蒙成药石榴四味散中胡椒碱的含量测定研究

哈斯巴根 达林太

【摘 要】 目的 建立石榴四味散中胡椒碱的含量测定方法。方法 采用反相高效液相色谱法，色谱主为C18柱，以甲醇—水（70：30）流动相，流速：1.0 ml/min，检测波长为343nm。结果 胡椒碱在0.08947-0.8947μg 区间内呈良好的线性关系，r=0.9999，平均回收101.6%，RSD为1.6%（n=9）结论 实验所用方法专属性强、重现性好、精密度高，能准确地对胡椒碱进行含量测定。

【关键词】 石榴四味散；高效液相色谱法；胡椒碱；含量测定

【中图分类号】 R965 【文献标识码】 A

1 仪器与试药

1.1 仪器岛津 SPD-20A型高效液相色谱仪，岛津ΜV-2550型紫外分光光度仪，Mettler Toledo XS205型十万分之一天平，Mettler Toledo XP6型百万分之一天平。

1.2 试剂与试药胡椒碱对照品，色谱甲醇，高纯水，分析纯。

2 方法学检察

2.1 检验条件

2.1.1 色谱柱 ODS-SP C-18柱。

2.1.2 流动相 甲醇-水（70：30）流动相。

2.1.3 柱温 应控制在30℃

2.1.4 波长 2010年版《中国药典》一部，测定“荜拨”含量检测项下，选择343nm为波长度检测。

2.1.5 理论板数 依据多批样品的检测数据证明，胡椒碱理论板数的分离效果在1500以上能达到较好，所以定为不小于1500。

2.2 效率检察

2.2.1 溶剂确定 溶剂确定为乙醇（无水）。

2.2.2 效率检察 溶剂为乙醇（无水），超声处理半小时。

2.3 专属性 制备对照品：精密称定胡椒碱对照品，置褐色量瓶，加乙醇（无水），制作成15μg/1m的溶液。制备供试品：精密称取样品粉末800mg，置100ml褐色量瓶内，加乙醇（无水）80ml，超声处理半小时，放冷，乙醇（无水）加到刻度，摇匀，过滤，量取续滤液。阴性试验 ：阴性对照供试品以缺荜茇，同一个工艺制备出，按照处方比例称取，制得阴性对照溶液。上述条件下，分别对三种溶液各精密吸取10μl，逐次注入液相色谱仪中，测得结果：三种色谱图相对应的保留时间处无出现色谱峰，这充分证明其他组分对胡椒碱的测定没有干扰。

2.4 检察线性关系 胡椒碱对照品（0.17894mg/ml），精密量取0.5、1、2、3、4、5ul进样，按照上述条件下检测，以进样量对峰面积进行回归分析，结果为胡椒碱在0.01790-0.53683μg区间内具有良好的线性联系。

2.5 稳定试验 溶液稳定试验：取同一份溶液，在0、4、8、12、24h进行测定，结果详见表1。由表1数据证明，在24小时内胡椒碱的峰面积积分值基本稳定无大的变动。

2.6 精密度测定 重复性试验取模拟样6份，精密称定约400mg，按上述供试品溶液的制备方法操作测定。得出结果见表2。

2.7 准确限度 添加样品试验：取样品（含量2.028mg/g）6份，各取约400mg，精称，置100ml 褐色量瓶，精密加入用乙醇（无水）配制的胡椒碱对照品溶液（浓度为0.17895mg/ml）2、4、6ml，再精密加入乙醇（無水）80ml，分别按照含量测定方法进行操作，测定每份样品含量值，计算其回收率。三批样含量测定，取本品按上述方法处理并测定与模拟样的测定结果：见表3

3 检测限的确定

理论折算，本批次模拟样应含胡椒碱2.658mg/g，转移率=2.061/2.658×100%=77.5%。按照2010年版《中国药典》一部，荜茇检验项下规定：胡椒碱的量不得小于2.5%。含量低限=50/500×2.5%×77.5%×1000=1.938mg/g。所以暂时规定本品含荜茇/1g以胡椒碱（C17H19NO3）计算，不得小于1.5mg。

试验证明：该方法操作简便，测定结果准确，重复性好，回收率高，对控制石榴四味散内在质量具有重要意义。

参考文献

[1] 药典委员会主编.中华人民共和国药典[M].一部.中国医药科级出版社，2010：219.

[2] 内蒙古食品药品监督管理局编.内蒙古蒙药制剂规范[M].第一册.内蒙古人民出版社，2007：100.