片。严格按照试剂盒说明进行检测, 采用二甲苯对切片进行3次脱蜡, 并采用梯度乙醇进行水化, PBS3次洗涤后30 min 3 mol/L尿素消化。PBS再度洗涤3次后加入甲醇-过氧化氢30 min, 之后加入柠檬酸钠液5～8 min修复抗原。之后滴加A液并予以15 min室温封闭, 分别滴加第一抗体AMHR-Ⅰ及AMHR-Ⅱ, 冰箱过夜再次PBS洗涤后滴加B液, 50 min孵育后PBS洗涤。滴加试剂C并于37℃下30 min孵育, PBS洗涤后采用DAB进行显色, 苏木素复染, 脱水透明后封片。另作阴性对照组, 对照组第一抗体取代PBS。

检测后采用相关标准对免疫组化结果进行判定, 胞浆无显色为阴性, 胞浆中出现淡黄色颗粒为阳性, 胞浆中出现棕黄色颗粒为强阳性, 根据显色深浅及显色细胞比例判定为阳性或强阳性。

1.3统计学方法 所得结果数据采用SPSS18.0统计学软件处理。计数资料采用χ2检验。以 P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1资料中所有患者子宫内膜样腺癌组织中均检测到AMH以及AMHR-Ⅱ的阳性表达, 阴性组均为阴性。高分化组(Ⅰ级)患者中分别有14例表现为AMH阳性, 13例表现为AMHR-Ⅱ阳性, AMH阳性率及AMHR-Ⅱ阳性率分别为93.7%和86.7%。中分化腺癌(Ⅱ级)AMH阳性率则为76.7%, 阳AMHR-Ⅱ性率为73.3%, 远低于高分化组患者,差异有统计学意义(P＜0.05)。低分化组患者AMH阳性率和AMHR-Ⅱ阳性率则分别为26.7%和20.0%, 低于中分化组患者, 差异有统计意义(P＜0.05)。可见AMH和AMHR-Ⅱ表达率随着病理分化程度的升高而增高。

2.2AMH和AMHR-Ⅱ在自宫内膜样腺癌中的表达与临床病理特征的关系 AMH和AMHR-Ⅱ在子宫内膜样腺癌中的表达阳性率与年龄、临床分期等因素无关(P＞0.05), 但与子宫内膜样腺癌病理分级、肌层浸润、淋巴结转移密切相关(P＜0.05)。见表1。

表1 AMH和AMHR-Ⅱ表达与子宫内膜样腺癌临床病理特征的关系［n(%)］

3 讨论

抗苗勒管激素, 即AMH是转化生长因子超家族的一种,在一定程度上可调控细胞的生长发育, 研究发现颗粒细胞肿瘤患者AMH表达水平随着肿瘤的发生而升高, 随着肿瘤切除而降低, 且早于症状的发生, 因而部分研究和临床中将AMH作为颗粒细胞瘤敏感性指标之一［3］。研究显示, AMH通过与其受体AMHR-Ⅱ的结合在体外试验中看能有效抑制颗粒细胞肿瘤的增长, 还与其他肿瘤尤其是女性生殖系统肿瘤密切相关。

本文中, 为探讨AMH对子宫内膜样腺癌发生机理的影响, 采用免疫组化法对不同病理分级的患者该两种因子与腺癌组织中的表达情况进行检测, 检测结果显示, 该两种因子的表达水平随着病例分化程度的升高呈现上升趋势, 高分化程度患者的AMH和AMHR-Ⅱ阳性率明显高于中低分化程度的患者, 可见差异有统计学意义(P＜0.05)。说明AMH在子宫内膜癌进展过程中起到重要作用, 由于AMH的抗增殖作用, 随着病理分化程度的降低, AMH表达量也呈现下降趋势［4］。一般认为其作用途径在于与受体结合后起到了细胞的凋亡基因, 或认为其竞争性减少了EGF, 抑制了其细胞膜蛋白质磷酸化作用而抑制增殖。

综上所述, 子宫内膜样腺癌患者组织中均见AMH表达,说明该因子及其受体与子宫内膜癌发生发展有密切关系, 但具体作用机理和途径仍需进一步研究。

［1］ 余慧敏, 刘彦.抗苗勒管激素在女性生殖领域的研究进展.中国计划生育学杂志, 2009, 17(12):759-761.

［2］ 胡蓉, 田春花, 田进石, 等.抗苗勒管激素及其2型受体基因多态性在多囊卵巢综合征患者表达的研究.实用妇产科杂志, 2012, 28(9):739-742.

［3］ 贺淑芳, 万小云, 谢幸.微管相关蛋自LC3 和组织蛋白酶D 在子宫内膜样腺癌中的表达及意义.现代妇产科进展, 2007, 16(2): 100-102.

［4］ 李键, 闫丽盈, 唐荣欣, 等.抗苗勒氏管激素及其Ⅱ型受体的基因多态性与多囊卵巢综合征发病的关系.中国妇产科临床杂志, 2008, 9(3):206-210.

2014-06-20］

215600 江苏省张家港市第一人民医院病理科