鄂产蜂胶的抗氧化效能研究※

何佳丽 周 威 程清洲 瞿永华

鄂产蜂胶的抗氧化效能研究※

何佳丽 周 威 程清洲 瞿永华

目的通过测定小鼠血液中抗氧化酶含量来研究蜂胶（PROPOLIS）的抗氧化效能。方法采用D-半乳糖制作的衰老模型，将小鼠随机分为对照组、模型组、药物低、中、高剂量组。连续给药灌胃30d后，检测抗氧化酶相关指标。结果各剂量组能提高小鼠血液中SOD、GSH-PX的活性，并能降低MDA的含量。结论蜂胶（PROPOLIS）具有较好的消除自由基、抗氧化的作用。

蜂胶；D-半乳糖；抗氧化；血液

研究表明，香菇、人参等很多中草药可以直接清除自由基，降低丙二醛（MDA）含量，提高谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）等抗氧化酶的活性，发挥抗氧化作用[1-2]。自由基与多种疾病的发病与转归有关，因此，在营养学、中医药学领域内研究天然抗氧化物质是一大热点。蜂胶是蜜蜂在修补蜂巢时分泌的粘性物质，颜色通常为黑褐色或黄褐色，具有保护胃黏膜、抗氧化、免疫调节、调节血脂、血糖等功能[3]。其药理活性及各种产品研发也是蜂胶研究的重点。此项研究中采用小鼠衰老动物模型，研究鄂产蜂胶提取物（Propolis extraction）对小鼠血液中SOD、GSH-Px的活性及MDA含量的测定，来研究蜂胶提取物的延缓衰老和抗氧化等作用。

1 材料与方法

1.1 材料 D-半乳糖（贵州同济堂制药有限公司，批号：0009743822）；SOD试剂盒、MDA试剂盒、GSH-Px试剂盒、（广州白云山陈李剂药厂有限公司，批号130730-2，130812-7，130926-3）；测定参照南京建成生物工程公司GSH-Px、MDA、SOD试剂盒说明书方法测定。WFZ-UV2000紫外可见分光光度计（浙江泰康仪器有限公司，AA20130402）。

1.2 蜂胶药物组的准备 实验用蜂胶购自神农架玉泉绿色产品有限公司，由武汉市小蜜蜂有限公司提供。采用醇法提取蜂胶提取物[4]，灌胃前配制成大鼠的小30mg/kg、中60mg/kg、高90mg/kg剂量浓度，加吐温-80℃助溶，4℃低温保存，备用。每日分两次，每次 0.5ml，按给药剂量进行灌胃。模型组和对照组用相应体积的生理盐水灌胃。

1.3 实验动物分组和处理 将昆明种系实验小白鼠，雌雄各半，共60只，体质量18～20g，随机分为五组，每组12只，雌雄各半，分笼饲喂。每日一次，颈背部皮下注射120mg·kg-1，D-半乳糖灭菌溶液，连续30天，进行小鼠衰老动物模型的制作[5]。第Ⅰ组为对照组：生理盐水两次灌胃，每次0.5ml；第Ⅱ组为模型组：按上述动物模型制作方案制作，同时生理盐水灌胃两次，每次 0.5ml；第Ⅲ组、第Ⅳ组、第Ⅴ组：颈背部皮下注射D-半乳糖120mg·kg-1体重，按上述小、中、高剂量分两次灌胃，每次0.5ml。实验动物全部都使用全价混合饲料喂养，自由摄食和取水，持续30天后，拔眼球采血（每管加0.2ml肝素钠注射液抗凝），分别测定血液中MDA的含量和SOD及GSH-Px的活性。

1.4 统计学分析 用SPSS软件13.0版进行统计分析和数据处理。

2 结果

将SOD、GSH-Px及MDA的实验数据结果汇总，列表（表1）。表1数据中，模型组较对照组SOD、GSH-Px明显降低及MDA含量升高（P＜0.05），说明此衰老模型组制作成功并可作为此次实验所用。药物组中的低、中、高各剂量组GSH-Px、SOD活性均有升高和MDA含量的降低，达到中等剂量即为明显（P＜0.05，或P＜0.01）。蜂胶的用量达到60mg/kg时即可有效发挥作用，具有降低MDA含量和升高小鼠血液GSH-Px、SOD活性的作用。

