加减补肺汤对COPD“肺气虚证”大鼠免疫功能、血液流变学的影响

李 逊

(遵义医学院第一附属医院中医科，贵州 遵义 563003)

中医认为，慢性阻塞性肺疾病(Chronic Obstructive Pulmonary Disease，COPD)的发生由慢性咳嗽、喘发展而来，COPD患者多体弱年迈、肺脾肾虚、痰瘀阻肺、气道壅塞[1～3]。加减补肺汤是在补肺汤基础上进行增减，针对肺脾肾三脏，通过补益肺脾肾、祛瘀涤痰治疗COPD，具有安全性高和疗效可靠的优点。为进一步探讨加减补肺汤对COPD的作用机制，我们观察其对COPD肺气虚证大鼠的免疫功能和血流变的影响，现将结果汇报如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物

健康清洁级Wistar大鼠100只，体质量(250±20) g，雌雄各半，由贵阳中医学院动物所提供(合格证号524426，饲养室温20～25℃)。

1.2 药物

加减补肺汤：黄芪20 g，党参10 g，补骨脂15 g，百部10 g，桑白皮10 g，丹参15 g。制法：所有药物加水浸泡2 h，首煎煮沸30 min，次煎20 min，两煎合一纱布过滤，装入烧杯置40℃的恒温水浴箱，浓缩至含生药2 g/mL，4℃冰箱保存。加减补肺汤由贵阳中医学院一附院药剂科提供，使用前加热至常温。桂龙咳喘宁胶囊(0.3 g/粒，批号20030221，山西桂龙药业有限公司生产，国药准字Z20053135)用蒸馏水制成0.09 g/mL混悬液灌胃给药。

1.3 主要仪器和试剂

超声雾化器，德国白瑞公司生产，自制1 m3烟室，自制透明雾化箱40 cm×40 cm×40 cm；木瓜蛋白醇(使用时采用0.9%NaCl注射液稀释为3 g/L)，Sigma公司提供，恒温水浴箱，低速冷冻离心机。

2 实验步骤

2.1 模型的制备

采用《实用中医证候动物模型学》“烟熏法肺气虚证动物模型”方法[1]联合木瓜蛋白酶雾化吸入法[2]制备Wistar大鼠COPD“肺气虚证”模型：将大鼠置于特制的1 m3烟室中，用刨花、锯末、烟叶各30～50 g点燃烟熏30 min/次，每日2次，适当通风以防大鼠窒息。造模期60 d，于造模开始后30、32、34、36 d再给大鼠木瓜蛋白酶雾化吸入，每次将5只大鼠放入与超声波雾化器相连的透明雾化箱中，通过雾化管向箱中喷入3 g/L的木瓜蛋白酶，每次雾化量2 mL。

2.2 分组和给药

将Wistar大鼠按体质量随机分为5组，每组20只，雌雄各半。①正常对照组0.9%氯化钠注射液1 mL/100 g；②模型组给药同①组；③加减补肺汤高剂量组1 mL/100 g；④加减补肺汤组低剂量组0.5 mL/100 g；⑤桂龙咳喘宁组1.25 mL/100 g。上述5组均于停止烟熏当天开始灌胃给药，每日1次，连续15 d。

2.3 指标检测

灌药结束后2 d断头取血取脏器，并计算脏器指数。

2.4 统计学方法

应用SPSS 11.5 统计软件进行统计分析，计量资料采用均数±标准差(±s)表示，各组组间比较采用单因素方差分析及SNK检验，P<0.05 为差异有统计学意义。

3 结果

3.1 加减补肺汤对COPD“肺气虚证”大鼠脏器系数的影响

与正常对照组比较，模型组胸腺、脾脏和肝脏系数显著降低(P<0.05)，提示模型制作成功；与模型组比较，加减补肺汤和桂龙咳喘宁可显著增加脾脏和肝脏系数(P<0.05)，加减补肺汤高剂量组可增加胸腺系数(P<0.05)。

表1 加减补肺汤对COPD“肺气虚证”大鼠脏器系数影响

注：组间方差分析，模型组与正常对照组比较：*P<0.05，与模型组比较：#P<0.05

3.2 加减补肺汤对COPD“肺气虚证”大鼠T淋巴细胞亚群的影响

与正常对照组比较，模型组CD4+、CD8+和D4+/CD8+显著降低(P<0.05)；与模型组比较，加减补肺汤均可增加CD4+、CD8+和D4+/CD8+(P<0.05)，桂龙咳喘宁可以增加CD4+和CD8+(P<0.05)。

