701跌打镇痛膏镇痛作用研究

邓慧敏，肖百全，郭健敏，汪玉芳，符美燕，杨 威

（1.广州白云山制药股份有限公司白云山何济公制药厂，广东广州 510410；2.广州医药研究总院有限公司药物非临床评价研究中心，广东广州 510240）

临床上治疗跌打损伤、风湿痹痛的药物很多，如非甾体类抗炎镇痛药吲哚美辛等、传统中医药中的各种跌打损伤膏药等，在临床上发挥了一定的疗效，但化学药物大都存在副作用大，停药后疼痛反复发作等问题；传统中药大都也存在镇痛作用弱，镇痛作用机制不清晰等问题。上述问题在一定的程度上都限制了相应药物的应用。701跌打镇痛膏在国内外上市销售多年，临床疗效确切。然而其对何种类型的疼痛疗效更敏感，以及其镇痛作用是通过外周或者是通过中枢发挥的至今未见相关报道。为进一步明确701跌打镇痛膏镇痛作用的特点及初步探讨其作用机制而进行本研究。

1 材料与方法

1.1 药品与试剂701跌打镇痛膏，广州白云山制药股份有限公司白云山何济公制药厂市售产品，批号为U1045。吲哚美辛贴剂：日本兴和株式会社产品，含吲哚美辛35mg，批号为AX01。精制狗皮膏：天津同仁堂集团股份有限公司产品，批号为 AX01；角叉菜胶：Sigma公司产品，批号为127H1227。白陶土：阿拉丁，批号为38120。

1.2 实验动物ICR小鼠70只、SD大鼠80只，SPF级，♂♀各半，小鼠体质量18～22g、大鼠体质量160～200g，合格证号分别为 HANSLKJ20121326、HNASLAKJ20121701，均从湖南斯莱克景达实验动物有限公司购入。

1.3 仪器BP2100、TE601-L电子天平，北京赛多利斯仪器系统有限公司生产。YLS-3E电子压痛仪，山东医学科学院设备站。

1.4 方法

1.4.1 对大鼠单足致炎模型后肢压痛的影响［1－3］大鼠于试验当天双足测定基础痛阈值两次，取其均值作为各鼠左右足的基础痛阈值，剔除平均基础痛阈值在200～300g以外的动物，然后根据基础痛阈值将动物随机分成空白对照组、模型对照组、吲哚美辛组、精制狗皮膏组、701低、中、高剂量组，每组10只。每只大鼠右后肢足跖部注射4%白陶土混悬液0.1ml，1h后再注入2%角叉菜胶0.05ml，空白对照组每次均注射等容积的生理盐水。以首次注射时间为致炎开始时间。注射角叉菜胶后，各组立刻腹部敷贴相应的药物（药物与皮肤接触6h），仅给药1次。测定给药后1、2、4、6 h大鼠的双后足痛阈，致炎足与非致炎足交替进行。给药剂量：大鼠用量设定为0.36、0.72、1.44贴/kg，小鼠用量设定为0.52、1.04、2.08贴/kg。吲哚美辛贴大鼠、小鼠用量分别设定为0.72、1.04贴/kg；精制狗皮膏大鼠、小鼠剂量分别设定 0.8贴/kg、1.04贴/kg。

1.4.2 对甲醛诱发的小鼠疼痛模型的影响［1－3］ICR小鼠按体重随机均衡分成7组（组别同1.4.1），每组10只，♂♀各半。分组后各组按设定要求腹部敷贴给药，每天1次，连续5 d，药物与皮肤至少接触6 h；吲哚美辛仅末次给药1次，其余时间每天包扎纸胶布。末次给药后约2 h时，于小鼠右后爪足跖底部注射30μl 2.5%的福尔马林溶液，注射后立即计时，并将小鼠放于倒置的1 000 ml的烧杯内。以小鼠舔、咬、抖动右后足为痛反应指标，分别记录小鼠在注射后0～10 min及10～30 min两个时相的累计疼痛反应时间。给药量及给药方法见 “1.4.1”。

2 统计学方法

所有数据均输入SPSS 13.0，并采用ONE-WAY ANOVA法进行统计分析，各组计量数据均用±s表示。

3 结果

3.1 对大鼠单足致炎模型后肢压痛的影响实验结果表明（Tab 1、2），与模型组相比，701跌打镇痛膏高剂量和吲哚美辛给药后2 h能明显提高大鼠右后足痛阈（P＜0.01），且两者增加大鼠右后足痛阈的作用相当；精制狗皮膏未见明显镇痛作用。各试验组造模前后非致炎足（左足）痛阈相近，未见明显差别。

Tab 1 Change of the threshold of pain of the ratmodel after adm inistrator（right foot，±s，n＝10）

Tab 1 Change of the threshold of pain of the ratmodel after adm inistrator（right foot，±s，n＝10）

**P＜0.01 vs control group；＃P＜0.05，＃＃P＜0.01 vs negative control group

Group Dose/paste·kg－1 Threshold of pain after administrator/g.6 233.9±20.3 251.1±24.5 242.4±20.2 Control group － 238.2±17.9 160.6±13.7＃＃ 177.4±15.8＃＃ 199.6±26.1＃＃ 225.8±22.2 Indomethacin group 0.72 239.0±12.4 180.3±39.1＃＃ 195.9±12.8＃** 214.5±9.7＃ 226.5±14.9 Goupigaoyao group 0.72 236.2±15.3 161.6±20.8＃ 184.8±28.7 207.9±18.1 238.9±21.4 701 low dose group 0.36 240.4±14.0 171.3±30.4 173.3±15.3 197.9±18.9 223.1±11.4 701 middle dose group 0.72 241.4±22.4 164.9±26.5 183.1±30.6 205.5±24.5 239.4±19.5 701 high dose group 1.44 238.6±16.4 173.9±21.6 203.7±19.7**1 h 2 h 4 h 6 h Negative control group － 239.9±24.5 247.1±19 Basic threshold of pain/g 216.4±20.1 226.4±22.6

