测定注射用头孢哌酮钠中头孢哌酮含量的高效液相色谱法

柯红玲

摘要：

目的：对高效液相色谱法测定注射用头孢哌酮钠中头孢哌酮含量的结果进行分析探讨，为今后的药学研究工作提供可靠的参考依据。方法： 选用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂，流动相为水：乙腈：1N醋酸：三乙胺冰醋酸溶液（876：120：2.8：1.2），检测波长为254nm，进样量为10ul。结果： 线性关系考察结果显示，头孢哌酮的浓度在80-320ug/ml的范围内线性关系良好，r=0.9999；加样回收实验证实平均回收率为99.87%；RSD值为0.05%。结论： 经高效液相色谱法对注射用头孢哌酮钠中头孢哌酮含量进行测定的方法准确可靠，具有较强的专属性，在注射液质控中可发挥重要作用。

关键词：高效液相色谱法；注射用头孢哌酮钠；头孢哌酮 ；含量测定

【中图分类号】

R453 【文献标识码】B 【文章编号】1002-3763（2014）05-0071-01

目前临床上应用的注射用头孢哌酮钠属于第三代头孢菌素类抗生素，其主要作用机制为通过对细菌细胞壁合成进行机制而实现杀菌的效果。相对于第一代、第二代头孢菌素具有更强的杀菌效果，且属于光谱抗菌药物，在临床上的应用较为广泛。《中国药典》2010版中规定采取高效液相色谱法对注射用头孢哌酮钠进行质量控制^[1]。本次实验中采取高效液相色谱法对主要用头孢哌酮钠中的头孢哌酮含量进行了测定，现汇报结果如下。

1 实验仪器与材料

1.1 实验仪器：

所用仪器为我实验室现有的安捷伦高效液相色谱仪，以及相配套的高压输送泵、紫外检测器以及色谱工作站。实验中还会用到电子天平。

1.2 实验材料：

所用试剂包括：注射用头孢哌酮钠，头孢哌酮钠对照品，乙腈、1N醋酸、三乙胺冰醋酸均为色谱纯，实验用水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件：

所用色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶填充柱，流动相为水：乙腈：1N醋酸：三乙胺冰醋酸溶液（876：120：2.8：1.2），流速为2.0ml/min，检测波长为254nm，进样量为10ul，柱温为40℃。

2.2 溶液制备

2.2.1 对照品溶液制备：

精称16mg头孢哌酮对照品，放置在100ml的容量瓶中，经流动相溶解并定容至刻度，摇匀备用。

2.2.2 供试品溶液制备：

取注射用头孢哌酮钠10支，将其混匀后精密称取1034mg，放置在1000ml的容量瓶中，经水溶解后定容至刻度，精密量取该溶液16ml，在100ml的容量瓶中经流动相溶解并定容至刻度，摇匀后备用。

2.3 系统适用性实验

2.3.1 精密度实验：

取2.2.1配制的对照品10ul，连续6次进样检测，记录色谱图，计算头孢哌酮主峰面积的RSD值，结果得RSD值为0.052%，精密度良好。

2.3.2 线性关系考察：

精称32.15mg的对照品，经流动相溶解后定容至100ml容量瓶中，摇匀后，精取2.5、3.75、5、7.5、10ml，放置在10ml的容量瓶中，经流动相稀释定容，而后分别取10ul进样检测，记录色谱图，以样品浓度作为横坐标，峰面积作为纵坐标做回归方程，本次实验中，头孢哌酮浓度在80-320ug/ml的范围内线性关系良好，回归方程为：Y=6.938X×10-5+1.441×10-4，r=0.9999。

2.3.3 加样回收实验：

在已知浓度的样品中加入一定量的头孢哌酮对照品，在2.1所示色谱条件下进样检测，计算回收率。本次加样回收实验中，头孢哌酮的平均回收率為99.87%，RSD值为0.05%。

2.4 不同批次样品测定：

取3个批次的注射用头孢哌酮钠各10支，按照2.2.2所示条件配制成供试品溶液，10ul进样检测，经计算发现，3个批次的注射用头孢哌酮钠中头孢哌酮的百分含量分别为100.9%、101.1%、100.9%，均符合标准，属于合格品。

3 讨论

目前对于药品质量控制工作而言，高效液相色谱法发挥了重要的作用，对流动相、色谱柱进行合理的选择，并严格筛选出色谱条件后，可为药品质量控制工作提供可靠的参考依据^[2]。本次实验中，出于对高效液相色谱法测定注射用头孢哌酮钠中头孢哌酮含量的结果进行分析探讨的目的，经以下色谱条件（所用色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶填充柱，流动相为水：乙腈：1N醋酸：三乙胺冰醋酸溶液（876：120：2.8：1.2），流速为2.0ml/min，检测波长为254nm，进样量为10ul，柱温为40℃）对注射用头孢哌酮钠中的头孢哌酮含量进行了测定，通过一系列的系统性实验证实，该色谱条件在测定头孢哌酮含量时具有良好的系统适用性，精密度良好，回收率高，且在一定浓度范围内线性关系较为理想^[3]。样品测定结果显示，头孢哌酮含量较高，符合标准，均为合格品^[4]。

综上所述，上述高效液相色谱条件适合对注射用头孢哌酮钠中头孢哌酮含量进行测定，结果准确可靠，对于注射液质量控制工作而言意义重大，值得关注。

参考文献

[1] 李毅，柳世萍.HPLC测定注射用头孢哌酮钠、舒巴坦钠的含量[J].河北化工，2011，12（10）：342-344.

[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：二部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：121.

[3] 梅群，李应芬，谢桂芬，等.HPLC法测定注射用头孢哌酮钠有关物质的改进[J].中国药师，2008，13（08）：672-674.

[4] 黄莉，万江陵.HPLC法测定注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠中两组分的含量和有关物质[J].化学与生物工程，2011，14（01）：786-787.