3 讨论

D-半乳糖所致小鼠衰老模型稳定可靠，在抗衰老研究中被广泛应用[5]。此次实验复制的D-半乳糖小鼠衰老模型，经过检测具备衰老模型组使用条件。正常细胞内存在有自由基的清除系统，机体内常见SOD、GSH-Px、CAT和MDA等可作为氧自由基生成量的指标，反应机体通过酶系统与非酶系统引发产生脂质过氧化作用，以及其产物引起的蛋白质分子内与分子间形成交联，发生裂解、加成、去氢等众多反应，从而引起DNA的双螺旋交联出现错误或者没有办法进行分裂，进而导致一些酶的活性发生变化，最后直接影响到细胞代谢的机理[6]。蜂胶能显著降低MDA的含量和提高GSH-Px、SOD的活性，是一种很强的天然抗氧化剂，服用蜂胶不仅可以减少自由基对细胞的损害，还可防治多种并发症。本实验中，蜂胶提取物具有的升高血液SOD、GSH-Px活性及降低MDA含量作用，从一个侧面证实了蜂胶具有免疫调节、抗氧化、抗肿瘤、抗炎、抗病毒、抑菌、护肝等多种生物学活性[7-8]，为鄂产蜂胶的医疗应用和多功能产品开发奠定了一定的基础。

表1 蜂胶提取物对小鼠血液SOD、GSH-Px活性及MDA含量的影响[(±s),n=12]

表1 蜂胶提取物对小鼠血液SOD、GSH-Px活性及MDA含量的影响[(±s),n=12]

注：与模型组比较；aP＜0.05，bP＜0.01

组别 SOD(U/ml) GSH-Px(U/ml) MDA(nmol/ml)对照组 169.41±17.96a 230.81±22.46a 9.86±2.80a模型组 119.86±22.84 218.65±18.42 11.44±1.90低剂量组 128.94±14.34 233.08±27.12a 9.45±3.08a中剂量组 162.40±18.43b 318.46±18.40a 8.66±1.94b高剂量组 145.16±16.95a 286.54±22.18b 9.75±3.35a

[1] 黄娅琳.抗衰老中药的研究[J].时珍国医国药,2007,18(3):691-693.

[2] 林桂兰,许学书,连文思.食用菇多糖提取物体外抗氧化性能研究[J].华东理工大学学报(自然科学版),2006,32(3):278-281.

[3] 郦金龙,赵文婷,王盼,等.蜂胶的研究应用进展[J].中国食物与营养,2011,17(6):20-24.

[4] 周威,瞿永华,程清洲,等.鄂产蜂胶醇法提取及主要成份测定[J].中国保健营养,2012,22(13):62-63.

[5] 刘洋,程清洲,彭超华,等.D-半乳糖致小鼠衰老模型的制作及效果评价[J].武汉工业学院学报,2009,28(1):32-33.

[6] 李英华,潘善余,郑火青.蜂胶体外抗氧化活性研究进展[J].蜜蜂杂志,2011,3:5-6.

[7] 刘晓琳,缪晓青.蜂胶提取技术与应用研究进展[J].中国蜂业,2010,61(10):34-37.

[8] 范远景,黄璐.番茄红素吸收与体内抗氧化的机理研究[J].食品科学,2007,28(11):545-548.

[9] 李国莉,杨建军,任彬彬,等.大豆异黄酮抗氧化效能的研究[J].食品科学,2005,26(10):211-213.

R285.5

A

1673-5846(2014)02-0204-02

武汉轻工大学医学技术与护理学院，湖北武汉 430023

武汉市科技攻关项目（编号：201220822276）；武汉轻工大学大学生科研项目（编号：xsky054）

瞿永华，E-mail：26194257 @qq.com。