Tab 2 Change of the threshold of pain of the ratmodel after adm inistrator（left foot，±s，n＝10）

Tab 2 Change of the threshold of pain of the ratmodel after adm inistrator（left foot，±s，n＝10）

Group Dose/paste·kg－1 Threshold of pain after administrator/g.7 240.5±16.0 251.2±16.4 245.9±15.5 Control group － 237.5±14.7 237.2±15.5 240.6±12.6 241.6±17.1 240.3±21.0 Indomethacin group 0.72 249.4±18.1 244.0±22.4 243.1±12.9 230.2±15.2 238.3±19.1 Goupigaoyao group 0.72 232.8±18.9 238.7±21.4 235.5±13.2 235.0±18.3 241.2±13.8 701 low dose group 0.36 240.5±22.2 228.0±23.2 232.9±7.8 243.0±12.2 240.6±20.0 701 middle dose group 0.72 229.0±12.9 242.9±21.2 234.9±20.6 233.6±15.8 240.3±14.3 701 high dose group 1.44 221.0±47.4 234.8±18.1 h 2 h 4 h 6 h Negative control group － 247.7±23.5 249.1±14 Basic threshold of pain/g 3 242.7±12.0 242.1±19.4 238.8±13.1

3.2 对甲醛诱发的小鼠疼痛模型的影响实验结果表明（Tab 3）：与模型组相比，701跌打镇痛膏中、高剂量能明显减少小鼠第Ⅱ相疼痛时间，有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。吲哚美辛也能明显减少第Ⅱ相小鼠疼痛时间（P＜0.01）。精制狗皮膏对小鼠Ⅰ、Ⅱ相疼痛时间未见明显影响。

Tab 3 Effect of 701 on m icemodel induced by formaldehyde（±s，n＝10）

Tab 3 Effect of 701 on m icemodel induced by formaldehyde（±s，n＝10）

*P＜0．05，**P＜0．01 vs control group

Group Dose/paste·kg－1 Time of theⅠ period/s Time of theⅡperiod/s Control group － 66.0±13.1 243.6±94.1 Indomethacin group 1.04 53.6±16.4 122.4±72.3**Goupigaoyao group 1.04 75.8±16.3 212.5±77.7 701 low dose group 0.52 66.7±21.2 210.9±84.9 701 middle dose group 1.04 56.2±9.5 156.8±88.3*701 high dose group 2.08 62.1±8.1 129.6±65.5**

4 讨论

大鼠后肢压痛模型属于炎症性疼痛模型，是评价药物是否具有镇痛作用的常用模型。本研究结果表明，701高剂量组单次腹部敷贴给药后能够明显提高大鼠致炎足的痛阈，但对非致炎足痛阈未见明显影响，镇痛作用最强点约位于给药后2h，表明701跌打镇痛膏对炎症性疼痛具有明显的镇痛作用，且其镇痛作用是通过外周发挥的。

小鼠甲醛致痛模型属于化学物质致痛模型，第Ⅰ相通常被认为与中枢性疼痛有关，第Ⅱ相疼痛被认为与外周性疼痛有关。实验结果表明，701中、高剂量组连续腹部敷贴给药5 d后能明显减少第Ⅱ相小鼠的舔足时间，并且具有明显的量效关系，但对第Ⅰ相小鼠舔足时间未见明显影响，该结果表明，701对化学刺激致痛具有明显的镇痛作用，且其镇痛作用是通过外周发挥的，该结果与大鼠炎症性疼痛模型研究结果吻合。

根据上述研究结果可知，701跌打镇痛膏无论是单次还是多次给药后均能表现出明显的镇痛作用，对炎性物质引起的炎症性疼痛和化学性物质引起的刺激性疼痛具有明显的改善作用，镇痛作用强度与吲哚美辛贴相近，并且可判断其镇痛作用是通过外周发挥的。在临床应用中可推测701跌打镇痛膏对跌打损伤性疼痛和炎症性疼痛应该具有良好的疗效，可进一步推广应用。

参考文献：

［1］杨 光，闫 琳，高进贤，等.氧化槐定碱镇痛作用及其对小鼠中枢 GABA＿arα1表达的影响［J］.中国药理学通报，2011，27（8）：1055－9.

［1］Yang G，Yan L，Gao JX，etal.Analgesic effectof oxysophoridine with intravenous injection and its influence on central nervous GABAA Rα1 receptor in mice［J］.Chin Pharmacol Bull，2011，27（8）：1055－9.

［2］苏 珍，戴体俊，蔡 伟，等.不同浓度福尔马林对兔疼痛反应和定量药物脑电图α1频段的影响［J］.中国药理学通报，2007，23（12）：1584－7.

［2］Su Z，Dai T J，CaiW，et al.Effect of different concentration of formalin onα1-band of QPEEG in rabbits［J］.Chin Pharmacol Bull，2007，23（12）：1584－7.

［3］霍佩琼，罗 超，姚春霞.金不换总生物碱对小鼠的镇痛作用［J］.中国新药杂志，2008，17（14）：1226－32.

［3］Huo PQ，Luo C，Yao C X.Analgesic effects of total alkaloids in Radix Stephaniae in mice［J］.Chin JNew Drug，2008，17（14）：1226－32.