3.3 加减补肺汤对COPD“肺气虚证”大鼠血液流变学的影响

表3显示，与正常对照组比较，模型组的全血黏度、血浆黏度和红细胞压积显著降低；与模型组比较，加减补肺汤和桂龙咳喘宁可显著降低COPD“肺气虚证”大鼠红细胞压积，加减补肺汤可显著降低COPD“肺气虚证”大鼠全血黏度，加减补肺汤高剂量可降低COPD“肺气虚证”大鼠血浆黏度。

表2 加减补肺汤对COPD“肺气虚证”大鼠T淋巴细胞亚群的影响

注：组间方差分析，模型组与正常对照组比较：*P<0.05，与模型组比较：#P<0.05

表3 加减补肺汤对COPD“肺气虚证”大鼠血液流变学影响

注：组间方差分析，模型组与正常对照组比较：*P<0.05，与模型组比较：#P<0.05

4 讨论

补肺汤来源于《云岐子保命集》，是补益肺气的经典方，原方由人参、黄芪、熟地黄、五味子、紫菀、桑白皮组成，具有补肺益肾、清火化痰功效。方中人参合用黄芪实卫固表，甘温益气，补脾益肺；熟地质润，

滋补肝肾之阴；五味子敛肺止咳；紫菀温化痰饮，降气止咳；桑白皮泻肺平喘，利水消肿。加减补肺汤是在原方基础上，减去酸甘滋腻之熟地和五味子，以党参替换温燥的人参，以祛痰止咳的百部易紫菀，纳入补气生阳、益卫固表的黄芪，补肾助阳的补骨脂和活血化瘀的丹参。诸药同用，温肾助阳以化痰饮，摄纳肾气以平喘咳，先后天同补，共奏益气补虚、扶正固本之功，具有减轻临床症状、延缓肺动脉高压的形成、阻止疾病进一步发展的作用[2～4]。

本课题中，COPD“肺气虚证”大鼠出现精神不振、体毛无光泽、生长迟缓、身体消瘦、蜷缩少动，舌质瘀斑紫黯或舌苔少，捕捉时抵抗力明显减弱，造模1 d出现明显咳嗽，逐渐转为慢性咳嗽，且口鼻潮湿，呼吸道分泌物增多。给予加减补肺汤后，症状明显改善，大鼠体质量增加，其毛色、毛态、精神状态、舌质瘀斑和捕捉时抵抗力等均有改善，气喘、咳嗽症状不同程度减轻，口鼻分泌物减少。

胸腺是重要的中枢免疫器官，T 细胞发育成熟的场所。COPD“肺气虚证”大鼠胸腺系数降低，提示胸腺等免疫器官受损，T淋巴细胞亚群表达降低，机体的免疫功能减弱；另外血液流变是评估机体微循环的重要指标，与正常组比较，COPD“肺气虚证”大鼠全血黏度、血浆黏度和红细胞压积增高，提示COPD存在红细胞聚集和变形异常。给予COPD“肺气虚证”大鼠加减补肺汤后，大鼠的T淋巴细胞亚群表达增高，全血黏度、血浆黏度和红细胞压积降低，说明加减补肺汤具有增加COPD大鼠免疫功能、降低血黏度的作用，与处方中多种中药的药理密切相关。丹参具有扩张小动脉，增加毛细血管网开放数目和微循环张力，解除微血管痉挛，降低肺动脉压，改善微循环、肺顺应性及肺心病患者的肺血流图，制约红细胞与血小板聚集，降低血液黏稠度，改善血液流变的作用[5]；党参具有抗氧化、抗应激、清除自由基和调节免疫功能多种作用[6]；黄芪可以明显调节COPD 的炎症反应，增强机体抗感染能力，促进炎症吸收，降低外周血象，改善血液流变学和气道阻塞作用[7]。

大量动物和临床实验显示，加减补肺汤治疗COPD或肺相关疾病具有多方面机制：①抑制或降

低COPD肺气虚证的大鼠血清IL-8、TNF-α水平，减轻和提高血浆SOD活力,降低MDA含量，清除自由基及抗脂质过氧化作用，同时降低气管肺泡灌洗液中 TNF-α、IL-8表达，保护气道黏膜,缓解和控制气道的慢性炎症反应，减轻肺损伤[3,4,8]；②通过降低血清中 MDA 含量，上调 ECSOD mRNA 表达，提高肺纤维化大鼠生存状态，改善纤维化指标[9]；③ COPD 稳定期患者服用加减补肺汤可有效改善临床症状和肺部体征，延缓肺功能下降趋势，缓解期预防复发。综上所述，加减补肺汤治疗COPD疗效确切，增加机体免疫力和改善血液流变学指标，可能是其治疗COPD的机理之一。

参考文献：

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[4] 张葵,刘良丽,欧江琴,等.加减补肺汤对 COPD 肺气虚证模型大鼠支气管肺泡灌洗液TNF-α、IL-8 的影响[J].天津中医药,2008,25(6):491-493.

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