纳洛酮对右美托咪定麻醉小鼠催醒作用的研究

李 翠 余剑波 周 汾 陈慧荣 王 曼 宫丽荣 穆 蕊 董树安

纳洛酮对右美托咪定麻醉小鼠催醒作用的研究

李 翠 余剑波△周 汾 陈慧荣 王 曼 宫丽荣 穆 蕊 董树安

目的 探讨纳洛酮对右美托咪定麻醉小鼠有无催醒作用及其作用机制。方法30只清洁级昆明种小鼠随机分成纳洛酮组（NAL组）、阿替美唑组（ATI组）和生理盐水组（NS组）3组(n=10)。各组小鼠均腹腔注射右美托咪定1 mg/kg，给药后90 min，各组分别腹腔注射纳洛酮2 mg/kg、阿替美唑2 mg/kg与生理盐水10 mL/kg，于右美托咪定给药前及给药后5、15、30、60、90、95、105、120、180 min评估镇静、镇痛水平，并观察小鼠苏醒时间（以翻正反射恢复为标准）。结果各组在右美托咪定给药5 min后即表现明显的镇静、镇痛效应，约在60 min时达到峰效应和在180 min恢复；阿替美唑和纳洛酮均可降低右美托咪定的镇静、镇痛效应。NAL组在给药后95、105、120、180 min镇静评分均低于NS组，在95、105、120 min镇静评分均高于ATI组；NAL组在给药后95、105、120 min镇痛评分均低于NS组(均P＜0.05)，与ATI组差异均无统计学意义。ATI组、NAL组小鼠的苏醒时间短于NS组[min：(3.0±1.9)vs(5.0± 2.5)vs(91.0±5.7)；F=1 793.368，P＜0.05]，NAL组与ATI组差异无统计学意义。结论纳洛酮对右美托咪定麻醉小鼠具有一定的催醒作用。

麻醉；纳洛酮；右美托咪啶；镇痛；阿替美唑；催醒作用；苏醒时间

右美托咪定是一种新型的高选择性α2-肾上腺素能受体激动剂，可以产生剂量依赖性的镇静、镇痛和抗焦虑作用，还可改善手术期间的心血管稳定性和提供器官保护作用[1]，在诸多领域的临床实践中显示出优越性和应用价值，但应用右美托咪定长时间镇静及全麻术后患者的意识恢复时间较长。任何一种麻醉药的应用都需要寻找到一种有效的拮抗药来作为安全保障，阿替美唑是一种具有高度选择性的α2-肾上腺素能受体拮抗剂，但其尚未应用于临床，需要更多的临床安全性研究。纳洛酮是一种安全而有效的全麻催醒药，是阿片受体竞争性拮抗剂，有文献表明纳洛酮对安定、氯胺酮等有一定拮抗作用[2]，但有关其对右美托咪定有无拮抗作用的研究较少，本研究旨在观察纳洛酮对右美托咪定麻醉小鼠有无催醒作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组 清洁级昆明种小鼠30只，雌雄各半，体质量（20±2）g，由军事医学科学院实验动物中心提供，采用随机数字表法分成生理盐水组（NS组）、阿替美唑组（ATI组）和纳洛酮组（NAL组）3组，每组10只。

1.2 实验药品 纳洛酮由重庆莱美药业股份有限公司生产（批号：1007012）；右美托咪定由江苏恒瑞医药股份有限公司生产（批号：11031034）；阿替美唑由南京博鸿电子材料开发有限公司生产（批号：104054-27-5）；生理盐水由广东大冢制药有限公司生产（批号：1110243）。

1.3 实验方法 通过动物面罩吸入纯氧，小鼠腹腔注射右美托咪定1 mg/kg[3]，在右美托咪定给药后90 min各组再分别腹腔注射生理盐水10 mL/kg、阿替美唑2 mg/kg[3]和纳洛酮2 mg/kg[4]，动态观察小鼠的行为学表现，于右美托咪定给药前（基础值）、给药后5、15、30、60、90、95、105、120和180 min时分别进行镇静、镇痛评分。评分标准参照Granholm等[5]并作适当调整，镇静评分包括自主体位、对声音刺激的反应、下颌及舌张力3个方面，标准如下，自主体位：不能站立计4分；躺下，站立困难，计3分；躺下，能够困倦站立，计1分；正常，计0分。对声音刺激的反应（敲打不锈钢手术台面）：对声响刺激无反应，计3分；表现耳动、睁眼，计2分；表现耳动、睁眼、肢体瞬间抽动，计l分；有抬头挣扎表现，计0分。下颌及舌张力：牵拉舌，可轻易拉出口腔，且不能自主复位，计3分；牵拉舌，可拉出口腔，但能自主复位计2分；牵拉舌时有明显阻力，计1分；牵拉时逃避并摇头，计0分。镇痛评分：钳夹鼠爪，痛觉完全消失，计3分；痛觉明显降低，计2分；痛觉轻度障碍，计1分；痛觉明显与给药前相同，计0分。

