探讨乳腺癌微卫星不稳定性及其与临床病理的关系

马丽 田笠

【摘要】探讨乳腺癌的微卫星不稳定性及其与乳腺癌临床病理的关系，寻找更有效的判断乳腺癌预后的分子标志，为乳腺癌的发生及预后判断提供理论依据。乳腺癌中普遍存在着MSI，并且MSI更多发生在有腋窝淋巴结转移、HER2表达及临床晚期的病例中，提示预后较差的乳腺癌病例中MSI的发生率更高，MSl可能是判断乳腺癌临床分期的一个分子标志，有助于对乳腺癌的预后评估。

【关键词】乳腺癌 微卫星不稳定 预后

【中图分类号】G64 【文献标识码】A 【文章编号】2095-3089（2014）12-0233-01

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一。其发生是一种多基因参与，多种遗传学改变累积的结果。而细胞的基因组不稳定是导致乳腺癌发生的重要遗传学改变。目前研究认为，人类肿瘤的基因组不稳定性分为两种不同的类型：一种是微卫星不稳定性（microsatellite instability，MSI），另一种是杂合性缺失（Loss of heterozygosity，LOH）。微卫星（microsatellite，MS）是广泛分布于原核和真核生物基因组中小于10个核苷酸的简单重复序列，约占人类基因的10%，核心序列为1～6 bp[2]。MS在人群中表现为高度多态性主要是由于重复序列中碱基的数目不同，正常个体体细胞在生长发育过程中MS長度（或重复序列的重复次数）是保持不变的。MSI是指由于复制错误引起的简单重复序列的增加或丢失。MSI是细胞核内基因组不稳定的一个重要标志，肿瘤组织与相对应的非肿瘤组织相比，其结构性等位基因的大小发生改变，即MS重复单元的增加和丢失。在扩增片段长度多态性分析中，表现为肿瘤组织DNA出现而非肿瘤组织中不出现的异常的条带，或肿瘤组织的一个等位基因与非肿瘤组织相应等位基因相同，而另一等位基因的位置发生改变。1993年，Altonen等[1]首次发现在HNPCC细胞中D2S123位点存在高频率的MSI，以后相继在肺癌、胃癌、白血病等其它肿瘤细胞内也发现了MSl的存在。随着对MSI的深入研究，现在普遍认为MSI的发生与DNA错配修复系统功能缺陷有关。有研究显示人类错配修复（mismatch repair。MMR）系统中任何一个基因的突变都可使DNA复制精确性下降，导致整个基因组的不稳定，而最易观察到的不稳定性表型即为MSI。另外有文献报道通过对MSI的肿瘤细胞系进行体外错配修复活性检测，发现这些肿瘤细胞系均表现有DNA链特异性错配修复功能的缺陷，因此推断MSI可能是由于MMR缺陷所致，而MSI可作为一个检测肿瘤细胞突变表型的敏感指标[3]。而在乳腺癌中是否存在MSI，不同的实验结果很不一致。Pehomaki等[4]检测了84例乳腺癌，结果没有发现二核苷酸的MS位点存在MSI。而Luqmani等[5]发现在发病年龄较早的乳腺癌患者中MSI的发生率很高。

我们的实验有18例正常乳腺病例均未见MSI，39例乳腺良性肿物病例有5例发生了MSI，MSI的发生率为12.82%，而在78例乳腺癌病例中则有35例发生了MSI，MSI的总发生率为44.87%，3组病例MSI的发生率差异有统计学意义（P=0.000），提示乳腺癌中更容易发生MSI。考虑产生MSI的原因可能是外源性化学或物理的损伤，使DNA复制过程中滑动或修复时滑动链与互补链发生碱基错配。导致一个或几个重复单位的插入或缺失，即复制错误引起简单重复序列的改变而产生了MSI。而机体中的MMR基因也可能是因为环境因素所致突变，使整个MMR系统功能缺陷，无法修复DNA复制过程出现的错误，而使已经发生的MSI得以保存在细胞DNA中。如果MSI发生于控制细胞生长和增殖的基因（如BAX和TGFl3），使得这些基因的突变，细胞增生失去控制而恶性变，从而导致肿瘤的发生。Seitz S等[6]用CAL51和MT-3两个乳腺癌细胞株来检测MSI，结果发现两种细胞株中均普遍存在着MSI。本实验中还发现在腋窝淋巴结转移、creb-B2基因表达及临床分期较晚的乳腺癌病例中MSI的发生更多。可能是因为随着细胞群体持续扩增，已保存在细胞DNA中的MSI为下一轮致突变事件提供克隆性的靶细胞群体，使MSI在新扩增的细胞内再一次发生，最终有可能导致细胞基因组稳定性严重受损，细胞增生及分化异常而出现细胞恶变，甚至发生恶性细胞的增殖和侵袭。Paulson等[7]报道乳腺癌中MSI与存活率下降及预后不良有关，具有MSl的病例较MSS病例的肿瘤体积更大，受累的腋窝淋巴结数更多，组织学分期更晚。实验中所选用的两个2号染色体上的位点D2S443和D2S2739 MSI的发生率分别为23.08%和29.49%，MSI的发生率均较高。同时MMR基因中的hMSH2也定位在2号染色体上，因此怀疑乳腺癌中MSI的发生可能与hMSH2基因有关，但两者是否有关还有待进一步研究。另外有研究显示，乳腺癌中MSI的发生与MMR系统无关，可能存在着别的机制促使乳腺癌中MSI的发生。Wild PJ等[8]的实验发现乳腺癌MSI的病例表达hMSH2和hMLHl正常，而p53基因的外显子5～9均有突变，从而得出乳腺癌MSI的发生与错配修复途径失活并不一致的结论，p53基因突变是导致乳腺癌MSI发生的机制之一。可见乳腺癌广泛存在着MSI，但其发生机制还有待更多的实验来进行研究。

综上所述，MSI在乳腺癌中普遍存在，且与乳腺癌临床预后较差的因素（腋窝淋巴结转移、creb-B2基因表达及临床分期晚）有关。提示MSI可能是判断乳腺癌临床分期的一个分子标志，亦可能成为判断预后的一个分子标志，可对推测预后提供有益的帮助。