224株革兰阴性杆菌临床分布及耐药性分析

马艳荣等

【摘要】目的：了解新疆焉耆地区的革兰阴性（G-）菌的临床分布及耐药性分析，为临床合理应用抗菌药物提供依据.方法 ：采用VITEK2-Compact型全自动分析仪，结合K-B纸片扩散法对分离菌株进行鉴定和药物敏感性测定；结果：革兰氏阴性菌224株；肠杆菌128株；非发酵菌56株；其他40株；肠杆菌科以大肠埃希菌为主，占30.3%，其次为肺炎克雷伯菌，占9.3%；非发酵菌以铜绿假单胞菌为主，占21.4%，其次为鲍曼不动杆菌，占11.10%；大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、阴沟肠杆菌是临床上主要致病菌。肠杆菌科和非发酵菌对亚胺培南最为敏感，对头孢他啶、氨曲南、头孢替坦、头孢曲松、左氧氟沙星、复方新诺明都比较敏感.结论：革兰阴性菌对多种抗生素有获得性耐药倾向，应加强对细菌耐药性监测，防止耐药菌株播散， 尤其是产金属β-内酰胺酶菌株的蔓延和暴发流行"

【关键词】革兰阴性菌；抗菌药物；药物敏感性试验；

【中图分类号】R722.12 【文献标识码】B【文章编号】1004-4949（2014）01-0121-01

为了解我院临床分离G-菌对常用抗菌药物的耐药性及其产金属β-内酰胺酶现状，我们对本院2011年1月-2012年12月分离的部分G-菌进行了耐药性分析和金属β-内酰胺酶检测，现报告如下。

1材料与方法

1.1 菌株来源 我院2011年1月～2012年12月从临床分离的224株革兰阴性菌。

1.1.2 主要仪器与试剂 VITEK2-Compact全自动微生物鉴定仪及GN鉴定卡：法国生物梅里埃公司.

1.1.3药敏纸片及培养基 所用补充药敏纸片氨苄西林、氨曲南、环内沙星、头孢替坦、头孢曲松、头孢唑林、庆大霉素、亚胺培南、左氧氟沙星、复方新诺明、头孢他啶均为英国Oxoid公司产品。

1.1.4质控菌株 金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853均购自卫生部临床检验中心。

1.2细菌的分离，培养，鉴定及药敏试验 按《全国临床检验操作规程》（第2版）进行细菌的分离培养和常规鉴定， VITEK2-Compact全自动微生物鉴定仪鉴定，并结合K-B纸片扩散法检测其对11种抗菌药物的敏感性。结果判定及质量控制按美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）2004版标准进行，并统一检测金属β-内酰胺酶。

1.2.1 EDTA纸片的制备 称取1.86gEDTA-Na2-H2O溶于10mL蒸馏水中，用5mmol/L的NaOH调pH值至8.0，高压蒸汽灭菌。用打孔器制作6mm滤纸片，灭菌备用。取上述EDTA溶液原菌4uL于滤纸片，置无菌平皿于90温度烤箱10min烤干，于无菌干燥密闭瓶中-20温度保存。

1.2.2 金属β-内酰胺酶的检测 采用双纸片协同法[1]，在直径9的琼脂平板上，按K-B法药敏试验方法接种待测菌后， 在正中帖上EDTA-Na2纸片， 在纸片周围，与EDTA-Na2纸片相距20mm处的3个不同方向分别贴上CAZ 、CTM 、IMP三种药敏纸片， 35摄氏度温箱内培养18～24h， 若滤纸片与三种药敏纸片中的任何一种之间出现抑菌环扩大现象则表示待测菌株产生金属酶。

2结果

2.1 病原菌分布及药物敏感性分析

2.1.2 肠杆菌128株；非发酵菌56株；其他40株；肠杆菌科以大肠埃希菌为主，占30.3%，其次为肺炎克雷伯菌，占9.3%；非发酵菌以铜绿假单胞菌为主，占21.4%，其次为鲍曼不动杆菌，占11.10%。肠杆菌科和非发酵菌对亚胺培南最为敏感。

3讨论

本试验结果显示， 大肠埃希菌是G-菌中分离率最高的菌种，达30.30%，其次是铜绿假单胞菌（21.40%），鲍曼不动杆菌（11.10%），肺炎克雷伯氏菌（9.30%）。标本类型不同，病原菌构成也不相同. 大肠埃希菌感染部位主要见于泌尿道、呼吸道、伤口等，而铜绿假单胞菌是呼吸道感染的主要病原菌.从表2被监测的药物来看，亚胺培南对革兰阴性菌的敏感性最高，但因其易致二重感染，同时又是良好的酶诱导剂，加上价格昂贵，所以只能作为治疗混合感染的二线用药。临床上应在药物敏感试验指导的前提下，优先选用氟喹诺酮类、氨基糖苷类抗生素。由于广谱抗生素的滥用以及细菌间的耐药基因，细菌对常用抗菌药物的耐药已经发展成为人类健康面临的严重问题之一[2] 因此，我们在应用抗生素时，要严格掌握适应证，遵守抗菌药物合理使用指导原则[3]，抑制金属酶的产生，阻断耐药基因在细菌间传播，设计有效的抗金属酶抑制剂，将是今后微生物学家和医疗人员工作的重要内容。

参考文献

[1] 蒋晓飞，洪秀华，倪语星.金属β-内酰胺酶—抗感染治疗面临的新挑战[J].中国抗生素杂志，2002，27（11）：700-704

[2] 王睿， 柴栋. 细菌耐药机制与临床治疗对策 [J].国外医药抗生素分冊，2003 ，24（3） ：97-102.

[3]许景峰.《北京军区抗菌药物合理应用指导原则》介绍[J]. 解放军药学学报，200，19（1） ：71