观察小鼠翻正反射消失持续时间（苏醒时间）。小鼠连续3次仰卧后5 s不能恢复站立为翻正反射消失，连续3次仰卧后恢复站立为翻正反射恢复。

2 结果

2.1 纳洛酮对右美托咪定麻醉小鼠镇静评分的影响 右美托咪定给药5 min后各组镇静评分较给药前均明显增加(P＜0.05)，且在给药后大约60 min各组达到最大镇静效应。给药后90 min各组小鼠分别给予生理盐水、阿替美唑及纳洛酮腹腔注射，在给药后120、180 min ATI组镇静评分与给药前基础值差异无统计学意义，在180 min NAL组镇静评分与给药前基础值差异无统计学意义。NAL组在给药后95、105、120、180 min镇静评分均低于NS组，在95、105、120 min镇静评分均高于ATI组(均P＜0.05)。见表1。

2.2 纳洛酮对右美托咪定麻醉小鼠镇痛评分的影响 右美托咪定给药5 min后各组镇痛评分较给药前均明显增加(P＜0.05)，且在给药后大约60 min各组达到最大镇痛效应，给药后90 min各组小鼠分别给予生理盐水、阿替美唑及纳洛酮腹腔注射，在给药后180 min NS组镇痛评分与给药前基础值差异无统计学意义，在105、120、180 min ATI组和NAL组镇痛评分与给药前基础值差异均无统计学意义。NAL组在给药后95、105、120 min镇痛评分均低于NS组(P＜0.05)，与ATI组差异均无统计学意义。见表2。

2.3 纳洛酮对右美托咪定麻醉小鼠苏醒时间的影响 纳洛酮、阿替美唑均能明显缩短右美托咪定麻醉小鼠的苏醒时间[分别是（5.0±2.5）、（3.0±1.9）min]，且与NS组（min:91.0±5.7）比较差异均有统计学意义(F=1 793.368,P＜0.05)，NAL组与ATI组差异无统计学意义。

Tab.1 Sedative scores of mice in each group表1 各组镇静评分的变化 （n=10，分，±s）

Tab.1 Sedative scores of mice in each group表1 各组镇静评分的变化 （n=10，分，±s）

＊P＜0.05；a与基础值比较，P＜0.05；表2同

组别NS组(1) ATI组(2) NAL组(3) F基础值5 min 5.0±1.0a4.6±0.7a4.7±0.5a0.709 15 min 7.6±0.7a7.3±0.5a7.2±0.4a1.444 30 min 7.5±0.7a7.6±0.5a8.0±0.8a1.465 60 min 8.2±0.4a8.0±0.5a8.3±0.5a1.105 90 min 8.1±0.7a7.6±0.5a7.7±0.5a2.011 F 149.969＊415.622＊419.694＊P(1)∶(3) P(2)∶(3) 000-------------95 min 7.7±0.8a2.5±0.5a4.5±0.5a175.810＊＜0.001 ＜0.001 105 min 6.1±0.6a1.3±0.5a2.3±0.5a243.887＊＜0.001 ＜0.001 120 min 5.0±0.7a0.6±0.5 1.4±0.5a168.545＊＜0.001 0.012 180 min 2.9±1.0a0.5±0.7 0.5±0.5 32.604＊＜0.001 1.000

Tab.2 Analgesic scores of mice in each group表2 各组镇痛评分的变化 （n=10，分，±s）

Tab.2 Analgesic scores of mice in each group表2 各组镇痛评分的变化 （n=10，分，±s）

组别NS组(1) ATI组(2) NAL组(3) F基础值5 min 1.2±0.4a1.2±0.4a1.5±0.5a1.421 15 min 1.8±0.4a1.9±0.6a2.0±0.5a0.415 30 min 2.1±0.3a2.1±0.6a2.1±0.3a＜0.001 60 min 2.5±0.5a2.5±0.5a2.5±0.5a＜0.001 90 min 2.5±0.5a2.3±0.5a2.3±0.5a0.537 180 min 0.6±0.5 0.2±0.6 0.1±0.3 2.739 F 30.723＊33.060＊52.105＊P(1)∶(3) P(2)∶(3) 000-------------95 min 2.4±0.5a0.8±0.6a0.9±0.3a31.435＊＜0.001 1.000 105 min 2.0±0.7a0.5±0.5 0.3±0.5 27.105＊＜0.001 1.000 120 min 1.5±0.5a0.3±0.5 0.3±0.5 19.343＊＜0.001 1.000 --

