天灸巴布剂的质量标准研究

刘茜茜　蔡小连　朱水源

【摘要】 目的：建立天灸巴布剂的质量标准。方法：采用TLC 法鉴别方中白芥子、延胡索、细辛和甘遂。采用HPLC 法测定方中芥子碱硫氰酸盐的含量。结果：TLC结果显示与对照药材有颜色相同的斑点，且分离度好、专属性强，阴性对照无干扰。HPLC 测定芥子碱硫氰酸盐在0.008096-0.4048mg/ml有较好的线性关系，平均回收率为98.43%，RSD为1.3075%，天灸巴布剂中芥子碱硫氰酸盐的含量平均为0.5571mg/贴。结论： 所建立的质量控制方法准确、可靠、可行， 可有效控制制剂质量。

【关键词】天灸；巴布剂；质量标准；HPLC；芥子碱硫氰酸盐

【中图分类号】R286.0 【文献标识码】B【文章编号】1004-4949（2014）04-0119-01

天灸巴布剂中药配方源于清朝名医张璐所著的《张氏医通》，是治疗哮喘的经典配方。配方由白芥子、延胡索、甘遂、细辛等药味组成，临床上使用多将配方量下的中药研细粉，加以现磨生姜汁调敷[1]。为了控制天灸巴布剂的质量标准，采用薄层色谱法鉴别方中主要药味，高效液相色谱法控制主要药味药含量，为天灸巴布剂深入研究提参考。

1 仪器与试剂

JA2003型电子天平（上海良平仪器仪表有限公司），Agilent1100series液相色谱系统；四元泵G1311，柱温箱G1316A检测器G1314A，超声波清洗器（型号：KQ-300功率：300W；工作频率：40KHz；昆山市超声仪器有限公司），PL602-L型电子天平（梅特勒-托利多），CNY-1型初黏性测试仪（济南兰光机电技术有限公司），ST-1型水凝胶涂布机（温州皓丰机械有限公司），电热恒温干燥箱（广州市康恒仪器有限公司），KBS-150型数控超声波细胞粉碎机装置（昆山市超声仪器有限公司）；芥子碱硫氰酸盐对照品（中检所，批号：111702-200501）；白芥子、延胡索、细辛、甘遂药材（均购置于佛山市中药饮片厂有限公司）；磷酸二氢钾溶液试剂均为色谱纯，乙醇、甲醇、正丁醇、乙酸乙酯、丙酮、甲酸均为分析纯；双重蒸馏水乙腈。

2 方法与结果

2.1 白芥子薄层鉴

2.1.1 取本品1 片，剪碎，加甲醇50 mL，300 W超声处理45 min，滤过，滤液蒸干，加水25 mL 溶解，用水饱和的正丁醇提取2 次，每次20 mL，合并正丁醇液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1 mL 使溶解，作为供试品溶液。

2.1.2取缺芥子的阴性样品（按处方去除芥子），依2.1项下制成阴性对照溶液；另取芥子碱硫氰酸盐对照品，加甲醇制成每1mL 含1 mg 的溶液，作为对照品溶液。

2.1.3 按照照薄层色谱法试验（附录VIB）[2]，吸取上述3种溶液各5μL分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水（8：3：2：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品和对照品在色谱图相应位置上有颜色相同的斑点，而阴性对照无干扰，结果见图1。

2.1 甘遂薄层鉴定

2.2.1取本品1 片，剪碎，加乙醇50 mL，功率300 W超声处理0. 5 h，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2 mL 使溶解，作为供试品溶液。取缺甘遂的阴性样品（按处方去除甘遂），依法制成阴性对照溶液；另取甘遂对照药材1 g，加乙醇10 mL，同法制得对照药材溶液。

2.2.2照薄层色谱法试验[2]，吸取上述3 种溶液各5 μL 分别点于同一硅胶G 薄层板上，以甲苯-丙酮（10：1. 2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃加热至斑点显色清晰。供试品与对照药材在色谱图相应位置上有相同颜色的斑点而阴性对照无干扰，结果见图2。

2.2 细辛薄层鉴定

2.2.1 取本品1片，加甲醇50 mL，300W超声处理1 h，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解，乙醚萃取，挥干后，乙酸乙酯溶解为供试品溶液；取缺细辛的阴性样品（按处方去除细辛），依法制得阴性对照溶液；另取对照药材1 g，同法制得对照药材溶液。

2.2.2 照薄层色谱法（附录VIB） [2]试验，吸取上述3 种溶液10μL，分别点于同一块硅胶G 薄层板，以正己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯（16：3：4）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5% 香草醛硫酸，105 ℃加热烘干显色清晰。供试品与对照药材在色谱相应位置上有相同颜色斑点，而阴性对照无干扰，结果见图3。

2.3 延胡索薄层鉴别

2.3.1 取本品1片，加甲醇50 mL，300W超声处理1 h，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解，加浓氨水调pH 至碱性，乙醚萃取，挥干后，甲醇溶解作为供试品溶液；取缺延胡索的阴性样品（按处方去除延胡索），依法制得阴性对照溶液；取对照药材粉末1 g，处理方法同供试品溶液，制成对照药材溶液。

2.3.2 照薄层色谱法（附录VI B）试验[2]，吸取上述3种溶液10μL，分别点于同一块硅胶G薄层板，以甲苯-丙酮（9：2）为展开剂，展开，取出，晾干，碘蒸气熏3 min，在紫外灯（256 nm）下显色清晰。供试品与对照药材在色谱相应位置上有相同颜色荧光斑点，而阴性对照无干扰，结果见图4。

2.4 芥子碱硫氰酸盐的含量测定[3-5]

进行对照品溶液制备、供试品溶液制备、阴性对照溶液制备，备用。通过对进行线性关系考察、精密度试验、稳定性试验表明内有良好的线性关系、仪器精密度良好、供试品溶液在10 h 内稳定。

3 讨论

含量测定的关键在于取样的均匀性和完全性，由于巴布剂的基质为高分子材料，且具有一定的黏度，还有很多附加剂及溶媒，提取精制比较困难，根据药物特性，可容易甲醇，实验比较用该溶剂直接萃取，蒸馏法等都显示，其有效成分溶出率较低，不适宜定性的标准，而通过超声过后，利用空化效应可以是溶劑渗透性增强，有效成分扩散增加，达到比较高的提取率。最终采用本文报道的方法，通过方法学验证，结果稳定可行，可作为本品的质量控制指标，并为其他巴布剂含量测定的质量标准研究提供参考。

参考文献

[1] 李立芳.天灸[J].寻医问药，2011，7：28-29.

[2]中国药典[S].一部. 2005：附录31.

[3] 刘莉，穆晓敏，沈亦妙，等.穴敷喘平凝胶贴剂质量标准研究[J].中国实验方剂学杂志， 2010， 16（11）：32-34.

[4] 邓红，区洁雯，张蜀，等.复方白芥子巴布剂的质量标准研究[J].中成药，2010，32（5）：886-888.

[5] 张新勇，刘丽芳，徐中南，等.HPLC法测定复方止咳清肺胶囊中有效成分含量的研究[J].中国野生植物资源，2011，30（1）：61-63.