3 讨论

本研究中动物在注射右美托咪定后约60 min镇静、镇痛达到峰效应，约180 min自然恢复，选择在注射右美托咪定后90 min时给药便于观察，本研究观察右美托咪定镇静和镇痛的强度和作用时间与前期研究一致[5]。右美托咪定是一种高选择性α2-肾上腺素能受体激动剂，通过激动α2-肾上腺素能受体而产生镇静、抗焦虑和镇痛等效应，而阿替美唑是一种具有高度选择性的α2-肾上腺素能拮抗剂，可用来拮抗由α2-肾上腺素能激动剂所产生的镇静、催眠、镇痛及其他作用。Granholm等[5]研究表明阿替美唑可有效拮抗右美托咪定的作用，本实验结果也表明阿替美唑在给药后可明显降低镇静、镇痛水平并显著缩短苏醒时间，提示其对用右美托咪定麻醉小鼠有明显的催醒作用。

本研究结果显示，纳洛酮可降低右美托咪定麻醉小鼠的镇静、镇痛评分，且明显缩短小鼠的苏醒时间，提示纳洛酮对右美托咪定麻醉小鼠具有一定的催醒作用。纳洛酮虽然也可缩短翻正反射消失持续时间，但其并非α2受体的特异拮抗药。有研究表明使用右美托咪定患者血浆β-内啡肽在早期具有一定增高反应，右美托咪定发挥作用可能通过促进阿片肽的释放而间接与阿片受体相关[6]。纳洛酮是阿片受体竞争性拮抗剂，可有效地拮抗阿片样物质和内源性阿片肽，能迅速通过血脑屏障，拮抗内啡肽所介导的中枢抑制作用，促进苏醒。另有研究表明右美托咪定与吗啡合用可产生协同作用，从而减少吗啡的使用量[7]，Riedl等[8]研究认为，α2受体和阿片受体在伤害性感觉初级传入神经纤维上存在共表达区域，这两种受体在皮肤外周神经末稍和脊髓背角浅层均有广泛共区，且与P物质所在区域相同。虽作用于不同的受体，纳洛酮对右美托咪定的催醒作用，可能与α2受体和阿片受体激活之后的某种共同的生理、生化机制相关。另一方面，右美托咪定作用于中枢神经系统突触后膜α2受体，活化抑制交感神经活性,避免交感神经的过度兴奋[9-10]，而使用纳洛酮后痛觉敏感增加而产生交感神经兴奋现象。

综上所述，纳洛酮对右美托咪定麻醉小鼠具有一定的催醒作用，纳洛酮可尝试用于临床拮抗右美托咪定，其作用机制有待进一步研究。

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（2014-05-01收稿 2014-07-18修回）

（本文编辑 陈丽洁）

Awaken Effect of Naloxon in Dexmedetomidine-Anesthetized Mice

LI Cui,YU Jianbo△,ZHOU Fen,CHEN Huirong,WANG Man,GONG Lirong,MU Rui,DONG Shuan
Deportment of Anesthesiology，Tianjin Nankai Hospital，Tianjin 300100，China
△

E-mail：yujianbo11@126.com

ObjectiveTo investigate the awaken effect of naloxon on dexmedetomidine anesthetized mice and its mechanism.MethodsThirty Kunming mice of clean grade were randomly divided into 3 groups which included NAL group(Naloxon group),ATI group（Atipamezole group）and NS group(Normal Saline group).All groups were given dexmedetomidine 1 mg·kg-1intraperitoneally.Naloxon 2 mg·kg-1,atipamezole 2 mg·kg-1and normal saline 10 mL·kg-1were randomly given intraperitoneally to the NAL,ATI and NS group respectively 90 minutes after dexmedetomidine administration. At timepoints prior to dexmedetomidine administration and 5,15,30,60,90,95,105,120,180 minutes after it,the sedative and analgesic effects besides recovery time(based on restore of righting reflex loss)were assessed.ResultsSedation and analgesia effects became apparent within 5 minutes,and peaked at approximately 60 minutes then spontaneously recovered at 180 minutes after injection of dexmedetomidine.The sedative and analgesic effects were reduced in both ATI and NAL groups.Compared with ATI group,the sedation scores were higher at 95,105 and 120 minutes after dexmedetomidine administration than those in NAL group(P＜0.05)but the scores were not statistically significant at 180 minutes between these two groups.Compared with NS group,the sedation scores were lower at time points of 95,105,120 and 180 minutes than those in NAL group(P＞0.05).The analgesic scores were not statistically significant at time points of 95,105,120 and 180 minutes between NAL group and ATI group,but they were lower in NAL group compared with NS group at timepoints of 95,105 and 120 minutes(P＞0.05).The recovery time in ATI and NAL group were shorter than that in NS group(F=1 793.368,P＜0.05),but it showed no statistical difference between ATI group and NAL group(P＞0.05).ConclusionNaloxone had a certain awaken effect on dexmedetomidine anesthetized mice.

anesthesia;naloxone;dexmedetomidine;analgesia;atipamezole;awaken effect;recovery time

R614.2

A

10.3969/j.issn.0253-9896.2014.12.009

天津医学会麻醉学分会中青年科研培育基金项目

天津市南开医院麻醉科（邮编300100）

△通讯作者 E-mail：yujianbo11@126.com